草金魚浸制標本最佳保存法與保色法的探討

摘要：以不同顏色（紅色、黃色、黑色）的草金魚為研究對象，不同體積分數（５％、８％、１０％）的福爾馬林或７０％的酒精作為浸制液，并加入不同體積分數（０．８％、２％、５％）的苯酚與8%福爾馬林組合，研究不同組配的浸制液對草金魚標本的最佳保存及保色效果。結果表明，８％福爾馬林與２％苯酚的混合浸制液對草金魚標本色彩的保持效果最好。

關鍵詞：草金魚；浸制標本；保存；保色

中圖分類號：Ｑ９５－３４＋２文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）16－3358-03

Ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎ of ｔｈｅ Ｂｅｓｔ Ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Methods ｏｆ Grass Goldfish

ＷＥＩ Ｈｕａ，ＺＨＡＮＧ Ｙｕ－ｍｉａｏ，ＬＩＵ Ｈａｉ－ｄｏｎｇ

（Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈｅｎｙａｎｇ １００８６６，China）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｇｒａｓｓ ｇｏｌｄｆｉｓｈ （Ｃａｒａｓｓｉｕｓ ａｕｒａｔｕｓ） of ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｌｏｒｓ （ｒｅｄ， ｙｅｌｌｏｗ， ｂｌａｃｋ）． Extract of ｆｏｒｍａｌｉｎ（５％， ８％， １０％）ｏｒ ７０％ ａｌｃｏｈｏｌ， ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆｐｈｅｎｏｌ （０．８％， ２％， ５％） ｗａｓ ａｄｄｅｄ to study the best preservation and color protection composite extract． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｗａｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃｏｌｏｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ ｗａｓ ８％ ｆｏｒｍａｌｉｎ ａｄｄｅｄ ｗｉｔｈ ２％ ｐｈｅｎｏｌ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｇｒａｓｓ ｇｏｌｄfｉｓｈ（Ｃａｒａｓｓｉｕｓ ａｕｒａｔｕｓ）； ｓｐｅｃｉｍｅｎ； ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ； ｃｏｌｏｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ

魚類色彩豐富，特別是觀賞魚（如金魚、錦鯉、熱帶魚等），色彩艷麗，極具觀賞價值，受到人們的歡迎與喜愛［１］。浸制標本是延續魚類色彩的一種方式，但是作為魚類浸制標本，其艷麗的色彩往往難以保持。因此，制作色彩保持度高的魚類標本，無論在科學研究還是在觀賞效果上都具有一定的價值。

浸制標本的常用浸制液是福爾馬林和酒精，用它們制作標本程序簡單、購置方便、成本也較低，但卻不能很好地保存彩色魚類的顏色，會使其原有的天然色彩消失，最后成為千篇一律的淡褐色，從而降低了標本在教學中的直觀性［２］。為了保存魚類標本的天然顏色，需要對保存液加以處理。本研究以不同顏色的草金魚（Ｃａｒａｓｓｉｕｓ ａｕｒａｔｕｓ）為試驗對象，在浸制液中加入不同體積分數的苯酚溶液，探討不同組配的浸制液對不同顏色草金魚的保存及保色效果，以期在色彩艷麗的觀賞魚標本的保存和保色方法上探索出一條路徑。

１材料與方法

１．１ 材料

１．１．１草金魚草金魚（紅色、黃色、黑色），顏色鮮艷，鱗片、魚鰭等外部形態良好，體長（７．５６±０．７６）ｃｍ，購于沈陽小津橋花鳥魚蟲市場。

１．１．２試劑甲醛（沈陽第一化學試劑廠），９５％酒精（沈陽第一化學試劑廠），苯酚（沈陽第一化學試劑廠），去離子水等。藥品配置：分別配制５％、８％、１０％的福爾馬林溶液，７０％酒精溶液，以及０．８％、２％、５％的苯酚溶液備用。

１．１．３儀器ＮＩＫＯＮ Ｅ２００顯微鏡（日本尼康公司）。

１．２方法

１．２．１草金魚的處理采用窒息法將草金魚處死，洗凈粘附在魚體上的污物和黏液，操作時動作要輕，避免弄掉鱗片及損傷鰭條，拍照并保存原魚類色彩圖片。

配制不同體積分數的浸制液腹腔注射，從腹鰭基部進針，注射量以使腹腔稍硬，胸鰭微張為度。注射后置于解剖盤中，用濕潤紗布覆蓋，待魚定型后，再將魚轉入標本缸中［３］。

１．２．２試驗分組將３種色彩的草金魚隨機分組，每組３種顏色草金魚各８條。試驗分為對照組與試驗組。對照組試劑：５％福爾馬林、８％福爾馬林、１０％福爾馬林、７０％酒精；試驗組試劑：８％福爾馬林＋０．８％苯酚、８％福爾馬林＋２％苯酚、８％福爾馬林＋５％苯酚。

