CD24與CD44v6在宮頸癌中的表達(dá)及意義

孫麗萍

(江西省婦幼保健院病理科，江西南昌 330006)

細(xì)胞黏附分子是一類(lèi)參與細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間的黏附和相互作用的分子，它們?cè)诎┘?xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移中有重要作用，其中包括CD24和CD44v6。CD24是熱穩(wěn)定抗原在人類(lèi)的同源分子，位于染色體6q21，能介導(dǎo)細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間的黏附[1]。CD44是一組分布極為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白，是由單一基因所編碼的具有高度特異性的單鏈膜表面糖蛋白家族，人CD44基因定位于染色體11p13，它的變異型CD44(CD44v)，主要在上皮源性細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，可促進(jìn)淋巴細(xì)胞活化和增殖[2]，促進(jìn)淋巴細(xì)胞歸巢,淋巴細(xì)胞前體高表達(dá)CD44v6可加快恢復(fù)免疫活性[3]。本研究通過(guò)觀察CD24、CD44v6蛋白在宮頸癌的表達(dá)情況，擬探討兩者與宮頸癌的各種臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系，進(jìn)而分析其在宮頸癌的診斷和預(yù)后判斷中能否發(fā)揮作用，是否可為宮頸癌的靶向治療提供新的研究思路。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本 臨床標(biāo)本選取自婦幼保健院2005至2010年宮頸癌80例。根據(jù)其分化程度分為3級(jí)：1級(jí)21例，2級(jí)44例，3級(jí)15例。根據(jù)FIGO2009年宮頸癌臨床分期分及有無(wú)宮旁浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及臨床治療方法不同，分為3個(gè)等級(jí)：1級(jí)為I-IIA期共52例，2級(jí)為IIB-IVA期共19例，3級(jí)為IVB期共9例。另選取宮頸上皮內(nèi)瘤變40例，正常宮頸組織20例做為對(duì)照。所有病例均經(jīng)病理確診，HE切片均由2名主治以上病理醫(yī)師復(fù)診。

1.2 試劑與方法 CD24、CD44v6即用型鼠抗人單克隆抗體和Elevision法免疫組化試劑盒均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。Elevision法步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，已知陽(yáng)性結(jié)果做陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替一抗做陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷 免疫組化結(jié)果判定：CD24、CD44v6均陽(yáng)性定位于細(xì)胞膜，陽(yáng)性染色細(xì)胞為細(xì)胞膜棕黃色。每張切片隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%為(-)，5%≤陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜25%為(+)，25%≤陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜50%為 (++)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥50為 (+++)。以+～+++為陽(yáng)性表達(dá)，-為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。免疫組化結(jié)果采用χ2檢驗(yàn)、Fish確切概率檢驗(yàn)、Spearman等級(jí)相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 CD24的表達(dá)CD24在正常宮頸、宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0.00%、45.00%和87.50%，陽(yáng)性率逐級(jí)升高，三者差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表1，圖 1)。CD24 與宮頸癌的病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均不相關(guān)(P＞0.05，表2)。

2.2 CD44v6的表達(dá) CD44v6在正常宮頸、宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0.00%、35.00%和76.25%，陽(yáng)性率逐級(jí)升高，三者差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表1，圖 2)。CD44v6 與宮頸癌的病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05，表2)，與臨床分期不相關(guān)(P＞0.05表2)。

表1 CD24、CD44v6在宮頸病變中的表達(dá)

表2 CD24、CD44v6與宮頸癌的臨床病理參數(shù)的關(guān)系

圖1 CD24在宮頸癌中陽(yáng)性表達(dá)(免疫組化Elevision法，DAB染色，×400)

圖2 CD44V6在宮頸癌中陽(yáng)性表達(dá)(免疫組化Elevision法，DAB染色，×400)

表3 CD24和CD44v6在宮頸癌中的表達(dá)的相關(guān)性

2.3 CD24與CD44v6在宮頸癌中的相互關(guān)系CD24與CD44v6在宮頸癌中無(wú)相關(guān)性 (P＞0.05，表3)。

3 討論

宮頸癌是最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，目前認(rèn)為其最主要的病因是人乳頭瘤病毒感染。但還有一些因素可能參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展，如細(xì)胞黏附分子。

細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間的黏附和相互作用是多細(xì)胞生物的基本生物現(xiàn)象之一，而介導(dǎo)這種相互作用的分子則稱(chēng)為細(xì)胞黏附分子，它們?cè)诎┘?xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移中有重要作用，其中包括CD24、CD44v6。CD24是熱穩(wěn)定抗原在人類(lèi)的同源分子，位于染色體6q21，能介導(dǎo)細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間黏附。CD44是一組分布極為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白，是由單一基因所編碼的具有高度特異性的單鏈膜表面糖蛋白家庭，人CD44基因定位于染色體11p13，按其表達(dá)方式不同可分為標(biāo)準(zhǔn)型CD44(CD44s)和變異型CD44(CD44v)。其中變異型主要在上皮源性細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，可促進(jìn)淋巴細(xì)胞活化和增殖,促進(jìn)淋巴細(xì)胞歸巢,淋巴細(xì)胞前體高表達(dá)CD44v6可加快恢復(fù)免疫活性。研究發(fā)現(xiàn)CD24、CD44在大部分腫瘤中均有表達(dá)，且與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后等關(guān)系密切。CD24在食管鱗癌中高表達(dá)者更易發(fā)生腫瘤浸潤(rùn)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，可作為判斷淋巴結(jié)和評(píng)估預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立指標(biāo)[4]；CD24在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌、卵巢癌和膀胱癌等高表達(dá)提示CD24在腫瘤的增殖和侵襲中起著重要的作用，檢測(cè)CD24有助于判斷預(yù)后[5-7]。研究發(fā)現(xiàn)CD44s和CD44v6是乳腺癌細(xì)胞黏附、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的重要因素，在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖及遷移能力方面具有重要作用[8]，CD44v6高表達(dá)在宮頸鱗癌提示與宮頸鱗癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[9]。此外，CD24、CD44在治療中的研究也取得了一定的進(jìn)展。應(yīng)用抗CD24特異性抗體治療移植相關(guān)的B細(xì)胞增殖綜合征已取得良好的效果[10]；抗CD24單克隆抗體可以以時(shí)間和劑量依賴(lài)的方式抑制表達(dá)CD24的胰腺癌細(xì)胞系和結(jié)腸癌細(xì)胞系的生長(zhǎng)[11，12]。抗體介導(dǎo)CD44靶向作用人乳腺癌異種移植物能明顯抑制腫瘤的生長(zhǎng)，并且這種抗體治療可預(yù)防化療后引起的類(lèi)基底樣乳腺癌的復(fù)發(fā)[13]。

