武麗娟 李新建
ABO血型鑒定是無償獻血者獻血前的必查項目,也是血站檢驗科必檢項目之一。ABO血型判斷的正確與否,直接影響臨床輸血工作。血站提供正確血型的血液,是臨床安全輸血的基礎,而錯誤血型的血液一旦輸入,則直接危及患者的生命[1]。我站目前血型鑒定程序是獻血者在采血點由采血人員通過紙板法進行獻血前的血型正定型初篩;采血后留取兩管試管血,由檢驗科對留取的兩管試管血進行正反定型鑒定。紙板法做正定型,有一定的局限性,受人員、環境、溫度、場地等影響,檢測結果存在一定的錯誤率[2]。而站內進行正反定型鑒定也會受多種因素影響而出現正反定型不一致的情況。筆者對2005~2010年ABO血型鑒定不符的情況進行了回顧性統計和總結,現報道如下。
1.1 標本 2005~2010年本站無償獻血標本208090份。
1.2 試劑 抗-A、抗-B標準血清試劑(北京金豪制藥股份有限公司);A、B、O標準紅細胞(上海血液生物醫藥有限責任公司)。所用試劑均經批批檢合格且在有效期內使用。
1.3 儀器 AT-plus2全自動加樣器(澳斯邦公司);STAR全自動加樣器(澳斯邦公司);Liswell血型判讀軟件(海深威公司);HT3酶標儀(奧地利);340RT酶標儀(奧地利)、96孔進口U型板(澳斯邦公司);T.S溫控孵育振蕩器(奧地利ANTHOS公司)、Werk Nr.平板離心機(德國)。
1.4 方法
1.4.1 采血車初篩血型正定型采用紙板法。使用抗-A、抗-B標準血清做正定型。
1.4.2 檢驗科正定型方法 微板法 用STAR全自動加樣器掃描標本條碼,將預稀釋成5%的標本紅細胞40微升平均分配到U型板的兩孔中各20微升,在兩孔內分別加抗-A標準血清50微升,抗-B標準血清50微升。孵育振蕩器轉速400、振幅1、震蕩6分鐘,平板離心機1000r/min離心1分鐘后,孵育振蕩器轉速1000、振幅3、震蕩2分鐘后輕磕微板,340RT酶標儀判讀。
1.4.3 檢驗科反定型方法 微板法 用AT全自動加樣器掃描標本條碼,將標本血清60微升平均分配到U型板的兩孔中各30微升,同一標本的兩孔內分別加A標準紅細胞試劑30微升,B標準紅細胞試劑30微升。孵育振蕩器轉速400、振幅1、震蕩6分鐘,平板離心機1000r/min離心1分鐘后,孵育振蕩器轉速1000、振幅3、震蕩2分鐘后輕磕微板,HT3酶標儀判讀。
1.4.4 軟件編程 非凝集(-);凝集(+)。CUTOFF=0.60。
1.4.5 正反定型不符的標本,待檢室再次留取辮血復查,疑難血型送質控科確認。
2005~2010年各年采血人數、初篩血型錯誤人數、血型不符合率見表1;563份血型不符原因分類統計見表2。

表1 2005~2010年各年采血人數、初篩血型錯誤人數、血型不符合率

表2 563份血型錯誤分類統計表
我們調查208090例無償獻血標本,初篩血型錯誤563例,誤定率為0.3%,并且從2005年到2010年波動不大,誤定率與文獻報道基本相符[3],血型誤定率雖然不是太高,但是ABO血型判斷的正確與否,不僅直接影響臨床輸血工作安全,還會降低獻血者對血站工作的信任感,并影響其發展成為固定獻血者,因此,我們還需進一步采取措施盡可能降低血型的誤定率。
出現血型鑒定不相符的因素從表2可以看出,非人為因素如獻血者標本含有強冷凝集素、亞型及抗原減弱僅107例,人為因素的例數為456例,占80.99%。人為因素中又可分為以下幾點原因:①采血車獻血人員較集中,工作人員因趕時間致使試驗反應時間不足、反應不完全;②工作環境不能保證適宜的溫度,這種情況尤以采血車明顯,經常出現冬冷夏熱的情況,冬天室溫過低,強冷凝集素引起的假凝集等都可能導致錯誤結果的出現[4];③工作人員責任心不強,技術不過硬,操作失誤等都有可能造成血型的誤讀誤判、貼錯試管或血袋標簽、留錯血樣標本、計算機血源信息錄入錯誤等;④血型檢測試劑未被正常使用,出現試劑效價降低甚至失效試劑被使用的情況。
為盡量減少血型錯誤的發生,確保血型鑒定結果的準確率,我們應采取以下預防措施:①在血型鑒定工作中,工作人員的培訓至關重要[5],提高工作人員的責任意識和操作水平,工作人員要做到各負其責,忙而不亂,工作要有耐心,不能由于獻血者多或催促就將反應時間縮短。在正確的溫度下保存試劑,認真檢查試劑的批號和失效日期,保證血型檢測試劑被正常使用;②制訂嚴格的標準化操作規程并在工作中嚴格遵守,掌握好試劑與紅細胞反應比例,確保充分的反應時間;加強核對,一方面要認真核查實驗結果,另一方面要核對血樣標本與血袋采血編號、獻血者姓名、血型,確保貼標簽、填寫血型、計算機信息錄入等原始記錄準確無誤,便于追蹤。③積極建設獻血屋,逐步減少甚至取代采血車,改善獻血環境,保證采血工作在適宜的溫度環境下開展;④為工作人員提供人文關懷,減少工作焦慮,使工作人員保持輕松愉快的心態。⑤出現錯血型后,高度重視重新留取血袋上的小辮血樣,再次進行血型正定復核和反定符合工作[6],杜絕錯血型血液發往臨床,保障臨床用血安全。
[1]刑文革,馬嶸,鄭懷競.國內血站血型血清學檢驗的狀況調查[J].中國輸血雜志,2004,17(3):188-190.
[2]徐國勝,黃可君.ABO血型初篩錯誤原因調查及預防對策[J].廣州醫藥,2010,41(1):51-53.
[3]袁小玲,熊春梅,楊衛紅,等.ABO血型鑒定不符的影響因素分析及預防措施[J].中國輸血雜志,2011,24(3):350-351.
[4]張伯偉,郭如華.無償獻血者初篩血型定型錯誤及原因分析[J].中國輸血雜志,2002,15(3):189-189.
[5]胡繼征,陸典瑞,李啟輝.全自動微型板法檢測28397例獻血者ABO血型的統計分析[J].國際醫藥衛生導報,2003,9(9):75.
[6]鐘傳村,沈奇榮.479例無償獻血者初檢血型錯誤原因分析[J].當代醫學,2009,15(8):41.