注射用頭孢地嗪鈉含量測定的不確定度分析*

曹立全

(天津市藥品檢驗(yàn)所，天津 300070)

隨著《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》于2007年1月1日的實(shí)施，通過相關(guān)資質(zhì)認(rèn)定的各級藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)均建立了新的質(zhì)量體系。根據(jù)質(zhì)量體系運(yùn)行的要求，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立有關(guān)測量不確定度的程序文件，以評價(jià)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。根據(jù)JJF1059-1999《測量不確定度評定與表示》中的有關(guān)規(guī)定，參考相關(guān)文獻(xiàn)資料[1，2]，結(jié)合日常的檢驗(yàn)工作，對注射用頭孢地嗪鈉的含量測定結(jié)果進(jìn)行測量不確定度評估，為評價(jià)檢測報(bào)告提供科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試藥 島津LC-2010C高效液相色譜儀；shimadzu CLASS-VP工作站；色譜柱:Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；梅特勒AG-245電子天平(瑞士，十萬分之一)。頭孢地嗪對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，含量88.6%，批號130520-200501)；注射用頭孢地嗪鈉(規(guī)格0.5 g，批號523240)；乙腈為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

1.2色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽乙腈溶液(取磷酸二氫鉀0.8 g，無水磷酸氫二鈉0.2 g溶于水，加入80 ml乙腈，用水稀釋至1 000 ml)為流動相；檢測波長為254 nm；柱溫40 ℃；流速1.0 ml/min；進(jìn)樣量10 μl。

1.3溶液的制備

1.3.1對照品溶液 精密稱取頭孢地嗪對照品28.31和28.92 mg，分別置50 ml量瓶中，加水適量使溶解并定容至刻度，搖勻。

1.3.2供試品溶液 精密稱取平均裝量項(xiàng)下注射用頭孢地嗪鈉27.62和27.37 mg，分別置50 ml量瓶中，加水適量使溶解并定容至刻度，搖勻。

2 不確定度的分析與評定

2.1識別不確定度來源 主要有對照品與供試品溶液峰面積響應(yīng)值、對照品與供試品的稱量與稀釋、對照品純度、供試品平均裝量等。

2.2建立數(shù)學(xué)模型

2.3分析并計(jì)算不確定度分量

2.3.1對照品引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(S)

對照品稱樣2份，分別為28.31和28.92 mg，則對照品稱樣的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度

urel(Sm)

urel(ρ)

=0.029/88.6=3.3×10-4。

合并以上兩個(gè)分量，則

urel(Sm)

=7.2×10-4。

=5.4×10-4。

2.3.1.3對照品溶液峰面積引入的不確定度urel(SV) 該不確定度的產(chǎn)生主要由重復(fù)進(jìn)樣所引起，由儀器給出的進(jìn)樣峰面積標(biāo)準(zhǔn)偏差為隨機(jī)測量，屬于A類不確定度。2份對照品分別進(jìn)樣5次和2次，用極差法分別計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)不確定度，重復(fù)測量的峰面積平均值為8 760 915和8 946 170，極差R1為23 077，R2為7 891，當(dāng)n=5時(shí)極差系數(shù)C1=2.33，則標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(SA1)=R1/C1=23 077/2.33=9 904；當(dāng)n=2時(shí)極差系數(shù)C2=1.13，則標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(SA2)=R2/C2=7 891/1.13=6 983；則相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度

urel(SA)

=1.4×10-3。

2.3.1.4對照品的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(S)

urel(S)

=1.7×10-3

2.3.2供試品引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(T)

2.3.2.1供試品稱量引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(Tm) 主要來源于供試品稱量和平均裝量。根據(jù)“2.3.1.1”項(xiàng)下所述u(m)=1.3×10-2。供試品稱樣2份，分別為27.62和27.37 mg，則供試品稱樣的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度

urel(Tm)

=6.7×10-4供試品平均裝量為0.541 2 g，其標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.3×10-3，按A類評定中合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算，則供試品平均裝量的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

urel(Tm)

=2.0×10-3。

2.3.2.2供試品稀釋引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(TV) 同“2.3.1.2”項(xiàng)下，則urel(TV)=5.4×10-4。

2.3.2.3供試品溶液峰面積引入的不確定度urel(TA) 含量測定時(shí)，2份供試品溶液分別進(jìn)樣2次，用極差法分別計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)不確定度，重復(fù)測量的峰面積平均值為9 013 947和8 941 016，極差R1為10 286，R2為3 080，當(dāng)n=2時(shí)極差系數(shù)C=1.13，則標(biāo)準(zhǔn)不確定度

urel(TA1)=R1/C=10 286/1.13=9 103，

urel(TA2)=R2/C=3 080/1.13=2 726；則相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度

urel(TA)

=1.1×10-3。

2.3.2.4供試品的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(T)

urel(T)

=3.2×10-3。

2.3.3計(jì)算合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(X) 供試品含量測定結(jié)果P為101.20%，urel(X)是由對照品引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(S)和供試品引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(T)所構(gòu)成，故

urel(X)

=0.37%

2.3.4計(jì)算擴(kuò)展不確定度 按95%置信概率，取包含因子k=2，則U95=0.37%×2=0.74%。

2.3.5測量不確定度報(bào)告 本次實(shí)驗(yàn)注射用頭孢地嗪鈉的含量為(101.20±0.74)%。

3 討論

3.1測量不確定度是定量說明檢測結(jié)果的質(zhì)量的一個(gè)參數(shù)，檢測結(jié)果的可靠性很大程度上取決于其不確定度的大小，測量結(jié)果附有不確定度說明才是完整及有意義的。在本次實(shí)驗(yàn)中，測量不確定度主要來源于供試品的稱量，供試品和對照品色譜峰面積次之，因此，在實(shí)驗(yàn)中降低稱量步驟，加強(qiáng)對儀器的保養(yǎng)以及標(biāo)準(zhǔn)操作的訓(xùn)練，采用合理的取樣方式，就可以減少人為因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

3.2在測量不確定度的實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)和評定過程中，要盡可能接近日常檢驗(yàn)工作的實(shí)際情況，在本次評定注射用頭孢地嗪鈉含量測定的不確定度時(shí)，即采用了平行實(shí)驗(yàn)的日常檢驗(yàn)?zāi)Ｊ剑瑴y量結(jié)果為(101.20±0.74)%，測量結(jié)果的擴(kuò)展不確定度U95=0.74%，真實(shí)地反映了實(shí)驗(yàn)室日常檢驗(yàn)結(jié)果的水平。

1 申安.HPLC法測定頭孢氨芐膠囊含量的測量不確定度評定.藥物分析雜志，2009，29(8)：1384

2 倪育才.實(shí)用測量不確定度評定.北京:中國計(jì)量出版社,2004：25