本課題研究結(jié)果顯示CD24在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中均由表達(dá)，且陽(yáng)性率逐級(jí)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。但CD24與宮頸癌的病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均不相關(guān) (P＞0.05)，這與Kwon的報(bào)道相一致[14]。

CD44v6在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中均有表達(dá)，且陽(yáng)性率逐級(jí)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與Faleiro的報(bào)道一致[15]。CD44v6與宮頸癌的病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05)，與臨床分期不相關(guān)(P＞0.05)。這與于曉紅的報(bào)道一致[9]。本實(shí)驗(yàn)另顯示CD24與CD44v6在宮頸癌中的表達(dá)沒(méi)有相關(guān)性。它們可能是作為兩個(gè)單獨(dú)的因素影響宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。

綜上所述，CD24、CD44v6與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，可能可以作為宮頸癌的檢測(cè)指標(biāo)。CD44v6與宮頸癌的病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，提示其可能在宮頸癌的進(jìn)展及轉(zhuǎn)移方面起著一定的作用。這也許可以給人們尋求宮頸癌的防治途徑提供新的思路。

[1]Kay R,Rosten PM,Humphries RK.CD24,a signal transducer modulating Bcell activation responses,is a very short peptide with a glycosyl phosphatidylinosito membrane anchor[J].J Immuol,1991,147(4)1412-1416.

[2]Jothy S.CD44 and its partners in metastasis[J].Clin Exp Metastasis,2003,20(3):195-201.

[3]Rajasagm M,Vitacolonna M,Benjak B,et at.CD44 promotes progenitor homing into the thymus and T cell maturation[J].J Leukoc Biol,2009,85(2):251-261.

[4]Sano A,Kato H,Sakurai S,et al.CD24 expression is a novel prognostic factor in esophageal squamous cell carcinoma[J].Ann Surg Oncol,2009,16(2):506-514.

[5]鄒萌萌,吳誠(chéng)義.CD24在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及臨床意義[J].中國(guó)普通外科雜志,2008,17(11):1140-1144.

[6]高瑞格,李留霞,劉玉霞.CD24和EP-CAM蛋白在卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J].山東醫(yī)藥,2009,49(21):75-76.

[7]曹曉鋒,段建敏,魏希鋒,等.膀胱尿路上皮癌中 CD24、VEGF、MVD的表達(dá)及其臨床意義[J].現(xiàn)代泌尿外科雜志,2009,14(2):118-120.

[8]Afify A,Purnell P,Nguyen L.Role of CD44s and CD44v6 on human breast cell adhesion,migration and invasion[J].Exp Mol Pathol,2009,86(2):95-100.

[9]于曉紅,李隆玉,魏寶秀,等.CD44v6、EGFR在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸鱗癌中的表達(dá)與意義[J].實(shí)用癌癥雜志,2005,20(5):472-474.

[10]Benkerrou M,Jais JP,Leblond V,et al.Anti-B-cell monoclonal antibody treatment of severe posttransplant B-lymphoproliferative disorder:prognostic factors and long-term outcome[J].Blood,1998,92(9):3137-3145.

[11]Sagiv E,Kazanov D,Arber N,et al.CD24 plays an important role in the carcinogenesis process of the pancreas[J].Biomed pharmacother,2006,60(6):280-284.

[12]Sagiv E,Memeo L,Karin A,et al.CD24 is a new oncogene,early at the multistep process of colorectal cancer carcinogenesis[J].Gastroenterology,2006,131(2):630-639.

[13]Marangoni E,Lecomte N,Durand L,et al.CD44 targeting reduces tumour growth and prevents post-chemotherapy relapse of human breast cancers xenografts[J].Br J Cancer,2009,100(6):918-922.

[14]Kwon GY,Ha H,Ahn G,et al.Role of CD24 protein in predicting metastatic potential of uterine cervical squamous cell carcinoma in patients treated with radiotherapy[J].Int J Radiat Oncol Biol Phys.2007 Nov 15,69(4):1150-1156.

[15]Faleiro-Rodrigues C,Lopes C.E-cadherin,CD44 and CD44v6 in squamous intraepithelial lesions and invasive carcinomas of the uterine cervix:an immunohistochemical study[J].Pathobiology,2004,71(6):329-36.