復方林可霉素乳膏質量標準研究*

林 宏，陳貴起

(天津市兒童醫院，天津 300074)

復方林可霉素乳膏由鹽酸林可霉素、曲安縮松等藥物組成，臨床用于治療異位性皮炎，療效與復方氯霉素乳膏相同，且避免了氯霉素可能出現的不良反應。同時該藥也可用于治療濕疹、接觸性皮炎、神經性皮炎和摩擦性苔癬樣疹等變態反應性皮膚病[1]。

1 儀器與試藥

1.1儀器 Waters高效液相色譜儀，配備600E型泵，486型可變波長檢測器，800工作站(美國)；萬分之一天平(德國Sartourius BP 110S)。

1.2試藥 鹽酸林可霉素(華北制藥集團華欒有限公司，批號070720)，鹽酸林可霉素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號130432-200407，含量86.2%)，硼酸、磷酸，復方林可霉素乳膏(本院制劑室自制，批號0809071、0809072、0809073)。

2 方法和結果

2.1鑒別 在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間與鹽酸林可霉素對照品溶液主峰的保留時間一致，且本品水溶液顯氯化物的鑒別反應[2]。

2.2鹽酸林可霉素含量測定

2.2.1色譜條件 色譜柱：Bondapak C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)；流動相：0.05 mol/L硼酸溶液(磷酸調pH至6.0)-甲醇(5∶5)，流速0.7 ml/min，檢驗波長214 nm，進樣量20 μl。

2.2.2溶液制備

2.2.2.1對照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒重的鹽酸林可霉素對照品500.0 mg，置于100 ml量瓶中，加甲醇適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為5.0 mg/ml的鹽酸林可霉素對照品溶液。

2.2．2.2供試品溶液的制備 精密稱取本品2.0 g，置于25 ml三角燒瓶中，加甲醇15 ml，超聲使之溶解，置70 ℃水浴中加熱提取2次，每次3 min，放冷至室溫，用流動相稀釋至刻度，搖勻，置于冰浴中冷卻2 h，迅速過濾至50 ml量瓶中，定容至刻度，即為供試品溶液。

2.2.2.3陰性對照溶液的制備 “2.2.2.2”項下供試品不加入鹽酸林可霉素，其他按供試品溶液的方法制備即得。

2.2.3系統適用性試驗 分別吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液進樣測定，鹽酸林可霉素的保留時間為 9.16 min，色譜圖見圖1。結果表明：供試品溶液在對照品溶液鹽酸林可霉素保留時間處有一色譜峰，而陰性對照溶液在該處未出現色譜峰，對測定無干擾。

1.鹽酸林可霉素

2.2.4標準曲線的繪制 分別精確量取鹽酸林可霉素對照品溶液適量，加流動相于量瓶中稀釋定容成1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 mg/ml的系列對照品溶液。各吸取20 μl進樣，記錄色譜圖。以鹽酸林可霉素的濃度(X)與吸收峰高(Y)作線性回歸，得回歸方程：Y=1.058×106X-0.528 5×105(r=0.991 6)，鹽酸林可霉素在1.0～3.0 mg/ml濃度范圍內峰高與濃度呈良好的線性關系。

2.2.5精密度試驗 取5.0 mg/ml的鹽酸林可霉素對照品溶液連續進樣6次，測定吸收峰面積，RSD為0.4%(n=6)，表明儀器精密度良好。

2.2.6穩定性試驗 取同一批號的樣品(批號0809071 )制備成供試品溶液，分別于0、2、4、8、12和24 h測定各自鹽酸林可霉素的吸收峰面積，RSD為0.42%，表明供試品溶液在制備24 h內穩定。

2.2.7重復性試驗 取同一批號樣品，按“2.2.2.2”項下方法制備樣品溶液5份，測定鹽酸林可霉素含量，RSD為1.82%，符合規定。

表1 樣品含量測定結果(n=3)

2.2．8回收率試驗 制備不含鹽酸林可霉素的空白乳膏，稱取空白藥膏1.0 g，按處方量的80%、100%、120%分別加入對照品溶液4、5、6 ml各3份，按“2.2.2.2”項下處理后進樣，峰面積與等濃度對照品溶液相比，計算回收率，平均回收率101.58%，RSD為1.29%。

2．2.9樣品含量測定 取“2.2.2.2”項下制備的樣品溶液，再以“2.2.1”項下色譜條件進樣，記錄色譜圖，以回歸方程計算鹽酸林可霉素含量，見表1。

2.2.10樣品穩定性試驗 將3批樣品(批號0809071、0809072、0809073)于室溫條件下保存15個月，分別在第2、4、8、12和15個月月末取樣進行穩定性重點考查項目檢測[3]。考查結果顯示：與0月相比，鹽酸林可霉素的含量無顯著變化，在第12個月時，顏色有點變深(結果見表2)。

表2 穩定性試驗結果(n=5)

3 討論

3.1測定波長的考查 取鹽酸林可霉素對照品溶液在200～300 nm波長范圍內進行紫外掃描測定，結果在214 nm處有較大吸收峰，故選擇214 nm作為檢測波長[3]。

4.2樣品的處理方法 本品為乳膏制劑，直接進樣會堵塞液相柱，因此樣品的處理非常重要。通過試驗比較(選擇甲醇、流動相、硼酸緩沖液分別提取樣品)，以甲醇提取的樣品回收率最好(三種溶劑提取樣品的平均回收率依次為100.9%、92.5%、97.2%)，最終選擇甲醇為提取溶劑。采用高效液相色譜法測定制劑中的鹽酸林可霉素的含量，具有色譜分離理想，標準曲線線性關系良好，特異性強，精密，準確，回收率高等特點[4，5]。

3.3留樣觀察試驗 本品室溫常規條件下放置15個月，鹽酸林可霉素的含量基本未變，在第12個月時外觀顏色稍變深，質量基本穩定。

1 陳新謙，新編藥物學.第16版.北京：人民衛生出版社，2007：94，626

2 中國藥典.二部.2005：531

3 舒冰，方焱.1%鹽酸林可霉素乳膏的制備及質量控制.中國藥師，2008，11(9)：1047

4 樸淑娟，張純.HPLC法測定林可霉素乳膏中鹽酸林可霉素含量.藥學實踐雜志，2008，26(5)：357

5 李寧宇.鹽酸林可霉素滴眼液含量測定方法的改進.中國藥師，2007，10(6)：568