結膜松弛癥的組織病理學及超微結構變化研究

陳祎祎 彭建軍

(武漢市普仁醫院眼科 武漢 430081)

結膜松弛癥(conjunctivochalasis)是老年患者臨床中較為常見的眼科疾病,主要是因為球結膜出現松弛過度和下瞼緣張力明顯增高所引起,最終導致眼表淚液學出現明顯異常現象,同時還伴有眼部干澀,眼內異物感覺及溢淚等多種不適癥狀[1～2]。本研究擬觀察結膜松弛癥的組織病理學及超微結構變化情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料

30例結膜松弛癥患者均為本院2007年10月至2008年3月期間行手術治療病例,同期選擇30例正常對照組。結膜松弛癥組：男性12例,女性18例,平均年齡為(71.3±6.4)歲,Ⅰ級15眼,Ⅱ級20眼,Ⅲ級20眼,Ⅳ級5眼;對照組：男性14例,女性16例,平均年齡為(70.7±6.6)歲。采集10例結膜松弛癥例患者的組織標本,其中男性4例,女性6例,平均年齡為(70.8±6.2)歲,Ⅰ級2例,Ⅱ級3例,Ⅲ級4例,Ⅳ級1例;同期選擇本院非結膜松弛癥患者10例為對照組,其中男性4例,女性6例,平均年齡為(70.2±5.7)歲。2組在年齡、性別等各方面無顯著性差異(P>0.05),具有可比性。

1.2 組織標本采集具體方法

松弛結膜癥患者及對照組切除部位均為雙眼鼻下方的區域,組織標本應做到相同部位,相同切除面積和相同采集方法。

1.3 淚液羊齒狀試驗

淚液羊齒狀試驗時間應為每日10:00～12:00am,利用玻璃毛細管在患者下瞼結膜囊淚阜部位處通過吸取淚液組織標本,操作過程中避免接觸眼球表面,將淚液組織標本放置在載玻片上,經處理后在顯微鏡下觀察分析并作出具體評級,根據淚液羊齒狀結晶的完整性,均勻性和分支狀態等方面分為四個等級。Ⅰ級:羊齒狀分支結晶圖表現為均勻且致密,空間間隔相對很小;Ⅱ級:羊齒狀結晶圖表現為分支數量較少,且形態表現也較小,空間間隔相對較大;Ⅲ級:羊齒狀結晶圖表現為分支數量明顯減少,空間間隔顯著增大;Ⅳ級:很難發現有羊齒狀結晶圖,結晶呈不定型表現。其中Ⅰ、Ⅱ級均為正常表現,而Ⅲ、Ⅳ級為異常表現。

表1 TFT的分級比例比較[例(%)]

1.4 組織標本染色

組織標本經處理后采用PAS和AB等染色方法顯示杯狀細胞,同時制作電鏡標本進行觀察。

2 結果

2.1 TFT測定

結膜松弛癥組與對照組經TFT檢測后發現,與對照組比較結膜松弛癥組患眼淚液中羊齒狀結晶明顯減少(P<0.05),隨著患者病情程度出現加重趨勢,淚液中羊齒狀結晶明顯減少(P<0.05),見表1。

2.2 球結膜杯狀細胞形態結構

結膜松弛癥組球結膜杯狀細胞形態表現：球結膜鱗狀上皮呈厚薄不均勻的現象,一般為4～7層,上皮層中杯狀細胞的數量多少不等,但細胞的大小及組織形態相一致,各上皮細胞層中均可發現有杯狀細胞的存在,經統計和分析發現100個上皮細胞內約有2.74%為杯狀細胞,其細胞形態與脂肪細胞極為相似,杯狀細胞經AB染色處理后表現為藍色,經PAS染色處理后則表現為紅色,此外還可以發現有少數基底細胞色素沉著的現象。正常對照組球結膜杯狀細胞形態表現：球結膜上皮厚度較薄,僅有4～5層,且上皮層中杯狀細胞的數量多少不等,形態與結膜松弛癥的球結膜杯狀細胞形態表現相類似,經統計和分析發現100個上皮細胞內約有4.63%的杯狀細胞。

2.3 球結膜杯狀細胞數量比較

結膜松弛癥組杯狀細胞平均密度為(2.74±1.98)/100個上皮細胞,對照組為(4.63±2.35)/100個上皮細胞,2組間無顯著性差異(P>0.05)。根據臨床分級為Ⅰ～Ⅳ級,Ⅰ級3.9%,Ⅱ級2.96%,Ⅲ級2.05%,Ⅳ級1.33%,結果顯示隨著結膜松弛癥病情程度的加重趨勢,杯狀細胞密度也明顯出現下降。

