人絨毛膜促性腺激素酶聯熒光分析法定量檢測的方法學評價

王明富

（云南省鎮沅縣人民醫院檢驗科，云南 鎮沅 666500）

HCG是孕卵著床后由人體滋養層細胞分泌的一種糖蛋白激素，因此測定HCG的水平可用于診斷早孕及宮外孕，進行先兆流產的動態觀察及判斷預后，還可作為孕期的監護觀察指標。此外，也可用于絨癌、惡性葡萄胎等作為輔助診斷及治療后隨訪的觀察指標。因為血中HCG變化較快，能及時反映出絨毛的分泌活動[1-6]。男性非精原細胞的睪丸腫瘤患者血中HCG值也很高。

HCG檢測方法多種多樣，常見的有放射免疫，化學發光等。MINI VIDAS檢測HCG采用酶免競爭分析（夾心法）與熒光檢測相結合的分析原理。我們參考NCCLS的EP10-A文件，有選擇的對檢測的精密度、批間差、回收率等指標進行評價。

1 材料與方法

1.1 材料

①儀器和試劑：法國bioMerieux,sa,生產的MINI VIDAS和與之配套的校準品，質控品（批號1000086750）；②選擇5個樣品，濃度分別為16.6mIU/mL、71.8mIU/mL、257.0mIU/mL、334.0mIU/mL、1211.0mIU/mL。選擇3個樣品做稀釋回收率，濃度分別為168.18mIU/mL、564.56mIU/mL、1251.04mIU/mL。

1.2 方法

①按常規開機，預熱后用試劑配套的校準品做校準，按儀器要求做質控，質控合格后準備開始測定準備好的樣品；②測定方法，按5個樣品的濃度梯度每次同時測定，每倉一批，依次測試20次，剔除超過±2SD的測試，將結果用于分析評價；③回收率測試，將3個濃度的樣品用HCG專用稀釋液分別作1/1、1/8、1/32稀釋。分3次進行測定，測量的平均濃度與預期濃度之比作為評價回收率。

2 結 果

2.1 5個樣品同批號檢測20次結果

見表1。

表1 5個樣品同批號檢測20次結果

2.2 5個樣品做批間測定結果

見表2。

表2 5個樣品做批間測定結果

2.3 3個樣品稀釋后分3次分別進行測試，把測量的平均濃度與預期濃度之比定義為平均回收率。見表3。

表3 平均回收率

2.4 線性

ELFA檢測HCG的線性為2～1500mIU/mL，超過線性需要用試劑盒配送的稀釋液稀釋后測定，通過對以上3個表的分析，MINI VIDAS的測定能滿足臨床需要。

2.5 回收率

3個樣品稀釋后分3次分別進行測試，把測量的平均濃度與預期濃度之比定義為平均回收率，測得回收率為88.3%～106.1%，通過回歸分析，ELFA法測定HCG的回歸方程為Y=0.95X-18，相關系數為0.99，表明相關良好。

2.6 干擾試驗

在含HCG1251mIU/mL的血清中加入促黃體生成激素（LH）和促卵泡成熟激素（FSH）進行測定，對結果沒有影響，有學者研究表明，LH10000mIU/mL或FSH12500mIU/mL對HCG的測定沒有影響。

3 討 論

3.1 MINI VIDAS采用酶聯免疫競爭法與熒光檢測相結合的分析原理，所有試劑都已經預先分裝在獨立的試劑條中，測定過程完全由儀器自動完成，該方法具有較高的靈敏度和特異性，可單個或多個標本多個項目同時測定，比較適合小型實驗室或大型實驗室的急診檢測。試劑封閉式式獨立分裝，減少了交叉污染和干擾，同時對操作者是較好的保護，特別是高危標本。

3.2 血中HCG變化較快，檢測HCG能及時反映出絨毛的分泌活動，我們參考NCCLS的EP10-A文件，根據現有條件，對MINI VIDAS檢測HCG的幾個重要指標進行驗證分析，準確度，靈敏度，線性，回收率，干擾試驗等均達到了標準，符合臨床應用要求。

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