口腔唾液幽門螺桿菌測試板的臨床篩查價值研究

張 晶，徐樨巍，丁召路，于飛鴻，王國麗

（首都醫科大學附屬北京兒童醫院消化內科，北京 100045）

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）已被證實與兒童一些常見疾病均有密切關系，可引起消化系統疾病如消化性潰瘍、胃炎等［1，2］，甚至是成人的胃癌［3］;還與消化系統外疾病，如缺鐵性貧血、特發性血小板減少性紫癜、生長發育遲緩等密切相關［4］。有報道中國人群感染率為40%～90%，平均59%;而且目前中國兒童感染率為25%～50%，并以平均每年0.5%～1%的速度遞增［5］。因此，找到一種使用簡便、價格適宜的檢測Hp感染的方法對防治Hp感染有很大的社會價值。本研究使用唾液幽門螺桿菌（Helicobacter pylori in Saliva，HpS）測試板技術［6］測定了150例有消化道癥狀的兒童，并同時與胃鏡活檢組織快速尿素酶試驗（rapid urease test，RUT）檢測結果進行比較。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年7月至2011年2月底我院消化科門診及病房因有消化道癥狀行胃鏡檢查的患兒150例為對象，其中男性82例，女性68例;年齡4～16歲，平均9.87歲。十二指腸潰瘍8例，胃潰瘍1例;十二指腸（球）炎56例，下端食道炎52例（其中食道-胃-十二指腸炎12例）;賁門失弛緩2例，慢性胃竇炎（顆粒樣改變）13例，慢性淺表性胃炎18例。所有患者同時進行胃鏡下RUT和HpS檢測。

1.2 HpS檢測方法 使用美國美利泰格公司生產的HpS抗原測試板，嚴格按說明書方法操作:告知患兒準備唾液1～2 mL備檢;將唾液吐入塑料杯中;用吸管吸取4滴唾液，滴入取樣杯中;滴加2滴緩沖液于取樣杯中;更換吸管，充分混勻后，吸取3～4滴混合液滴入唾液板的吸樣窗口，5～15 min觀察結果。結果判定:指示窗口顯示T和C線，說明Hp陽性;只顯示C線，說明Hp陰性。（注意:測定前1 h內患兒不能進食水）。

1.3 胃鏡下胃竇黏膜活檢RUT檢測方法 使用福建三強生物化工有限公司生產的胃幽門螺桿菌快速尿素酶診斷試劑盒（pH指示劑法）進行檢測，嚴格按照操作說明書進行常規操作及結果判定。觀察5 min顏色變粉色視為陽性。

1.4 統計學方法 應用統計軟件SPSS 13.0進行數據處理，胃與口腔Hp感染檢測結果的一致性采用Kappa分析。

2 結果

150 例患消化道癥狀的患兒，HpS檢出的陽性率為43.33%（65/150），RUT 檢測的陽性率為 27.33%（41/150），而且RUT檢測陽性的患兒，85%HpS檢測也為陽性，提示胃Hp感染者口腔存在高Hp檢出現象。150例患兒中HpS檢出陽性65例，胃鏡RUT檢出陽性41例，陽性符合率（敏感度）為85.37%，陰性符合率（特異度）為72.48%，陽性預測值為53.85%，陰性預測值為92.94%（表1）。對兩種檢測方法所得出的結果進行Kappa分析（Kappa=0.489，P＜0.01），提示兩種方法有很好的一致性。

