細菌檢驗結果失誤的臨床分析

武翠娥

在臨床實驗室診斷工作中，一項重要內容是細菌檢驗［1］。該方法有助于對患者的感染性疾病進行有效的診斷與治療，同時加強疾病傳播的預防與控制。近年來，臨床上細菌出現多重耐藥性，使得患者感染的治療日益困難［2］。因此，實驗室細菌的檢驗應具有很高的檢出率和準確率，并且能夠及時地分析出藥敏結果，這對于快速診斷患者的病情，及時作出治療計劃至關重要［3］。但在實際工作中，尤其是基層醫院單位，經常會存在設備簡陋、人員認識不足或者責任心不強的現象，因此會發生檢驗失誤。本研究對細菌檢驗的失誤情況進行總結和分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2009年1至6月發生細菌檢驗失誤病例1256份進行總結歸納，并根據檢驗失誤出現的原因進行歸類，主要包括:標本的采取，包括采取標本的時機是否恰當，方法是否準確;標本的運送，包括標本運送方式及保存是否正確;細菌的分離培養技術方法是否規范和鑒定手段是否精確等四方面。根據檢驗失誤情況，制定科學的整改計劃，在現有條件和人員基礎上，將整個細菌檢驗的過程規范化，將規范化以后2009年7月至12月發生的細菌檢驗失誤情況與原來進行對比，進一步發現和解決問題，以提高細菌性傳染病的診斷效率。

1.2 方法 整改措施主要包括以下方面內容:(1)加強細菌檢驗部門與臨床科室之間的聯系，定期聽取臨床科室意見及業務上存在的問題，同時加深醫護人員對檢驗部門的了解;(2)開展業務講座，使檢驗醫護人員對檢驗技術有更深層次的掌握，包括各項檢測指標的范圍、誤差來源及標本的操作方法等;(3)完善各項規章制度，制定操作規程和崗位責任制，針對細菌檢驗過程中出現的各種問題，制定規范、科學的操作規程，使各項檢驗工作正規化、科學化、規范化;(4)建立醫療質量反饋系統，對以往的治療信息進行收集、總結和歸納，及時發現問題，分析可能的原因，并給予解決。同時，對醫療質量、細菌的檢驗效果進行評估，有針對性地完善管理內容和調整管理對策。

1.3 統計學分析 應用SPSS 18.0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

在實行整改之前，半年內發生細菌檢驗失誤例數為1256例，其中標本采取階段320例(26.3%)，標本運送 442例(32.6%)，分離培養技術方法82例(7.4%)，鑒定手段412例(33.7%);在整改以后，細菌檢驗失誤發生率顯著降低(P＜0.05)，僅為274例，其中標本采取72例(29.1%)，標本運送67例(25.8%)，分離培養技術方法6例(3.2%)，鑒定手段109例(41.9%)。見表 1。

表1 實施整改前后細菌檢驗失誤情況比較 例(%)

3 討論

細菌的檢驗結果受很多因素的影響，在日常工作中應該對標本采集、保存和運送、操作、質控等方面重視，為臨床提供準確、有效的檢驗結果［4］。研究表明，臨床醫護人員對檢驗工作認識不足，對其影響力不甚了解，容易在主觀上不夠重視，造成細菌檢驗工作的最薄弱環節。為了提高細菌檢驗結果的準確性和有效率，筆者認為應該從以下幾個方面加強和完善。

3.1 沒有應用正確的標本采集和處理方法。在細菌提取過程中，正確的采集和處理標本是提取工作成功與否的決定因素，需要給予足夠的重視。如果標本的采集是在患者沒有使用抗生素之前或者在其停藥期間，那么就會直接導致致病菌的檢出率偏低，甚至不能培養出細菌。究其根本原因，應該是臨床醫師或操作人員對細菌的培養步驟不熟或者重視程度不夠造成的，即遇到感染的患者，立刻采取二聯、三聯抗生素聯合應用的措施，直到療效不夠理想時，才應用細菌培養和藥敏試驗;檢驗人員未嚴格地進行無菌操作。在采集尿液和血液樣本時，無菌操作不夠嚴格，導致樣本受到污染，從而致使細菌培養結果不理想，鑒定和判斷過程存在困難，造成檢驗的藥敏結果用來指導臨床用藥時，治療效果不理想;標本處理措施不規范。部分標本采集后應當經過處理后再進行接種，例如:痰液樣本的培養步驟是先用無菌鹽水漂洗，然后搗碎，取碎痰渣進行培養有助于提高檢驗的陽性率。否則，易造成培養出的細菌為口腔正常菌群。另外，清亮的尿液樣本，傷口沖洗液標本等，需要先經過離心取沉渣進行培養，只有這樣，才可以有效提高檢驗的陽性率。如果未經任何處理便接種，培養出的菌落不僅少，而且容易被誤認為是污染菌而被放棄。對于少量的膿性分泌物標本，工作人員應用潮濕的棉簽取樣，避免標本在運送途中干燥，從而降低培養菌檢測的陽性率［5］。如果標本為膿性的胸腔積液，則需考慮是否有厭氧菌感染，在常規培養過程中不能長出細菌，此時經驗豐富的工作人員在接種的同時，需進行革蘭染色，如果培養無陽性率，則要把革蘭染色的檢測結果上報，可作為臨床醫生的用藥方向的參考。

