河南省育齡男性精液質量調查分析

李玉山 馮曉霞 吉曉菲 王全先 武文斌 潘周輝 楊險峰 孫 琳

河南省鄭州大學第三附屬醫院人類精子庫(450052)

據世界衛生組織(WHO)調查，15%的育齡夫婦存在著不育的問題，而發展中國家的某些地區可高達30%，男女雙方原因各占50%。Carlsen等［1］報道人類精子數目在過去50年中降低了40%以上。Auger等［2］研究發現過去20年里，西方男子的精子密度以平均每年2.6%的速度下降，正常形態精子百分率和活力平均每年下降了0.7%和0.3%。國內學者張樹成等［3］報道，1981～1996年期間我國男性的精液質量(精子密度、精子活動率和正常形態精子率)均存在明顯的下降趨勢。但另外一些研究卻表明，男性精液質量沒有明顯下降，有的甚至出現上升趨勢［4，5］。朱心強等［6］在對 1985 ～ 1997 年間國內公開發表的36篇文獻研究發現，不論精液量還是精子密度均沒有明顯下降趨勢。由于男性精液質量變化的問題目前尚存在爭論，運用科學的方法正確調查和評估我國各地區育齡男性的生殖健康狀況，研究分析導致男性不育的流行病學因素，已成為一項關系社會健康發展和人口素質不斷提高的重要工作。為了解河南地區育齡男性的精液質量狀況，分析影響性精液質量的因素，指導男性健康的生活方式，提高育齡男性生殖健康，本研究對河南省5個區域的正常育齡男性精液質量進行了調查分析。

1 對象與方法

1.1 研究對象

在知情同意的情況下，采用單純隨機抽樣方法抽取2008年7月～2010年7月到鄭州大學第三附屬醫院人類精子庫志愿供精人員及省、地市婦幼保健院進行婚前和孕前體檢的正常育齡男性4 052名，年齡 33.44 ±4.32(20 ～49)歲。研究對象均無慢性疾病及生殖系統疾病史，在當地居住≥10年且最近3年外出≤3個月。

1.2 研究方法

所有調查對象先進行包括外生殖器在內的體格檢查，結果正常者，禁欲3～7d，手淫法取精進行精液量、液化時間、精子密度、精子活力及正常精子形態等指標的檢測;流行病學問卷調查，內容包括人口學特征、行為因素、生活環境因素、生殖系統疾病史、有害物質接觸史等。

1.3 精液質量標準及實驗方法

1.3.1 正常精液質量標準 按照WHO《人類精液及精子－宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》(第四版)［7］標準:在排精后60min內完全液化，精液量≥2ml，精子密度≥20×106/ml，a級精子百分率≥25%或(a+b)級精子百分率≥50%，正常形態精子百分率≥15%。

1.3.2 實驗方法 精液各項參數分析均在取精后30～60min內完成，對不液化的精液標本，進行機械吹打混勻后，僅做精液量和精子密度測定，不做活力和形態學分析。用帶刻度的錐形量筒測定精液體積;將10μl混勻的精液標本加在37℃孵育的Macro計數板上，用計算機輔助精液分析系統(CASA，北京偉力彩色精液質量檢測系統WLJY－9000)進行精子密度、精子活力的測定;取完全液化的精液20μl于干凈的載玻片上，拉薄涂片并編號，待完全干燥后用乙醚酒精混合液(乙醚與95%酒精體積比為1︰1)固定15min，經改良巴氏染色法染色，封片后用油鏡分類計數≥200個精子，計算正常形態精子百分率。

1.4 質量控制

為確保調查結果的可靠性和一致性，參與研究醫院必須是衛生部認定的國家正式醫療機構，二級以上醫院;醫院具備生殖門診和(或)病房，有獨立的男科實驗室且具備相應的實驗設備，有一定的男性生殖體檢和實驗室檢測能力，有專業男科醫師和檢驗技師;參加課題的男科醫師應熟練掌握診斷規范程序;至少有1名男科醫師和1名男科實驗室檢驗技師參加過河南省人類精子庫組織的技術和質量控制培訓。經過培訓使所有參與人員統一方法、統一標準、統一質量控制后方可進行項目的調查研究;所有的精子形態學分析均由鄭州大學第三附屬醫院人類精子庫工作人員完成;所有參與本研究的實驗室均進行常規室內質量控制。

