無患子皂苷對高脂血癥大鼠血脂代謝的影響和對血管內皮功能的保護作用

陸 輝 ，龍子江 ，張道福 ，2

(1.安徽中醫學院，安徽 合肥 230038;2.合肥新新石化有限公司，安徽 合肥 230035)

高脂血癥(hyperlipemia，HLP)與諸多心腦血管疾病的發生密切相關，是引發動脈粥樣硬化的首要因素，也是冠狀動脈性心臟病發病的重要危險因素[1]。高脂血癥可引起血管內皮損傷，引發動脈粥樣硬化的形成，在其形成過程中，伴發血栓素A2(TXA2)與前列腺素I2(PGI2)的平衡失調，進而促進血小板聚集，加速動脈粥樣硬化的形成。無患子皂苷(sapindoside)是無患子科植物無患子 Sapindus mukorossi Gaertn果實提取物。筆者應用高脂飼料復制高脂血癥大鼠模型，以西藥辛伐他汀片為對照，觀察了無患子皂苷對高脂血癥大鼠血脂和內皮功能的影響，并探討其調脂作用及延緩動脈粥樣硬化形成的可能機制。

1 材料與方法

1.1 材料

754型紫外分光光度計(上海精密科學儀器有限公司);GC-911型γ-放射免疫計數器(中國科學技術大學科技實業總公司);Stat-Fax-2100型酶標儀(上海精密科學儀器有限公司)。

Wistar雄性大鼠，體重200～250 g，由南京醫科大學動物中心提供，許可證號SCXK(蘇)2008-0004，室溫保持在15～20℃，濕度50%～60%。

無患子皂苷(含量為92.4%，合肥新新助劑公司);辛伐他汀片(哈藥集團三精制藥有限公司，批號為080601)。丙硫氧嘧啶(上海醫藥有限公司信誼制藥總廠，批號為070901);膽固醇(進口分裝);吐溫-80(天津市東麗區天大化學試劑廠，批號為20070608);丙二醇(天津市津宇精細化工有限公司，批號為030423);豬油(自制)。試劑均儲存于4℃冰箱備用。高脂飼料按文獻方法配制[2]。丙二醛檢測試劑盒(批號為20100517)、超氧化物歧化酶檢測試劑盒(批號為20100517)均為南京建成生物科技有限公司產品;甘油三酯檢測試劑盒(批號為2010010)、總膽固醇檢測試劑盒(批號為2010004)、高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒(批號為2010004)、低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒(批號為2010004)均為長春匯力生物科技有限公司產品;血栓素B2和6-酮-前列腺素F1α放免試劑盒(批號為20100601，北京華英生物技術研究所)。

1.2 方法

1.2.1 動物分組

普通喂養Wistar大鼠1周，使其適應環境。1周后禁食不禁水12 h，眶內采血檢測血脂，均為正常者用于試驗。將其隨機分為5組，即空白對照組、模型對照組、辛伐他汀組、無患子皂苷大劑量組、無患子皂苷小劑量組，每組10只。

1.2.2 模型復制

應用高脂飼料喂養Wistar大鼠復制高脂血癥模型?？瞻讓φ战M喂飼普通飼料，其他4組自試驗第1日起喂飼高脂飼料，持續4周。第4周末禁食不禁水12 h，眶內采血檢測血脂，模型大鼠血脂升高且穩定后，確認為高脂血癥造模成功。

1.2.3 給藥方法

采用直接灌胃法，于第5周起開始灌胃給藥，每日1次，共4周。無患子皂苷大劑量組和小劑量組分別灌服無患子皂苷水溶液0.486 g/kg和0.054 g/kg，辛伐他汀組灌服辛伐他汀水溶液0.010 8 g/kg，空白對照組和模型對照組灌以等容量的蒸餾水。

表1 無患子皂苷對高脂模型大鼠血脂濃度的影響(±s)

表1 無患子皂苷對高脂模型大鼠血脂濃度的影響(±s)

注:與模型對照組比較，▲P＜0.01。

組別 劑量(g/kg)血脂(mmol/L) 抗氧化指標 內皮功能指標(pg/mL)空白對照組模型對照組無患子皂苷小劑量組無患子皂苷大劑量組辛伐他汀組——0.054 0.486 0.010 8 TC 1.65±0.18▲3.56±0.37 2.77±0.17▲2.20±0.12▲2.11±0.19▲TG 0.31±0.11▲1.64±0.44 1.01±0.09▲0.46±0.06▲0.46±0.05▲HDL-C 0.88±0.10▲0.45±0.10 0.63±0.07▲0.81±0.11▲0.96±0.14▲LDL-C 1.57±0.17▲2.71±0.26 1.95±0.12▲1.31±0.09▲1.14±0.10▲MDA(nmol/mg)4.23±0.56▲5.57±0.56 4.80±0.50▲4.04±0.37▲3.88±0.57▲SOD(U/mg)103.14±0.97▲94.95±2.41 98.94±0.68▲99.89±1.83▲100.85±1.33▲TXB2 32.83±4.74▲79.42±4.74 65.19±2.47▲39.46±2.61▲53.02±3.67▲6-keto-PGF1α 97.70±5.22▲53.47±7.61 67.34±1.92▲76.24±2.26▲85.39±2.58▲

