膠體金免疫層析法檢測cTnI對AMI的診斷價值

周榮斌 劉宇

急性心肌梗死(AMI)是嚴重危及人類生命的心血管常見急危重癥，通過檢測特異性心肌損傷標志物，作為AMI的早期診斷現已廣泛應用。我科采用膠體金法測定心肌標志物血清肌鈣蛋白I(cTnI)診斷試劑盒，對140例AMI患者進行檢測，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年7月至2010年3月我科患者140例。其中40例根據2007年ACC/AHA發布的急性ST段抬高型心肌梗死指南和不穩定型心絞痛與非ST段抬高型心肌梗死指南，證實為AMI;且抽血時間選擇在發病4 h后(因發病時間小于4 h心肌標志物未在時間窗內而導致假陰性不在本研究范圍內)。100例為金標準證實無此病的正常人，包括確定無該病的健康人(50例)及確定無AMI但有與其相混淆疾病的病例(如心絞痛、急性非特異性心包炎、急性肺動脈栓塞等)50例。

1.2 研究方法 本試驗采用雙盲、自身對照方法。140例患者抽取靜脈血，以北京科衛臨床診斷試劑有限公司研制生產的cTnI診斷試劑盒(膠體金法，批號:200808001)作為試驗組，以杭州艾康生物技術有限公司生產的cTnI診斷試劑盒 (膠體金法，批號:200809022)作為對照組，分別對血液樣本進行比較測試。對所有待檢測血液標本，嚴格按待考核試劑盒和對比試劑盒的使用說明書進行操作。在操作時必須在說明書規定的實驗條件下進行比較，即在同一檢測室、同一儀器設備、同一檢測人員按說明書進行。對比試劑和待考核試劑分別按各自說明書進行平行檢測。

1.3 統計學分析 所有數據輸入到Excel表中，分別統計其2種試劑盒的陰陽性樣本數，列成2×2列聯表，計算2種試劑盒的敏感性、特異性、誤診率、漏診率。應用SPSS 13.0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組cTnI水平比較 2組cTnI陽性情況差異無統計學意義(P ＞0.05)。見表1。

表1 2 組 cTnI對比 n=140，例

2.2 2組特異性比較 對100例正常人血樣進行對比檢測，2組特異性比較。見表2。

表2 正常人群血樣中不同試劑的檢出情況 n=100

2.3 2組測試結果比較 試驗組以對照組ACON同類試劑盒作比對，其特異性為98.0%，相對敏感度為97.4%，誤診率為2.0%，漏診率為2.6%。見表3。

表3 2組cTnI診斷試劑盒的比較測試結果 n=140，例

3 討論

肌鈣蛋白是組成橫紋肌細肌絲的結構蛋白，其亞單位I、T和C組成復合物，在肌肉收縮和舒張過程中起著重要調節作用。其中，cTnI已被證實為心肌損傷最特異、最敏感的血清標志物之一。正常人血液中含量一般低于0.3 μg/L，當心肌細胞胞膜完整性因缺血或缺氧等受到破壞時，游離的cTnI可迅速透過細胞膜進入血流。因此，在發病初期，快速、靈敏且準確地測定人血中的cTnI及其變化趨勢對于急性心肌梗死的診斷、急性冠狀動脈綜合征的危險分層、監測各種因素導致的心肌損傷等有著重要的臨床意義［1］。

目前國內外已有檢測cTnI的試劑盒上市，主要采用酶聯免疫法(ELISA)、化學發光法、金標層析法、生物芯片等，少數公司產品已獲美國食品藥品監督管理局(FDA)注冊或歐洲統一(CE)認證。雖然檢測的試劑、方法很多，但是臨床應用研究中發現，各種方法測定結果之間差異很大［2］。例如心肌肌鈣蛋白是目前發現的診斷心肌損傷最特異、最敏感的標志物之一［3］，1995年美國FDA批準用于臨床AMI的診斷。不同檢測方法間測定值最大可差36倍［4］，原因包括各種檢測方法采用的抗體各不相同，cTnI分子內的不同片段和不同抗原決定簇受氧化-還原反應、磷酸化反應或蛋白水解酶作用等而降解的影響各不相同。各生產廠商的cTnI校準品各不相同，甚至使用同一份標定cTnI值的人血清進行校準也未能完全消除不同測定系統之間測定值的差異。為加快檢測速度，許多檢測系統設計采用血漿或全血標本。抗凝劑的選用是否得當將直接影響檢測結果。

金標層析法以其標本用量少、簡便快速、無污染等優點，在醫療衛生部門的臨床及現場診斷中被廣泛應用。膠體金法測定的cTnI/CK-MB/肌紅蛋白三合一診斷試劑盒，采用膠體金免疫層析原理，當血樣被滴入點樣孔后，紅血球在分離系統中被移除。樣品中含有的cTnI在與特異抗體-染料復合物以及生物素化抗體復合物結合，形成染料-特異抗體-cTnI-生物素化抗體復合物。當復合物移動通過含固著鏈霉親合素的區域，二者結合后在檢測區顯色快速一步檢測血清/血漿/全血中cTnI。沒有結合的染料復合體移出檢測區域最終被陽性對照區捕獲。本研究結果顯示應用膠體金免疫層析法測定的心肌標志物，與對照同類產品比較，2組產品質量差異有無統計學意義，試驗cTnI特異性為98.0%，相對敏感度為97.4%，誤診率為2.0%，漏診率為2.6%，能較好的檢測患者血樣中的cTnI，且操作快捷、簡便，適用于臨床特別是急診科用于AMI的輔助診斷。

1 Alpert JS，Thygesen K，Antman E，et al.Myocardial infarction redefined-a consensus document of The Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology Committee for the redefinition of myocardial infarction.J Am Coll Cardiol，2000，36:959-969.

2 Apple FS.Clinical and analytical standardization issues confronting cardiac troponin I.Clin Chem，1999，45:18-20.

3 Apple FS，Murakami MM.The diagnostic utility of cardiac biomarkers in detecting myocardial infarction.Clin Comerstone，2005，7:25-30.

4 Datta P，Foster K，Dasgupta A.Comparison of immunoreactivity of five human cardiac troponin I assay toward free and complexed forms of the antigen:implications for assay discordance.Clin Chem，1999，45:2266-2269.