潤降利膈顆粒的制備和質量控制＊

董軍偉，李國川，焦立紅，彭安堂

(1.河北省石家莊市中醫院制劑室，河北 石家莊 050051;2.河北醫科大學中醫學院，河北 石家莊 050091)

潤降利膈丸是我院注冊制劑(注冊號為冀藥制字Z20051118)，由北沙參、郁金、柴胡、枳殼、茯苓、浙貝、豆蔻、瓦楞子、白及、丹參10味中草藥組方研制而成，具有養陰益胃、順氣開郁之功效，對胃陰不足、肝氣犯胃所致胃氣上逆、吞咽不利、胸悶燒心、胃嘈雜、反胃、腹脹等有良好的治療效果，用于治療食道炎、胃炎的效果顯著。筆者在原水丸劑的基礎上將其改制成顆粒劑，以方便患者服用，提高療效，并以柚皮苷含量為指標，采用正交試驗法優選顆粒劑工藝。現將制備工藝及質量控制方法報道如下。

1 儀器與試藥

島津LC-10AT型高效液相色譜儀，KQ-500DV型數控超聲清洗機(昆山市超聲儀器有限公司);TD200型分析天平(天津天平儀器有限公司);DHG-9070A型電熱鼓風干燥箱(上海一恒科學儀器有限公司)。潤降利膈顆粒(石家莊市中醫院制劑室，批號為20100416，20100417，200418);郁金對照藥材(批號為 121008-200304)、柴胡對照藥材(批號為120992-200301)、丹參對照藥材(批號為0766-200417)、枳殼對照藥材(批號為120981—200403)均購自中國藥品生物制品檢定所;所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 煎煮工藝優選

2.1.1 柚皮苷含量測定[1-2]

色譜條件:色譜柱為 Kromasil C18柱(200 mm ×4.6 mm，5 μm)，柱溫為室溫，流速為1.0 mL/min，流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液(20 ∶80)，等度洗脫，檢測波長為 283 nm，進樣量為 20 μL。理論板數按柚皮苷不低于3 000。

溶液制備:精密稱取柚皮苷對照品6.61 mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，得到每1 mL含264.50 μg的對照品溶液。精密量取提取液50 mL置蒸發皿中，揮干，殘渣用精密量取的50 mL甲醇溶解，回流提取2 h，取出放冷，離心;取上清液濃縮至5 mL，移至25ml容量瓶中，用甲醇定容，搖勻，靜置，過0.22 μm微孔濾膜，即得供試品溶液。

標準曲線繪制:取對照品溶液，以甲醇溶液分別配制質量濃度為 264.50，132.25，66.13，33.06，26.45，13.23 μg/mL 的對照品溶液，取上述溶液，分別進樣20 μL，測定。以柚皮苷質量濃度為橫坐標(X)、峰面積積分值為縱坐標(Y)繪制標準曲線，回歸方程為Y=14 477.828 7 X+25 249.230 5，r=0.999 5(n=6)。結果表明，柚皮苷質量濃度在13.23～264.50 μg/mL范圍內與峰面積積分值線性關系良好。

樣品含量測定:取正交試驗項下各提取液，按上述方法測定柚皮苷含量。

2.1.2 正交試驗

選加水倍數(因素A)、煎煮時間(因素B)、煎煮次數(因素C)為考察因素，以柚皮苷的含量為評價指標，對潤降利膈顆粒的煎煮工藝進行優選。用L9(34)正交表安排試驗，因素水平見表1。按處方量比例分別稱取北沙參5 g，郁金3.3 g，柴胡2 g，炒枳殼3.3 g，茯苓 5 g，豆蔻 2 g，白及 3.3 g，浙貝母 3.3 g，丹參 5 g，瓦楞子(煅)3.3 g，平行稱取9份，按L9(34)表下條件進行提取(每次提取前均加水浸泡40 min)，濾過，合并濾液。依法制備供試品溶液，測定柚皮苷含量。正交試驗結果見表2，方差分析結果見表3。可見，最佳煎煮工藝為A3B2C2，即加12倍量的水，煎煮2次，每次煎煮60 min。

