M2型丙酮酸激酶與癌胚抗原聯合檢測在乳腺癌診斷中的價值

黃衛彤 丘 云 黃明春

（南寧市婦幼保健院，廣西 南寧 530011）

乳腺癌是婦女最常見的惡性腫瘤之一，全世界每年大約有120萬婦女患有乳腺癌，有50萬左右死于乳腺癌[1]。目前臨床用于乳腺癌診斷的腫瘤標志物主要是癌胚抗原（noembbryonic antigen，CEA）和糖抗原（CA）153，但其診斷的敏感性和特異性均不夠理想。腫瘤型M2丙酮酸激酶（Tumor M2-Pyruvate Kinase，TuM2-PK）作為一種新的腫瘤標志物最近才被提出來，近幾年研究表明監測血漿M2-PK水平有助于腫瘤的早期診斷、預后判斷及療效評估。本研究采用聯合方式檢測血中TuM2-PK和CEA含量，以便了解二者聯合檢測在乳腺癌診斷中的價值，報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

病例來自本院住院的乳腺癌患者30例，年齡30～61歲，均經病理學檢查證實。乳腺良性腫瘤23例，年齡30～55歲，均經病理學檢查證實。30名健康對照者來自于本院健康體檢者，均為女性，年齡21～35歲。

1.2 檢測方法

①M2-PK的檢測：取受檢者清晨空腹靜脈血2mL，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝處理（EDTA血漿中的TuM2-PK較血清受外界因素影響較小，重復性較好[2]）。1～2h內3000 r/min（離心半徑為18 cm）離心取樣， -70℃凍存待檢。腫瘤患者取樣前均未經過任何抗腫瘤治療，所有樣本均無溶血、脂血。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定血漿TuM2-PK水平，試劑盒購自德國ScheBoTech公司。實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。根據試劑盒所示以15U/mL作為臨界值，≥15U/mL為陽性。②CEA的檢測：在采集M2-PK血標本時，另取血2mL，分離血清后用ABBOTT AXSYM免疫分析儀，以化學發光免疫分析法檢測血清中CEA值。CEA的正常參考值為0～10ng/mL。

1.3 統計學方法

2 結 果

表1 各組血中TuM2-PK和CEA含量比較（±s）

表1 各組血中TuM2-PK和CEA含量比較（±s）

注：*乳腺癌組與良性腫瘤組比較，P＜0.01；#乳腺癌組與正常對照組比較，P＜0.01

組別 例數 TuM2-PK（U/mL） CEA（ng/mL）乳腺癌組 30 25.72±5.73*# 18.53±15.42*#良性腫瘤組 23 14.48±3.64 9.93±4.58正常對照組 30 11.49±3.24 7.23±3.56

3 討 論

乳腺癌嚴重威脅著女性的健康與生命，如何提高乳腺癌的早期診斷率是目前國內外關注的問題。腫瘤標志物在協助臨床對腫瘤的診斷、分析病情、指導治療、監測復發或轉移、判斷預后方面有著重要意義[3]。目前臨床用于乳腺癌診斷的腫瘤標志物主要是癌胚抗原（CEA）和糖抗原（CA）153，而單一腫瘤標志物檢測的敏感性和特異性均不夠理想。在應用腫瘤標志物早期診斷乳腺癌中，首先要找到一種敏感性和特異性均較高的標志物。

1956年前，Warburg[4]研究發現，一些腫瘤細胞在降低氧化磷酸化的情況下增加了葡萄糖的攝取，并且在有氧情況下，腫瘤細胞中持續存在高含量的磷酸鹽產物，稱之為有氧糖酵解（Aaerobic glycolysis）。Heather等[5]學者研究又證明，腫瘤細胞中大量存在M2-PK，且M2-PK對于腫瘤細胞的有氧糖酵解是必須的，同時，這種代謝方式為腫瘤細胞提供了選擇性生長優勢，促進腫瘤形成和轉移。丙酮酸激酶是糖酵解途徑中一個關鍵酶，M2-PK是丙酮酸激酶的一個亞型，它在三磷酸核苷的合成過程中也起著決定性的作用[6-8]。在正常細胞中，M2-PK主要以四聚體的形式存在，與磷酸烯醇式丙酮酸有很高的親和力。而在腫瘤細胞中M2-PK以二聚體形式大量表達，已證實至少一部分機理是由于酪氨酸受體磷酸化導致其裂解為二聚體形式，其與磷酸烯醇式丙酮酸親和力低，從而導致磷酸烯醇類物質堆積，使1、6-二磷酸果糖降解為丙酮酸明顯減少，而DNA合成增加[9]。這些二聚體形式M2-PK的濃度在腫瘤細胞中明顯升高，表現為腫瘤細胞特異性的代謝特征，因此稱為TuM2-PK。

表2 TuM2-PK和CEA單獨和聯合檢測對乳腺癌診斷的臨床評價

本研究結果顯示，乳腺癌組血中TuM2-PK濃度為（25.72±5.73）U/mL，與乳腺良性腫瘤組（14.48±3.64）U/mL比較差異有顯著意義，且發現TuM2-PK對乳腺癌診斷具有較高的特異性（91.3%），相對于其特異性而言，TuM2-PK的敏感性（76.7%）偏低，應與其他相關腫瘤標志物聯合檢測，以同時提高臨床診斷的特異性和敏感性。血清CEA作為一種酸性糖蛋白已發現近30年，早期認為是結腸癌的標志物，最新研究表明，它是由胎兒細胞的有關基因所調控，當某些細胞的基因調控受損后能重新啟動胎兒蛋白的合成，致使患者體液中的CEA升高[10]，是一種廣譜腫瘤標志物，可出現在腺癌、胃癌和乳腺癌等[11]。采用二者聯合檢測診斷時，敏感性為83.3%，而特異性為100%，準確性為81.1%，由此可見，聯合檢測對乳腺癌的診斷具有很重要的價值。

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