2.4 球結膜杯狀細胞超微結構電鏡觀察

結膜松弛癥組電鏡觀察:可見杯狀細胞頂面胞質內堆積有大量漿液性分泌顆粒,顆粒呈不規則形狀,內含有特殊的條紋樣物質,細胞基底面處含有大量的粗面內質網,內有少量的線粒體,細胞核常位于細胞質的一側。正常對照組電鏡觀察:可見杯狀細胞胞質中存在大量電子密度較高,形態大小不等的黏液小滴狀物質;內含有豐富的粗面內質網,鄰近細胞核的上部有一較大的高爾基體,黏液小滴可形成巨大團塊。

3 討論

3.1 結膜松弛癥的組織病理學特點[3～4]

(1)結膜表面呈彎曲和皺褶等現象：在眼球與下瞼緣之間堆積松弛結膜,從而導致結膜表面出現彎曲和皺褶等現象,隨著結膜松弛程度的逐漸加重,彎曲和皺褶等現象的程度也逐漸加重,Ⅱ級未出現明顯的皺褶現象,Ⅲ級大多數出現皺褶現象,Ⅳ級均出現皺褶現象;(2)結膜鱗狀上皮增生明顯,且出現角化不全現象：結膜表面形成的彎曲皺褶要明顯突出于患者的眼球表面,使得淚河變的明顯狹窄不全,故在眼球結膜上難以形成正常的淚膜,進而導致結膜異常干燥、充血水腫,失去原有的光澤現象,鱗狀上皮增生現象明顯;(3)基底細胞有明顯的色素沉著現象：Ⅰ、Ⅱ級基底細胞色素表現為局灶性沉著現象,Ⅲ級部分基底細胞中呈現疏密程度不同的色素沉著現象,Ⅳ級局部基底細胞呈現色素沉著的現象;(4)固有層中的血管出現明顯擴張,瘀血、水腫及慢性炎癥反應現象明顯：由于長期反復的炎癥刺激以及眼瞼的摩擦損害,松弛結膜癥患者皺褶內血管極易脆性變,眼瞼壓迫松弛的球結膜則易導致血管出現破裂現象,進而發生結膜下出血現象;(5)彈力纖維出現異常變性和減少等現象,且膠原纖維也出現異常變性：各等級患者結膜內彈力纖維出現程度不一的變性現象,而Ⅲ、Ⅳ級彈力纖維則顯著下降。既往大量研究結果表明：結膜松弛癥患者組織病理檢查結果可發現彈性纖維出現明顯的斷裂現象,而膠原纖維減少異常,彈力纖維減少這種現象的出現可導致球結膜彈性功能顯著下降,張力大小降低明顯,易產生結膜的松弛現象,故應認為是結膜自身生理改變的主要發病原因。

3.3 結膜松弛癥患者的超微組織結構改變情況[5]

結膜松弛癥患者成纖維細胞的細胞胞質中存在著較多擴張的粗面內質網和游離核糖體物質,而細胞胞質外周圍區則有較多衣小泡的吞飲泡組織結構,結膜成纖維細胞生理功能發生顯著性改變,必然會引起細胞外上述各種組織成分的顯著變化,從而影響外基質各種成分的平衡狀態和穩定性,最終發生結膜松弛癥。

本研究結果顯示：結膜松弛癥患者的淚液分泌量明顯減少,淚膜的穩定性狀態顯著下降,淚液中羊齒狀結晶形成異常減少等現象,均可以間接證實患者淚液中的黏蛋白成分異常減少。故可知,隨著結膜松弛癥程度加重,結膜松弛癥球結膜杯狀細胞組織形態和超微結構有異常改變。

[1]張興儒,許琰,李青松,等.結膜松弛癥臨床與基礎研究[J].中國實用眼科雜志,2005,23(1):83～87.

[2]錢志剛,柯敏.結膜松弛癥的臨床及病理研究[J].臨床眼科雜志,2010,18(1):17～19.

[3]李軼捷,李青松,張興儒.結膜松弛癥研究新進展[J].國際眼科雜志,2009,9(5):938～940.

[4]劉秋月,陶海,賀冰,等.結膜松弛癥的病理學研究進展[J].國際眼科雜志,2007,7(5):1420～1422.

[5]張興儒,蔡瑞霞,王寶華,等.結膜松弛癥的組織病理學觀察[J].中華眼科雜志,2004,40(1):37～39.