表1 因素水平表

2.2 質量控制

2.2.1 性狀

本品為棕褐色顆粒劑。

2.2.2 薄層色譜鑒別

丹參[3]:精密稱取潤降利膈顆粒粉末10.00 g，加乙醚50 mL超聲提取30 min，過濾，揮干乙醚，殘渣加乙酸乙酯5 mL溶解，作為供試品溶液;精密稱取丹參對照藥材粉末1.00 g，加乙醚50 mL超聲提取30 min，過濾，過濾，揮干乙醚，殘渣加乙酸乙酯5 mL溶解，作為對照藥材溶液;按處方比例取不含丹參藥材的潤降利膈顆粒粉末8.55 g，按上述方法制成陰性對照品溶液。分別吸取上述3種溶液各20 μL，點于同一硅膠G板上，以苯-乙酸乙酯(19∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾(圖1 A)。

表2 正交試驗結果表

表3 方差分析結果

枳殼[4]:精密稱取潤降利膈顆粒粉末10.04 g，加乙醇超聲提取30 min，濾過，濾液濃縮至2 mL作為供試品溶液;精密稱取枳殼對照藥材粉末1.05 g，加乙醇超聲提取30 min，濾過，濾液濃縮至2 mL作為對照藥材溶液;按處方比例取不含枳殼的潤降利膈顆粒9.08 g，按上述方法制成陰性對照品溶液。取上述3種溶液各20 μL，點于同一硅膠G板上，以氯仿-甲醇(10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈365 nm下檢視。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾(見圖1 B)。

柴胡[5-6]:精密稱取潤降利膈顆粒粉末10.23 g，加甲醇50 mL，超聲提取30 min，濾過，濾液濃縮至適量作為供試品溶液;精密稱取柴胡對照藥材粉末1.02 g，加甲醇50 mL，超聲提取30 min，濾過，濾液濃縮至適量作為對照藥材溶液;按處方比例取不含柴胡的陰性對照藥材共9.64 g，按上述方法制成陰性對照品溶液。分別吸取上述3種溶液各20 μL，點于同一硅膠G板上，以乙酸乙酯-95%乙醇-水(18∶2∶1)為展開劑，展開，取出，烘干，置紫外燈365 nm下檢視。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾(圖1 C)。

郁金[7-8]:精密稱取潤降利膈顆粒粉末10.01 g，加甲醇50 mL超聲提取40 min，過濾，濾液濃縮至1 mL作為供試品溶液;精密稱取郁金對照藥材粉末1.00 g，加甲醇50 mL超聲提取40 min，過濾，濾液濃縮至1 mL作為對照藥材溶液;按處方比例取不含郁金藥材的潤降利膈顆粒粉末9.04 g，按上述方法制成陰性對照品溶液。分別吸取上述3種溶液各10 μL，點于同一硅膠G板上，以氯仿-甲醇-甲酸(96∶4∶0.7)為展開劑，展開，取出，105℃烘干，置紫外燈365 nm下檢視。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾(圖1 D)。

圖1 薄層色譜圖

3 討論

本制劑由水丸改為顆粒劑后，方便患者了服用，尤其方便了食道炎患者。通過正交設計確定了潤降利膈顆粒的提取工藝為加12倍水，每次煎煮60 min，煎煮2次。采用丹參、枳殼、柴胡、郁金的薄層色譜鑒別作為質量控制方法，結果明顯，斑點清晰，陰性對照無干擾，重現性好。薄層色譜法作為醫院制劑的質量控制方法，不但能滿足藥監部門的要求，而且操作方便、節約成本，待條件成熟時可將定量分析方法引入制劑質量控制。綜上所述，本制劑工藝及質量控制方法可靠。

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