1.5 統計學分析

2 結果

2.1 研究對象一般情況

4 052例研究對象中20～29歲者占18.36%，30～39歲者占71.97%，40～49歲者占9.67%。職業 為 學 生 (28.65%)、農 民 (3.45%)、干 部(4.52%)、知識分子(15.52%)、企業職工(24.51%)、服務人員(18.39%)、其他(4.96%)。家庭年收入有22人未填寫，＜5 000元38.85%，“10 000元 ～”占 20.53%，“15 000元 ～”占18.71%，“20 000元 ～”占12.56%，“25 000元 ～”占6.87%，“30 000元～”占2.48%。初中及以下學歷占33.76%，高中占28.76%，大學占33.39%，碩士以上占4.09%。不吸煙者占35.64%，每日吸煙＜5支者占21.19%，5～10支者占25.18%，10～20支者占16.10%，＞20支者占1.89%。不飲酒者占38.70%，每日飲酒＜120g者占52.43%，＞120g者占8.87%。

2.2 精液各項參數情況

4 052例精液標本，精液量為 2.6 ±1.39ml，精子密度為(57.85±24.19)×106/ml，a級精子百分率為(29.87±16.01)%，(a+b)級精子百分率為(51.28 ±22.15)%，正常形態精子百分率為(11.42±4.11)%。各項指標均符合 WHO規定標準者1 254人(30.95%)，精液質量不符合WHO標準者2 798例(69.05%)。其中精液量異常 867例(21.40%)，精子密度異常826例(20.39%)，a級精子百分率異常者1 212例 (29.91%)，(a+b)級精子百分率異常者1 065例(26.29%)，精子形態異常者2 610例(64.41%)。

2.3 精液參數與WHO標準的比較

將精液量、精子密度、精子活力、正常形態精子百分率的均值、中位數及第5百分位數與WHO標準進行對比，結果發現河南地區育齡男性的精液量、精子密度、a級精子百分率的均值和中位數均符合WHO參考標準;(a+b)級精子百分率的均值符合WHO參考標準，但中位數低于WHO參考標準;正常形態精子百分率的均值、中位數均低于WHO參考標準;這幾項參數的第5百分位數均低于WHO參考標準，見表1。調查對象精液量、精子密度、(a+b)級精子百分率、正常形態精子百分率與WHO標準比較，符合率依次為 78.60%、78.61%、73.71%、35.59%。

表1 育齡男性精液參數與WHO標準比較結果

2.4 河南省5個區域之間的比較

將河南省5個區域之間的各精液參數進行比較，結果發現，豫南地區育齡男性精子密度、精子活力高于其他地區;中部地區的精子密度最低，其他地區之間各參數未見統計學差異，見表2。

表2 河南省不同地區男性精液參數(±s)

表2 河南省不同地區男性精液參數(±s)

*與其他地區相比P＜0.05 △與東部地區和北部地區相比P＜0.05

南部 760 2.8 ±1.48 69.29 ±26.29* 38.22 ±15.30* 59.47 ±23.47*11.58 ±4.75北部 719 2.5 ±1.42 59.21 ±30.28 29.34 ±19.44 50.46 ±37.47 11.49 ±4.57西部 799 2.6 ±1.29 53.38 ±27.36 26.11 ±14.67 48.45 ±22.41 12.33 ±4.45東部 877 2.7 ±1.86 60.33 ±22.51 28.57 ±14.69 49.93 ±25.49 10.26 ±4.84中部 897 2.5 ±1.24 48.62 ±26.58△ 27.84 ±13.73 48.84 ±30.42 11.55 ±4.51總例數 4 052 2.6 ±1.39 57.85 ±24.19 29.87 ±16.01 51.28±22.15 11.42 ±4.11

2.5 問卷調查結果分析

問卷結果顯示，既往有吸煙史者2 608人(64.36%)，其在河南不同地區的分布見表3;既往有飲酒史者2 484人(61.30%)，從事電焊職業者92人(2.27%)，從事裝飾油漆職業者 152人(3.75%)，有桑拿浴(高溫洗浴)習慣者309人(7.63%)，其在河南不同地區的分布見表4。

表3 河南省各地區吸煙者狀況分布［例(%)］

表4 河南省不同地區飲酒史及暴露于危險因素人群分布［例(%)］

3 討論

精子數量的減少和活力的降低是造成男性不育的直接原因。育齡男性精子數量和質量下降受多種因素的影響，除睪丸發育異常外，還與環境污染、不良生活方式、不健康的生活習慣、泌尿生殖道感染、從事特殊工種以及年齡［8］、季節、禁欲時間等多種因素有關。近來研究表明，心理壓力作為一個獨立因素也能降低精子密度和精子前向運動能力，增加異常精子數目［9］。此外有研究表明，大量飲用咖啡和可樂也能降低精子密度、數量和活力［10］。隨著社會工業化，進入環境中的化學物質增多，包括日常使用的農藥、塑料制品、藥物及其他人工合成化學物質，許多具有內分泌干擾作用，直接影響著男性生殖健康。研究發現，這些物質具有生殖毒性，暴露于這些內分泌干擾物的實驗動物，可出現雄性生殖道異常、精液質量降低、成年不育等生殖方面問題［11］，有些甚至會使子代精液質量異常［12］。