１．２．３觀測方法試驗前肉眼觀察試驗用魚的基本體色，記錄并拍照；同時取不同處理組不同顏色草金魚鱗片顯微鏡下觀察。從浸制時刻開始，每月定期觀察魚的保存情況并拍照。觀察時間為兩年。

２結果與分析

２．１福爾馬林及酒精的浸制效果

２．１．１外部觀察采用５％、８％、１０％福爾馬林及70%酒精分別浸制紅色、黃色、黑色３種顏色的草金魚。僅浸制２ ｄ，在３種體積分數的福爾馬林浸制液中，紅色草金魚顏色全部退去，７０％酒精浸制液中紅色約7 ｄ退去。黃色草金魚在４種浸制液中均可見到黃色素溶解于其中。只有黑色草金魚在以上浸制液中顏色穩定性良好。

在５％、８％、１０％福爾馬林浸制組中，８％體積分數的福爾馬林相對其他兩組，草金魚顏色雖然有不同程度改變，但魚體光澤度、鱗片均保存完好，且硬度最佳。70%酒精浸制組的草金魚鱗片有明顯的外翻現象，可能是脫水太強所致。

２．１．２顯微鏡觀察對３種顏色的新鮮草金魚鱗片用普通顯微鏡觀察，可以看到紅色素細胞、黑色素細胞、黃色素細胞和富含折光性的虹彩細胞。其中，黑色素細胞呈星狀，并有很多突起，細胞本身含有棕色、黑色和灰黑色的色素顆粒。紅色素細胞構造類似黑色素細胞，內含紅色素。黃色素細胞顆粒小，呈黃色或深橙色脂滴狀。虹彩細胞有強折光性，呈多邊形或卵圓形，無突起，內含鳥糞素顆粒。

試驗階段，取４個對照組不同顏色的魚類鱗片顯微鏡觀察，可以看到４種色素細胞均有不同程度變化。黑色素細胞相對比較穩定，形態變化不大，僅顏色暗淡；紅色素細胞遇７０％酒精及福爾馬林會慢慢退色，福爾馬林為１～２ ｄ，酒精約7 ｄ；黃色草金魚浸于７０％酒精及福爾馬林中，結果黃色素溶解于其中；虹彩細胞在任何濃度的福爾馬林中均鏡檢不到，但在70%酒精浸制液中卻清晰可見。

對３個試驗組魚類鱗片進行鏡檢，添加２％苯酚試驗組在任何觀測時間其黑色素細胞顏色均深于其他色素細胞；紅色素細胞顏色比較穩定，消退不明顯；黃色素細胞和虹彩細胞在浸制１個月內鏡檢可以看到脂粒，但之后便逐漸消失。添加０．８％苯酚試驗組黑色素細胞形態和色彩較穩定，黃色素細胞、紅色素細胞觀察不到，虹彩細胞也觀察不到鳥糞素顆粒。添加５％苯酚試驗組鏡檢基本看不到任何色素細胞，視野下幾乎全為白色。

２．２苯酚與福爾馬林組配的浸制效果

在８％的福爾馬林中加入不同體積分數（０．８％、２％、５％）的苯酚，兩年后３種顏色草金魚顏色變化情況如表１所示。紅色、黃色、黑色３種顏色比較，黑色草金魚無退色現象，僅５％苯酚添加組魚體表出現輕微氧化。紅色和黃色草金魚均在８％福爾馬林+２％苯酚處理組保色效果最好，基本無退色現象，紅色草金魚色彩與浸制前比較沒有變化，依然鮮艷。

２．３草金魚體色在不同觀測時間的變化情況

按觀察點定期觀察，以８％福爾馬林與２％苯酚混合組對紅色、黃色、黑色３種色彩的草金魚保存與保色效果最好。經兩年觀察，證明效果可靠。觀測結果如下：紅色草金魚色彩保持良好，顏色鮮艷；黑色草金魚色彩保持良好，顏色光亮呈深黑色，體色無明顯改變；黃色草金魚色彩保持情況沒有紅色、黑色魚好，有輕微退色，但也明顯好于其他試驗組。

３討論

魚類標本的保存方法與色彩的保存與多種因素有關［４，５］。如標本本身的呈色因素及其理化性質，與標本作用的固定劑及固定劑的理化性質、固定與保存的時間、固定樣本的新鮮程度等。