1.2.4 血液標本制備及檢測

于末次給藥1 h后，從腹主動脈取血，3 500 r/min離心15 min，分離血清和血漿，-20℃保存。各項檢測指標均按試劑盒說明書操作測定。

1.3 統計學處理

2 結果

結果見表1。

3 討論

高脂血癥[3]是由于脂肪代謝或運轉異常使膽固醇、甘油三酯和(或)低密度脂蛋白(LDL)過高、高密度脂蛋白(HDL)過低而引發的一種病癥。膽固醇、甘油三酯為血管粥樣斑塊的構成物質，低密度脂蛋白可進入血管內壁而促使膽固醇沉積，異常增高的血漿膽固醇、甘油三酯通過改變凝血系統和纖溶系統各種因子的表達功能，促進血栓形成。低密度脂蛋白是提供膽固醇的脂蛋白，其增高可促進和加重高脂血癥的形成。高密度脂蛋白可防止膽固醇沉積于動脈內膜上，可調節細胞內外膽固醇的平衡，對動脈粥樣硬化有預防和逆轉作用，有利于阻止動脈硬化的生成，具有保護作用。本研究結果顯示，與空白對照組比較，模型對照組的膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇的水平均顯著升高(P＜0.01)，高密度脂蛋白膽固醇水平則顯著降低(P＜0.01)，表明大鼠高脂血癥模型造模成功;與模型對照組比較，高、低劑量的無患子皂苷均可顯著降低模型大鼠的膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平(P＜0.01)，可升高高密度脂蛋白膽固醇水平(P＜0.01)，且高劑量作用更明顯，表明無患子皂苷具有確切的調脂作用。

丙二醇為自由基氧化細胞膜上不飽和脂肪酸形成的脂質過氧化物的穩定形式，可反映機體內脂質過氧化的程度。超氧化物歧化酶與體內各種氧化酶結合，可有效地清除病理過程中所產生的O2-，·OH及H2O2等活性氧并終止自由基連鎖反應，阻止一氧化氮的滅活，維護一氧化氮的濃度和維護內皮細胞的功能，降低機體的脂質過氧化反應，對機體的氧化與抗氧化平衡起著重要作用[4-6]。本研究結果顯示，無患子皂苷可明顯降低丙二醛含量、升高超氧化物歧化酶水平，表明其具有抗氧化而減輕血管內皮損傷的作用。因此，抗氧化可能是無患子皂苷發揮防治高血脂癥的機制之一。

另一方面，高脂血癥可引起血管內皮損傷，引發動脈粥樣硬化形成，在其形成過程中，伴有血小板和內皮細胞結構和功能的改變。血栓素A2是強烈的血管收縮劑和血小板聚集促進劑。前列腺素I2是血管內皮細胞分泌的重要舒血管活性物質，具有阻止血小板黏附聚集、抑制血栓形成、保護血管內皮的生物活性。正常情況下，二者處于平衡狀態，從而保持正常的血管張力及血小板內環境的穩定。脂質增加、血脂比例改變和(或)脂質質量異常都可能引起血管內皮細胞的損傷，使之產生前列腺素I2的功能下降，在受損內皮黏附血小板及脂質過氧化的參與下，進一步刺激血小板合成并釋放大量的血栓素A2入血，黏附更多的血小板形成血栓。血栓素A2與前列腺素I2的比值升高又可誘發白細胞附壁、炎性浸潤、纖溶活性降低，并能促進內皮細胞釋放生長因子，刺激成纖維細胞、平滑肌細胞的增生和遷移，形成動脈粥樣硬化。因此，調整血栓素A2與前列腺素I2的比值使其處于平衡狀態，對于防止因高脂血癥引發的動脈粥樣硬化及血栓形成具有重要的臨床意義。本研究結果表明，高脂血癥大鼠存在明顯的血栓素A2與前列腺素I2平衡失調，而無患子皂苷可降低血栓素A2，升高前列腺素I2的水平，糾正二者比值失衡，其作用與辛伐他汀基本相似，提示無患子皂苷有保護血管內皮、防止血栓形成的作用。

綜上所述，無患子皂苷在對高脂血癥模型大鼠血脂代謝產生影響的同時，還能起到保護血管內皮功能的作用。因此，無患子皂苷具有開發為心血管疾病治療藥物的前景，其作用途徑和機制尚有待進一步研究。

[1]王 霞，劉學華.高脂血癥的中醫藥臨床治療研究淺識[J].中醫藥學刊，2004，1(22):1302-135.

[2]劉 明，董超仁，蘇靜儀.一種簡便實用的大鼠高脂血癥模型[J].中國藥理學通報，1989，5(2):119-120.

[3]郭美珠，肖燕倩，孫麗英，等.中醫藥治療高脂血癥實驗研究的進展[J].中醫藥信息，2003，20(6):441.

[4]李亞芹，肖二彬，馬煥云.參芍膠囊對高脂血癥大鼠血清SOD及MDA水平的影響[J].陜西中醫，2009，30(7):923.

[5]蘆麗莉，王冬梅.瓜蔞皮提取液對實驗性高脂血癥大鼠血清NO，SOD，MDA的影響[J].北華大學學報(自然科學版)，2008，9(5):425.

[6]席淑華.活血調脂方對高脂血癥大鼠SOD與MDA影響的實驗研究.河南中醫，2007，27(12):32.