3.2 忽視細菌檢驗申請單。通常情況下，細菌檢驗申請單會詳細注明標本的來源和送檢目的等。檢驗人員需要給予足夠的重視，才能準確地檢測出目標病原菌，可以少走彎路，提高診斷效率［6］。例如:檢驗人員忽略送檢申請單，標本為胸腔積液，但是僅將其做一般的培養，而忽略革蘭染色步驟，這樣會導致漏檢厭氧菌，直接造成檢驗失誤。

3.3 適宜培養基的選擇。在培養細菌過程中，培養基的選擇是否適宜是關系到分離目的菌的結果的重要步驟，因此，所有細菌檢驗工作人員都應對常見的致病菌有深刻認識，包括其生長條件、鑒別特點等。例如尿道分泌物的培養，不僅需要接種血平板，而且還要加種巧克力平板防止部分苛養菌漏檢。對于痰液標本，培養還需要加種麥康凱，抑制止痰液中的雜菌，從而促進革蘭陰性桿菌的生長［7］。

3.4 未能準確區別污染菌。在細菌檢驗過程中，未能準確區別污染菌很容易造成細菌檢驗的失誤。污染菌的存在會引起培養結果的假陽性，因此在培養基的制作與標本接種的過程之中，需要嚴格地進行無菌操作，制作好的培養基，需要隨機抽樣進行培養，檢驗其是否收到污染，若長菌，則不能再用［8］。根據菌落是否在劃線上來識別污染菌是一種有效的鑒定辦法，此外，看細菌的生長趨勢是判斷污染菌的另一個途徑。

3.5 沒有給細菌提供最佳生長環境。細菌生長時需要一定的生長環境，一般需要5% ～10%的二氧化碳，然而很多醫院不能提供二氧化碳培養箱，如果在檢驗過程中直接將接種好的平板放于普通孵箱中，容易造成細菌的長勢不好，甚至于根本不長。

3.6 工作人員認識不足，致使部分致病菌漏檢。痰液標本里通常細菌很雜，工作人員如果經驗或認識不足，常造成部分致病菌的漏檢［9］。在痰液標本培養過程中經常忽略流感嗜血桿菌，同時粘滑口腔球菌常被誤認為是微球菌，該球菌具有很強的致病力，應該引起檢驗工作人員足夠的重視。

3.7 細菌鑒定和藥敏試驗出現失誤。在培養出致病菌以后，菌種的鑒定需要按照規范的途徑進行。革蘭陰性桿菌必須通過染色、氧化酶等試驗才能初步定為腸桿菌科、非發酵菌或弧菌科等，即使是全自動微生物鑒定儀也必須遵循這條線路。如果這些程序被忽略，則以菌科的編碼管或鑒定卡進行非發酵菌的鑒定會導致失敗［10］。

細菌的檢驗工作難度較大，耗時在開展過程中，可能會遇到新菌株或者新問題。因此需要基層工作人員不斷加強細菌學方面理論和實踐學習，培養高度責任心，不斷總結經驗和積累知識。這樣，才能準確作出診斷，及時控制感染。

1 康珊熙，劉錫忠主編.微生物學及微生物學檢驗.第1版.北京:人民衛生出版社，1998.137.

2 潘立，張芳，連西蘭.實驗室細菌質控檢驗結果分析.中國衛生檢驗雜志，2004，14:84-85.

3 徐英春.臨床細菌學血培養操作規范.中華檢驗醫學雜志，2004，27:124-126.

4 馬筱玲，李桂琴.尿培養操作規范.中華檢驗醫學雜志，2005，28:1087-1089.

5 李仲興主編.診斷細菌學.第1版.廣州:黃河文化出版社，1992.454.

6 張鳳梅.臨床細菌檢驗結果的可靠性分析.國外醫學臨床生物化學與檢驗學分冊，2005，26:744-745.

7 王勇，李忠波.細菌學檢驗的質量控制.中國公共衛生，2002，18:1167-1168.

8 張卓然主編.臨床細菌學和細菌檢驗.第2版.北京:人民衛生出版社，2003.468.

9 劉澤春.基層衛生微生物檢查質量控制.中國衛生檢驗雜志，2000，10:622.

10 黃永存.臨床細菌檢驗結果的可靠性分析.中國實驗方劑學雜志，2008，14:28-29.