產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析

鄧江錦

（廣東省揭西縣人民醫院，廣東 揭西 515400）

近年來產ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌株引起醫院感染有明顯增加趨勢，為正確選用抗菌藥物和控制院內感染流行，我科對臨床各科室的產ESBLs菌株做全面檢測，分析探討產ESBLs菌株的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布和耐藥性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 菌株來源

307株實驗菌即大腸埃希菌（ECO）和肺炎克雷伯菌（KPN）均分離自我院門診及住院病人的不同臨床標本，涉及科室包括神經外科、內科、ICU、泌尿外科、消化內科、呼吸內科、燒傷科、傳染科、骨科、腫瘤科、婦產科等，包括血液、痰、糞、尿、前列腺液、穿刺液等。

表2 產ESBLs菌與非產ESBLs菌耐藥率的比較

1.2 材料

頭孢他啶（CAZ）、頭孢噻肟（CTX）、氨曲南（ATM）、頭孢哌酮（CFP）、頭孢曲松（CRO）、阿莫西林/克拉維酸（AMC）、頭孢噻肟/克拉維酸（CD03）藥敏紙片均購于美國輝瑞制藥有限公司，氧氟沙星（OFX）、亞胺培南（IPM）等其他藥敏紙片、M-H購于杭州天和生物試劑有限公司。

1.3 菌種鑒定

①ESBLs初篩實驗：按《全國臨床檢驗操作規程》[1]常規方法進行細菌分離、培養。使用Nccls（美國國家臨床實驗室標準化委員會）推薦方法，待檢菌株K-B法制備菌液、接種平皿后常規標準紙片擴散法操作。貼兩種以上頭孢菌素如頭孢他啶或頭孢噻肟等，35℃孵育24h，測其抑菌環直徑，并按可疑菌株標準納入。②確證實驗：K-B法將產ESBL的菌株接種于MH平皿，貼頭孢噻肟/克拉維酸等復合劑紙片，當任何一種復合劑紙片抑菌環直徑比單獨藥敏紙片抑菌環直徑超過5mm，即可確證該菌株產ESBLs。

1.4 統計學處理

本次研究所得數據均由SPSS13.0軟件統計包進行統計學處理，兩組計數資料或療效比較采用χ2檢驗，組間對比采用t檢驗，其中以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 本研究中185株大腸埃希菌和122株肺炎克雷伯菌共檢出87株產ESBLs菌株，總檢出率為28.3%。其中ECO產ESBLs菌株檢出率為28.1%（52株），KPN產ESBLs菌株檢出率為28.6%（35株）。

2.2 產ESBLs菌株在各病區檢出率（詳見表1）。在神經外科最高，為41.7%，最低為腫瘤科13.3%。產ESBLs與非產ESBLs菌株耐藥率比較（表2），產ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對常用抗菌藥物的耐藥率，除亞胺培南外，均顯著高于非產ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌（P＞0.05），具有統計學意義。

表1 不同科室送檢標本中產ESBLs菌檢出率

3 討 論

由于三代頭孢菌素等大量超廣譜β-內酰胺類抗生素在臨床上的應用，使細菌的耐藥性發生了新的變化，由質粒介導的超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的產生，可使β-內酰胺類抗生素的β-內酰胺環水解，喪失抗菌活性[2]。該酶主要由腸桿菌科細菌產生，是TEM-1、TEM-2及SHV-1的突變酶，能水解青霉素類、頭孢菌素類及單環類抗生素，但對頭霉素類和碳青霉烯類無明顯作用。由于其作用廣泛，可以水解頭孢噻肟，或者水解頭孢他啶等，因此被稱作超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）[3]。

據統計，ESBLs主要由大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產生，本研究中185株大腸埃希菌和122株肺炎克雷伯菌共檢出87株產ESBLs菌株，總檢出率為28.3%，其中大腸埃希菌中產ESBLs菌株的檢出率為28.，1%，肺炎克雷伯菌中產ESBLs菌株為28.6%。在臨床各科室都有發現產ESBLs菌株，說明抗生素臨床使用的合理性還有待提高。外科主要是神經外科和燒傷病房。根據我們的調查，神經外科患者病情一般比較復雜，在抗生素使用上一般種類多且時間長，特別是頭孢菌素類抗生素劑量和時間，加上患者自身因素如年齡偏大、抵抗力低，臥床時間較長等，因而容易出現產ESBLs菌株。內科以呼吸內科最高，檢出率為36.1%，主要由于該科患者年齡較大，絕大部分為老年患者，不少患者超過10年慢支病史等，長年服用各種抗菌素，且不少合并有心臟等多種臟器衰竭，并發癥較多，因而其檢出率在內科為最高。在一定程度上說抗菌素的使用過程是培養耐藥菌株的過程，使用越廣泛，其敏感性就越差。ESBLs耐藥范圍擴大、耐藥性轉移廣、發生率增長快以及新基因型的不斷發現[4]，給臨床治療和醫院感染控制帶來不少困難，因而需要提高醫務人員的認識，加強抗菌藥物的使用，才能從根源上控制產ESBLs的菌株的局部流行。

[1] 葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].2版.南京:東南大學出版社,1997;500-509.

[2] 葉曉光,王若倫,林紅燕,等.產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌耐藥譜動態觀察[J].中華醫院感染學雜志,2004,14(5):492-495.

[3] 劉朝暉,陳勁龍,葉惠芬,等.克雷伯菌產超廣譜β-內酰胺酶的檢測及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志,2003,13(4):375-377.

[4] 倪語星,毛向群,王志軍.質粒介導的超廣譜β-內酰胺酶的耐藥性問題及檢測[J].中華醫學檢驗雜志,1999,22(增刊):19.