孤獨癥兒童血漿多不飽和脂肪酸水平研究

龐偉，康倩倩，郭嵐敏,，王景濤，姜志梅,

孤獨癥(autism)是一種嚴重的廣泛發育障礙性疾病，主要表現為社會交往能力缺陷、言語交流障礙、刻板重復行為方式及興趣狹窄。多起病于出生30個月以內，男女患者比例為4～6:1。近幾年，隨著對精神疾病與脂肪酸之間關系的研究不斷深入，多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)與精神分裂癥、抑郁癥和自殺、雙向抑郁障礙等精神疾病之間存在關聯的研究相繼被報道，PUFAs與孤獨癥的研究成為一個新的熱點[1-3]。PUFAs是人體細胞的重要組成部分，參與構成細胞膜磷脂，對維持記憶、注意、思維、情感等大腦功能有重要作用[4]。本文探討孤獨癥兒童血漿中PUFAs水平及其與孤獨癥兒童臨床癥狀之間的相關性。

1 對象與方法

1.1 對象 從2009年4月～2009年12月就診于佳木斯大學附屬第三醫院發育與行為兒科的兒童孤獨癥患者中選取30名作為孤獨癥組，其中男性20例，女性10例；年齡3～12歲，平均5.4歲；身高85～140 cm，平均(134.2±59.12)cm；體重12～49 kg，平均(30.8±18.64)kg。孤獨癥診斷標準符合美國《精神障礙診斷和統計手冊》第四版(DSM-IV)，且孤獨癥兒童行為檢查量表(Autism Behavior Checklist,ABC)評分均大于67分。排除標準：①外脆性X綜合征、精神發育遲滯、選擇性緘默癥、強迫癥、特定感受性語言障礙、Rett綜合征等廣泛性發育障礙疾病；②已確診有染色體異常或其他與孤獨癥有關的神經疾病；③有軀體性疾病、服用興奮劑及其他治療孤獨癥藥物史；④近半年內有服用保健品史。

選取本市某幼兒園和某小學的健康兒童20名作正常對照組，其中男性13例，女性7例；年齡3～11歲，平均7.2歲；身高85～140 cm，平均(141.8±50.24)cm；體重13～54 kg，平均(31.2±21.32)kg。排除標準：嚴重軀體性疾病、神經系統疾病及發育延遲。

兩組兒童在性別、年齡、身高、體重方面無顯著性差異(P＞0.05)。

所有研究對象的父母均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 臨床評估 使用一般資料調查表對研究對象進行信息采集，同時應用Conner兒童行為量表、刻板重復行為量表(the Repetitive Behavior Scale-Revised,RBS-R)對孤獨癥組臨床特征進行評定。

1.2.2 脂肪酸分析 兩組兒童均于上午8:00～8:30空腹抽取肘靜脈血3 ml，裝于肝素抗凝管，立即以3000 r/min的速度離心15 min，吸取血漿于Ep管內，置于-80°冰箱凍存，采用高效液相色譜系統(Waters)進行脂肪酸分析。采用與標準品保留時間對照的方法定性，采用面積歸一法求各色譜峰面積，計算其相對含量。

1.3 統計學分析 所有數據均使用SPSS 16.0 for Windows統計軟件分析，計量資料采用兩樣本t檢驗，計數資料χ2檢驗，數據間相關性采用Pearson相關分析，顯著性水平α=0.05。

2 結果

2.1 兒童Conner兒童行為量表(父母問卷)評分比較孤獨癥組在品行問題、學習問題、心身障礙、沖動-多動、焦慮、多動指數因子方面得分均高于正常對照組(P＜0.05)。見表1。

2.2 兩組兒童RBS-R量表因子得分比較 孤獨癥組在刻板行為、自傷行為、強迫行為、儀式行為、固定行為、限制性行為以及總項目及總評分方面得分均高于正常對照組(P＜0.01)。見表2。

表1 兩組Conner兒童行為量表因子得分比較

2.3 兒童血漿PUFAs含量對比 孤獨癥組兒童α-亞麻酸(α-linolenic acid,ALA 18:3,n-3)、二十二碳六烯酸(docosahexenoic acid,DHA,22:6,n-3)和總n-3 PUFAs較正常對照組兒童下降(P＜0.05)，其中以DHA下降尤為明顯(P＜0.01)。而亞油酸(Linoleic Acid,LA,18:2,n-6)、花生四烯酸(Arachidonic Acid,AA,20:4,n-6)以及總n-6 PUFAs水平在兩組間無顯著性差異(P＞0.05)。見表3。

表2 孤獨癥組與正常對照組RBS-R量表因子得分比較

表3 孤獨癥組與正常對照組血漿PUFAs水平比較(μmol/L)

