節(jié)節(jié)草對(duì)四氧嘧啶模型小鼠降血糖作用研究﹡

梁 寧 潘得云 楊和錦

廣西中醫(yī)學(xué)院，廣西南寧 530001

節(jié)節(jié)草別名筆筒草、通氣草等，木賊科木賊屬筆筒草的全草，性微寒，味甘苦，有祛風(fēng)清熱、除濕利尿等功效，可治療目赤腫痛、翳膜遮睛、淋濁、便血、尿血等，近年藥理研究發(fā)現(xiàn)該科植物具有抗心肌缺血，降血壓、血脂、血糖，鎮(zhèn)痛及抗腫瘤等作用[1]。但節(jié)節(jié)草降血糖作用的研究未見報(bào)道，為此筆者進(jìn)行了研究。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物和試劑、藥品

清潔級(jí)昆明種小鼠。節(jié)節(jié)草采自廣西南寧老虎嶺并經(jīng)鑒定；格列喹酮片（天津藥物研究院，H10970124）；二甲雙胍片（北京京豐制藥有限公司，H11021518）；血糖檢測(cè)試劑盒（四川省邁克科技有限責(zé)任公司）。

1.2 方法

將節(jié)節(jié)草粉碎，用10倍體積65%乙醇回流2 h，過濾，回收乙醇，濃縮至4 g/mL，4℃冷藏。

1.2.1 節(jié)節(jié)草醇提物急性毒性實(shí)驗(yàn)[2]取18～22 g昆明種小鼠20只隨機(jī)分組，各10只（雌雄各半）。禁食供水12 h，灌胃給藥，40 mL/kg，給藥總量為240 g/kg。給藥后觀察14 d內(nèi)小鼠的外觀行為、進(jìn)食排泄等情況。第14天稱重，計(jì)算增重率并頸椎脫臼處死小鼠，觀察各臟器的病變情況，并測(cè)量最大耐受量（MTD）。

1.2.2 節(jié)節(jié)草醇提物對(duì)四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影響 80只雄性小鼠禁食供水12 h后，尾靜脈注射四氧嘧啶（60 mg/kg）。末次給藥后72 h，眼球靜脈叢取血，葡萄糖氧化酶法測(cè)FPG。FPG＞11 mmol/L并多飲、多食、多尿則造模成功。取造模成功的小鼠60只，隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組（二甲雙胍0.6 g/kg）、節(jié)節(jié)草大、中、小劑量組，各10只。每天灌胃給藥1次，連續(xù)3 周。模型組灌胃等容積蒸餾水。

1.2.3 節(jié)節(jié)草醇提物對(duì)正常小鼠血糖的影響 50只（20±2）g雄性小鼠按體重隨機(jī)分為空白對(duì)照組，格列喹酮組（0.15 g/kg）和節(jié)節(jié)草大（40 g/kg）、中（20 g/kg）、小（10 g/kg）劑量組，各 10只。格列喹酮組和節(jié)節(jié)草各給藥組每日灌胃1次，空白對(duì)照組給予等體積蒸餾水，給藥容量為20 mL/kg體重，連續(xù)7 d。末次給藥前小鼠禁食供水12 h，末次給藥1 h后小鼠靜脈叢取血，離心3 000 rpm×10 min，分離血清，測(cè)血糖。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行x2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 節(jié)節(jié)草醇提物MTD＞5 g/kg對(duì)小鼠的影響

節(jié)節(jié)草醇提物MTD＞5 g/kg（相當(dāng)于生藥材240 g/kg）。給藥后14 d內(nèi)小鼠外觀、行為、進(jìn)食排泄均未見異常，無(wú)死亡；給藥后各小鼠體重增長(zhǎng)正常，雌性小鼠增重（9.15±1.73）g，增重率為 46.5%；雄性小鼠增重（11.21±1.54）g，增重率為51.2%；14 d后處死小鼠，各臟器病變情況未見異常。

2.2 節(jié)節(jié)草各劑量組對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響

節(jié)節(jié)草各劑量組均能降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖。與模型組比，大、中劑量組差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；小劑量組用藥后1周差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），第2周差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），第3周則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 節(jié)節(jié)草對(duì)四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖影響（±s）

表1 節(jié)節(jié)草對(duì)四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖影響（±s）

注：與正常組比較，▲P ＜ 0.01；與模型組比較，△P ＜ 0.05，﹟P ＜ 0.01

血糖（nmol/L） 正常組 模型組 陽(yáng)性組 大劑量組 中劑量組 小劑量組給藥前 5.20±0.21 20.17±2.50▲ 19.80±1.91▲ 21.23±2.13▲ 20.08±2.26▲ 19.90±2.45▲給藥后1周 5.18±0.34 21.33±2.41▲ 10.80±2.10﹟ 10.78±2.41﹟ 11.23±2.31﹟ 14.56±2.21﹟給藥后2周 5.25±0.14 19.01±2.30▲ 11.47±1.68﹟ 9.56±1.02﹟ 12.23±1.30﹟ 16.87±0.87△給藥后3周 5.10±0.21 18.12±2.01▲ 12.45±1.42﹟ 11.23±1.21﹟ 14.21±2.36﹟ 17.41±1.41

表2 節(jié)節(jié)草對(duì)正常小鼠血糖影響（±s）

表2 節(jié)節(jié)草對(duì)正常小鼠血糖影響（±s）

注：與正常組比較，▲P ＜0.01

血糖（mmol/L） 正常組 陽(yáng)性組 大劑量組 中劑量組 小劑量組給藥前 5.59±0.32 5.60±0.31 5.50±0.43 5.58±0.46 5.61±0.25給藥后7 d 5.50±0.36 4.66±0.28▲ 5.56±0.58 5.42±0.35 5.65±0.27

2.3 節(jié)節(jié)草醇提物對(duì)正常小鼠血糖的影響

節(jié)節(jié)草醇提物對(duì)正常小鼠的血糖無(wú)影響，陽(yáng)性藥格列喹酮能降低正常小鼠血糖水平，陽(yáng)性組與正常組比較差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表2。

3 討論

四氧嘧啶是一種特異性β細(xì)胞毒劑，可選擇性破壞多種動(dòng)物胰島β細(xì)胞致實(shí)驗(yàn)性糖尿病，這與臨床Ⅰ型糖尿病發(fā)病機(jī)制相近。四氧嘧啶糖尿病小鼠是研究糖尿病治療藥物療效的常用動(dòng)物模型。本實(shí)驗(yàn)組研究節(jié)節(jié)草醇提物對(duì)糖尿病小鼠的影響，結(jié)果表明節(jié)節(jié)草醇提物大、中劑量組降糖效果優(yōu)于小劑量組，有一定量效關(guān)系，但對(duì)正常小鼠血糖無(wú)影響。節(jié)節(jié)草醇提物成分復(fù)雜，其降血糖有效部位是什么以及通過何種途徑修復(fù)受損胰島β細(xì)胞，今后實(shí)驗(yàn)中有待進(jìn)一步闡明。

[1] 李淑惠，李德坤，李平亞，等.木賊科植物研究概況-化學(xué)成分研究[J].中草藥，2000，31（7）：12-14.

[2] 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：273.