本研究河南省5個地區4 052例調查對象中，精液質量不符合WHO標準的占69.05%。與1987年江魚等［13］542例(來源于上海、重慶、江蘇、山東、大連、河南)和2000年高爾生等［14］562例的報道相比，河南地區育齡男性精子的密度和前向運動能力有下降趨勢。2000年562例男性精液量符合標準率為81.9%，精子密度標準符合率為93.8%，(a+b)級精子標準符合率為81.3%，精子形態的標準符合率為98.8%;此次調查對象精子這些參數標準符合率分別為 78.60%、79.61%、73.71%、35.59%，兩個年度比較，精子密度、前向運動能力和正常形態精子百分率的標準符合率有明顯下降(P＜0.05)，精液量符合率的變化無統計學意義。

在河南豫東、豫西、豫南、豫北、豫中5個區域中，豫南地區被調查男性在精子密度、精子前向運動能力方面高于河南其他地區。流行病調查研究還發現，在職業方面，電焊工和裝飾油漆工不存在地區分布上的差異，但在生活習慣方面，吸煙、飲酒、桑拿浴卻存在明顯的地區分布差異，豫南地區這三類人數低于其他4個地區，另外豫南地區地處山區，人口密度低，工業污染相對輕，環境污染少，也可能是該地區精液質量優于其他地區的一個重要因素。中部地區的精子密度低于北部地區和東部地區，但在吸煙、飲酒、桑拿浴等方面未見差異，說明尚存在調查之外的因素，諸如氣候環境、人們的作息習慣等。豫中城市工業發達，空氣污染相對嚴重，是否是影響豫中地區男性精子密度的因素，有待進一步研究證實。

本次研究表明，為了提高精液質量，改變男士的不良生活習慣，普及育齡男性的生殖健康知識，加強對育齡男性生殖健康的教育和宣傳成為一項緊迫必要的任務。引導男性青年在日常生活中養成良好的生活習慣，戒煙限酒，科學合理膳食，遠離環境污染和輻射，同時強化特殊職業保護，促進生殖健康，提高育齡男性精液質量和生殖生育能力，應該引起全社會的廣泛關注。

由于以往精液參數大樣本量調查較少，本文僅與兩個全國性調查進行了簡單的比較，受抽樣人群以及前后研究及檢驗方法的影響，得出的結論或與實際情況存在一定的偏差，本文數據僅供參考。

1 Carlsen E，Giwercman A，Keiding N，et al.Evidence for decreasing quality of semen during past 50 years［J］.BMJ，1992，305(6854):609－613.

2 Auger J，Kunstmann JM，Czyglik F，et al.Decline in semen quality among fertile men in Paris during the past 20 years［J］.N Engl J Med，1995，332(5):281－285.

3 張樹成，王弘毅，王介東.1981～1996年我國有生育力男性精液質量的變化分析［J］.生殖與避孕，1999，19(1):27－33.

4 Carlsen E，Swan SH，Petersen JH，et al.Longitudinal changes in semen parameters in young Danish men from the Copenhagen area［J］.Hum Reprod，2005，20(4):942－949.

5 Marimuthu P，Kapilashrami MC，Misro MM，et al.Evaluation of trend in semen analysis for 11 years in subjects attending a fertility clinic in India［J］.Asian J Androl，2003，5(3):221－225.

6 朱心強，沈毅，張鑫陽，等.近13年國內正常男子精子質量變化趨勢的文獻分析［J］.浙江大學學報(醫學版)，2000，29(4):31－34.

7 WHO.WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm－cervical mucus interaction［M］.4th.London:Cambridge University Press，1999:9－14.

8 Molina RI，Martini AC，Tissera A，et al.Semen quality and aging:analysis of 9.168 samples in Cordoba.Argentina［J］.Arch Esp Urol，2010，63(3):214－222.

9 Li Y，Lin H，Li Y，et al.Association between socio－psycho－behavioral factors and male semen quality:systematic review and meta－analyses［J］.Fertil Steril，2010，95(1):116－123.

10 Jensen TK，Swan SH，Skakkebaek NE，et al.Caffeine intake and semen quality in a population of 2，554 young Danish men［J］.Am J Epidemiol，2010，171(8):883－891.

11 Phillips KP，Tanphaichitr N.Human exposure to endocrine disrupters and semen quality［J］.J Toxicol Environ Health B Crit Rev，2008，11(3－4):188－220.

12 Anway MD，Skinner MK.Epigenetic transgenerational actions of endocrine disruptors［J］.Endocrinology，2006，147(6 Suppl):S43－S49.

13 江魚，王益鑫，李世勤，等.542例正常生育力男子的精液分析［J］.生殖與避孕，1987，7(4):22－290

14 高爾生，武俊青，楊秋英，等.562例正常男子精液質量的綜合評價［J］.中國公共衛生，2003，19(6):46－48.