2.4 孤獨癥組Conner兒童行為量表(父母問卷)評分結果及其與血漿PUFAs水平的相關分析 將孤獨癥組Conner兒童行為量表問卷6個因子與孤獨癥組血漿PUFAs水平進行Pearson相關分析。結果發現沖動-多動因子得分與DHA和總n-3 PUFAs呈負相關(P＜0.05)；多動指數因子得分與DHA呈負相關(P＜0.01)；而品行問題因子和身心障礙因子得分與血漿PUFAs水平不具相關性。見表4。

表4 孤獨癥組Conner兒童行為量表得分結果與血漿PUFAs水平的相關分析

2.5 孤獨癥組RBS-R量表評分及其與血漿PUFAs水平的相關分析 將孤獨癥組RBS-R量表得分的6個因子(刻板行為、自傷行為、強迫行為、儀式行為、固定行為、限制性行為)與孤獨癥組血漿PUFAs水平進行Pearson相關分析。結果發現，刻板行為因子和自傷行為因子得分分別與ALA、DHA呈負相關(P＜0.01)；強迫行為因子得分與ALA呈負相關(P＜0.05)，但與DHA無統計學意義(P＞0.05)；同時6個因子與血漿PUFAs水平均沒有相關性(P＞0.05)。見表5。

表5 孤獨癥組RBS-R評分與血漿PUFAs水平的相關分析

3 討論

PUFAs是指含有兩個或兩個以上雙鍵且碳鏈長度為18～22個碳原子的直鏈脂肪酸。按照從甲基端開始第1個雙鍵的位置不同，可分為n-3和n-6 PUFAs，距甲基端的雙鍵在第3個碳原子上的稱為n-3 PUFAs，在第6個碳原子上的，則稱為n-6 PUFAs。n-3 PUFAs的母體是ALA，它在Δ5、Δ6去飽和酶的作用下轉化成二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA,C20:5)和DHA。n-6 PUFAs的母體是LA，由它可衍生出AA和GLA[5]。不飽和脂肪酸是神經組織中膜磷脂的重要組成成分，其中以AA和DHA最為重要。

許多研究表明，多不飽和脂肪酸在精神性疾病發病過程中起到重要作用，PUFAs對孤獨癥的治療作用也引起了研究者的注意[6]。Decsi等研究發現，從出生到成年的孤獨癥組脂肪酸水平同正常組相比總n-3 PUFAs降低50%[7]。Sliwinski等研究發現，孤獨癥兒童血漿磷脂脂肪酸的含量同正常兒童相比，DHA和總n-3 PUFAs均減少，而n-6 PUFAs未見明顯變化[8]。Bell研究報道，孤獨癥兒童患者中紅細胞膜DHA和總n-3 PUFAs水平與正常組相比明顯下降[9]。Bu等報道顯示，孤獨癥兒童與正常兒童相比EPA和二十二碳-13-烯酸芥酸含量降低[10]。本研究結果顯示，孤獨癥兒童與正常對照組相比ALA、DHA和總n-3 PUFAs，水平下降，孤獨癥組兒童在學習問題、沖動-多動，多動系數、焦慮方面與各脂肪酸水平成負相關，與以往報道結果相符。

PUFAs是磷脂和膽固醇酯的重要組成部份，在維持神經系統正常功能中發揮重要作用。正常情況下，PUFAs主要存在于神經元細胞膜上，尤其是突觸和樹突膜，保持細胞膜流動性[11]，如果這些脂肪酸供給不足，便會由其他種類脂肪酸代替，細胞膜的流動性降低，突觸和樹突的功能及細胞膜上的受體功能受損[12]，從而對腦功能產生影響。另外，Calderon等研究發現DHA能促進海馬神經元存活，顯著增加神經元突起數量和長度[13]；神經元突起的數量和長度增加，可使突觸的密度增大，形成更多神經元網絡，這對神經系統發育的重要表現，是學習記憶等高級腦機能的基礎。PUFAs供給不足則可能影響突觸的發育，這可能是孤獨癥發病的原因之一。

Meiri等從另一方面研究PUFAs對孤獨癥的影響，他們在孤獨癥兒童食物中添加n-3 PUFAs，經過12周的治療，發現9例患兒中，有8例兒童孤獨癥療效評估量表得分增加33%以上，且未出現任何副作用[14]。這表明補充PUFAs可以作為孤獨癥治療的輔助手段，具有一定的應用前景。

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[14]Meiri G,Bichovsky Y,Belmaker RH.Omega 3 fatty acid treatment in autism[J].J Child Adolesc Psychopharmacol,2009,19(4):449-451.