慢性鋁中毒對大鼠肝臟功能及結構的影響

周喜漢 許建國 黃贊松 馬迎教 曹聰

鋁中毒對神經(jīng)系統(tǒng)的毒性已經(jīng)被許多研究所證實[1-3]。但目前關于鋁中毒對肝臟結構和功能影響的報道甚少，本試驗通過連續(xù)腹腔注射三氯化鋁法，建立大鼠鋁中毒模型，通過對血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)和γ-谷氨酰轉移酶(GGT)的測定及肝臟組織學的觀察，旨在探討鋁中毒對大鼠肝臟結構及功能的影響。

1 資料與方法

1.1 動物 由廣西醫(yī)科大學實驗動物中心提供20只活動能力相近、體重210～228 g的健康成年SD清潔級大鼠(實驗動物許可證號:SCXK桂2003-0003)，將實驗大鼠適應喂養(yǎng)1周后，隨機分為2組，即空白對照組、鋁中毒組。每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)，自由進食及飲水。

1.2 試劑 結晶氯化鋁分析純(AlCl3·6H2O，相對分子質量241.43)，西安化學試劑廠產(chǎn)品，批號:010615。

1.3 動物模型的建立及給藥方法 參照文獻[4]的方法制作大鼠鋁中毒模型，即將AlCl3溶液用蒸餾水配制，濃度為10 g/L。AlCl3水溶液高壓滅菌后，以6 mg/(kg·d)的劑量給實驗組進行腹腔注射，給空白對照組腹腔注射等量(0.4 ml/只)滅菌生理鹽水。連續(xù)注射3 d，間隔1 d再注射，全程共60 d。1.4 樣本采集及制備

1.4.1 肝臟功能相關指標的檢測 分別于第4和8周末取尾靜脈血約1.5 ml，分離血清，測定丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)和 r-谷氨酰轉移酶(GGT)等肝功能指標。測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，測定嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4.2 肝組織病理學觀察 取第8周末處死的大鼠肝組織標本，用福爾馬林固定，4～5 μm石蠟切片，HE染色，用光學顯微鏡觀察病理學改變。

2 結果

2.1 鋁中毒對肝臟功能的影響 由表1可見第4、8周末染鋁組的ALT、AST均高于空白對照組，(P＜0.01);GGT在組間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

2.2 鋁中毒大鼠肝組織病理學的影響 空白對照組:肝細胞圍繞中央靜脈呈索狀整齊排列。肝細胞大小一致，細胞界膜清楚，匯管區(qū)無炎細胞反應(見插圖1);鋁中毒組:中央靜脈高度擴張充血，細胞排列紊亂，細胞腫脹，胞漿疏松化及空泡變性，出現(xiàn)灶狀壞死，炎細胞浸潤明顯，有纖維組織增生(見插圖2)。

圖1 空白對照組肝組織病理檢查

圖2 鋁中毒組肝組織病理檢查

3 討論

生活環(huán)境中鋁的廣泛存在和在日常生活中人們接觸鋁的機會增多，導致過多的鋁進入體內會引起鋁中毒。鋁是一種慢性蓄積性毒性物質，在體內主要以Al(H2O)3+與轉鐵蛋白、白蛋白、枸椽酸離子相結合，對人體健康造成重大危害[5]。肝臟對來自體內和體外的許多非營養(yǎng)性物質如各種藥物、毒物以及體內某些代謝產(chǎn)物，具有生物轉化作用。當肝臟受到體外毒物及其他不良因素的侵害時，其結構將受到不同程度的損害，進而引起相應的代謝紊亂。血清氨基轉移酶是肝細胞損傷的敏感指標，肝臟是ALT和AST這兩種酶富含的組織，它們血清活性是肝臟疾病臨床評價最常用的指標，正常情況下兩種血清氨基轉移酶的濃度很低，ALT和AST血清水平的升高與富含氨基轉移酶的組織細胞的損傷或者破潰，或者細胞膜通透性的變化使ALT和AST漏入血中有關。有研究表明，用AlCl3經(jīng)腹腔染毒雛雞8周后發(fā)現(xiàn)肝臟中鋁含量顯著增加，血清中ALT和AST活力顯著提高，同時肝細胞有病理改變[6]。本研究結果與上述報道一致，在鋁中毒大鼠肝臟結構受損，肝細胞腫大、變性、壞死，肝細胞結構完整性遭到破壞，肝細胞內的ALT和AST透過細胞膜進入血液，使外周血中的ALT和AST含量升高，這種變化與肝臟病理組織學結構變化的觀察結果一致。由此可見，鋁中毒對大鼠肝臟結構及功能有一定的影響，對中央靜脈周圍的肝細胞損傷比較嚴重，應該引起人們的密切關注。

[1]王繼芬，康朝勝，臧貴勇，等.慢性鋁中毒對大鼠海馬CA3區(qū)ChAT陽性神經(jīng)元的影響.貴陽醫(yī)學院學報，2010，35(6):561-563.

[2]顧慶云，張立超，李心慰，等.亞慢性鋁中毒對雛雞大腦神經(jīng)細胞凋亡的影響.中國家禽，2010，32(2):12-14.

[3]孫巖，陳海.針刺對鋁中毒SD癡呆大鼠腦組織內細胞凋亡及Bcl-2影響的實驗研究.河南中醫(yī)，2010，30(8):752-754.

[4]李秋營，楊艷旭，張?zhí)珡姡?實驗性大鼠鋁中毒模型建立.山西醫(yī)藥雜志，2002，31(2):113-115.

[5]劉萍.DFP的合成、排鋁作用及對慢性荷鋁動物的保護機制的研究.山東大學2007年博士學位論文.

[6]胡崇偉，王奔，李靜，等.亞慢性鋁暴露對雛雞肝臟結構與功能的影響.中國獸醫(yī)雜志，2010，46(8):38-39.