表1 HpS檢測與胃鏡RUT檢測結果比較

3 討論

目前診斷Hp感染的方法很多，主要分為侵入性檢查和非侵入性檢查兩大類。前者包括細菌培養、組織學檢查、RUT等均需在電子胃鏡進行侵入性胃黏膜活檢基礎上進行;后者主要包括血清學方法、同位素標記的13C或14C呼氣試驗、糞便抗原及分子生物學（如PCR）檢測等。由于侵入性檢查存在實驗技術要求高、儀器價格昂貴、檢測時間長、結果易受取材部位影響及受試者耐受性查等限制，同時還可能存在交叉感染問題，近年來，非侵入性檢查成為人們研究的熱點。近年研究發現［7］，胃Hp陽性兒童，其中68%可在牙斑檢測到Hp，且經PCR測定兩者為同一菌株;而胃Hp陰性兒童，24%牙斑有Hp存在，因此作者認為口腔有Hp寄生者，大多數同時患有胃Hp感染。少數人，口腔有Hp，但胃里沒有Hp寄生，患者處于疾病的早期，感染僅停留在口腔之中，隨著唾液，Hp遲早會流到胃里;另有研究者用PCR技術及ELISA也證實唾液中存在高 Hp 檢出率（46.1%～87.5%）［8，9］，提示口腔是Hp除胃以外的另一重要的集聚點。有學者進一步研究發現，在我國Hp有明顯的家庭聚集現象［10］:對結婚平均6.5年的150對夫妻研究發現一方Hp（+）者，配偶另一方Hp（+）為78.94%;而一方Hp（－）者其配偶Hp陽性率為20%。另一學者研究發現［11］父母雙方都感染Hp，兒童感染的機會是44%;父母一方感染Hp，兒童感染的機會是30%;父母都未感染Hp，兒童感染的機會是21%，提示Hp傳染的重要途徑可能為口-口方式。因此，口腔唾液中Hp快速、簡便的檢測對人群中Hp感染的防治均有很重要的意義。2006年美國學者葉國欽研制出HpS檢測板并獲得專利［6］。其工作原理是利用膠體金標記Hp釋放的尿素酶，當結合物移動至固定的抗體區域時，與該處的抗體發生特異性結合而被截留，聚集在檢測帶上，通過可目測的膠體金標志物得到直觀的顯示結果，游離標志物則越過檢測帶，移動至對照帶結合，顯示對照線。該方法特異、敏感、簡便、快速，一般可在5～15 min內出結果，且不需要特殊設備。本研究用HpS測試板檢測150例患消化道癥狀的患兒，陽性檢出率為43.33%（65/150），與上述有關報道一致。與RUT方法比較，陽性符合率（敏感度）為85.37%，Kappa分析提示兩者有很好的一致性;陽性預測值為 53.85%，陰性預測值為92.94%，提示HpS測試板是一種很好的臨床篩查工具。此外，本組有消化系統癥狀的患兒HpS陽性率（43.33%）較 RUT 陽性率（27.33%）高，其中原因有待進一步探討。但RUT陽性患兒大部分HpS檢測均呈陽性，支持胃Hp感染者唾液中存在高Hp檢出現象。根據本研究唾液Hp檢出率高于胃Hp檢出率現象，推測可能一部分患兒Hp感染尚停留在口中，而未達到胃內定植;以后，隨著時間的推移，口腔內Hp隨唾液下行至胃并定植引起胃炎或消化性潰瘍。此觀念有待進一步將本試驗組僅HpS陽性而RUT目前陰性的患兒動態監測其胃Hp是否隨著時間的推移越來越多轉為陽性來進一步得以證實。將口腔Hp菌在胃定植之前即清除將會在很大程度上降低胃病的發生概率，這對降低我國兒童Hp高感染率有重要意義。目前研究還發現口腔Hp感染與復發性口腔潰瘍、牙周炎等疾病有關，與齲病、口臭、口腔癌等疾病關系尚在研究中［12］。而且隨著胃Hp感染治療失敗研究的深入，發現口腔Hp存在可能是Hp根除失敗的原因之一，口腔Hp感染還可能是Hp復發和再感染的重要原因［13］，提醒醫生要提高Hp根治率、減少復發率，在進行胃Hp感染治療的同時還要診治口腔Hp感染。在此方面還有待臨床工作者進行大量相關研究來驗證。

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