３．１紅色素細胞

紅色素細胞有一個細胞核，內含紅色素，系脂色素族，極易溶于酒精和乙醚［５］。王鑒衷［６］在保存液中加入ＮａＮＯ２和Ｋ２ＳＯ３等還原劑，結果發現它們能大量溶解色素，把上述兩種溶劑加入２％苯酚再把紅色魚浸于其中，結果得到很濃的紅色溶液，而且保存了數年不變色，可見紅色素在還原性環境中十分穩定。用這種溶液加３％ Ｈ２Ｏ２試驗，結果很快被漂白，可見它能被氧化變質。本試驗中，紅色素細胞遇７０％酒精及福爾馬林會慢慢退色，福爾馬林為１～２ ｄ，酒精約7 ｄ。８％福爾馬林中添加２％苯酚，色彩保存良好。但過濃的苯酚（５％）對組織細胞有腐蝕作用，鏡檢為紅色素細胞溶解，外觀表現為體表變白，而且浸制液呈渾濁的紅色，即紅色素微溶于水所致。苯酚體積分數越大，還原性越大，而還原性物質能使紅色素和黃色素溶解于水。

３．２黃色素細胞

黃色素細胞具二核，色素顆粒小，在光線投射下呈橙黃色或深橙色，由葉黃素組成，屬脂色素族［５］。本試驗中，黃色草金魚浸于７０％酒精和福爾馬林中，結果黃色素溶解于其中，可見黃色素對浸制溶劑的溶解程度很強。將黃色草金魚浸制于８％福爾馬林與２％苯酚溶液中，黃色依然退去。可見，黃色素的脂溶程度非常高。王鑒衷［６］把大量小黃魚用甲醛固定于一個黑色有蓋的塑料桶中慢慢取用，十多天后意外發現上面已變色，而底部的完好如初。由此可見，黃色素不但怕光而且怕氧，桶底環境光、氧兩缺，所以能夠保存。因此，對于黃色魚類的保存，最好避光隔氧，才能良好地保存其體色。

３．３黑色素細胞

黑色素是酪氨酸在黑色素細胞中經酪氨酸酶作用聚合而成，能使魚類呈現黑色和褐色［３］。本試驗中，無論是傳統的福爾馬林保存法還是向福爾馬林內添加不同體積分數的苯酚溶液，黑色素細胞均保存良好，黑色草金魚體色基本沒有改變，鱗片鏡檢可見黑色素細胞的分布。但若苯酚體積分數增大，不但不會增強色素細胞的保色能力，反而會破壞黑色素細胞，使魚體黑色消失不見。可見，黑色素細胞的化學性質比較穩定，傳統方法的彩色魚類浸制標本，最后都變成枯草色，主要原因就是其他呈色色素細胞都先后消失，只剩下黑色素細胞的緣故。

３．４虹彩細胞

虹彩細胞由于內含鳥糞素晶體，可呈現較強折光性。這種折射作用使魚類的顏色看起來更艷麗［５］。本試驗中，不同顏色的新鮮草金魚均可鏡檢到鳥糞素顆粒，外觀有較強的折光性。對于浸制標本，虹彩細胞在不同體積分數的福爾馬林浸制液第一、二個月顯微鏡下可以觀察到，但兩年后卻看不到，表明已經和浸制液福爾馬林緩慢作用而溶解、消失。而酒精浸制下的草金魚，雖鱗片有脫水現象，但卻可以清楚觀察到有鳥糞素顆粒存在的虹彩細胞。所以，對以虹彩細胞為主的體表折射性較強魚類的保存，切忌用福爾馬林浸制液，可用酒精保存。

３．５苯酚

苯酚對色素性質溫和，有輕度還原性，能抵抗氧化；ｐＨ值接近中性。根據其性質，本試驗在使用時有幾點需要注意：①魚類體表存在黏液，浸制前需洗去依附在體表的黏液，以達到最佳效果；②苯酚透入性較差，浸制前先用２％苯酚腹腔注射，方能達到良好浸制效果；③苯酚對某些紅色素有微溶現象，所以苯酚體積分數不宜太大，試驗證明以２％為宜，否則色素容易溶解。

３．６固定時間和材料鮮度

由于不同色素細胞的穩定性不同，如果魚類鮮度不好、開始分解的材料或固定劑體積分數過高、固定時間過長，都有損色素結構，不利于持久保色。同理，保存劑體積分數也要盡可能的低，但又必須保證對魚類組織器官的良好保存，試驗證明以８％福爾馬林為好。另外，固定劑過濃或固定時間過久，還會破壞細胞結構，使水容易和原生質分離而滲出，并使標本在保存過程中皺縮。但有一點必須注意，即有色試驗動物獲得后必須盡快冷藏或固定以保證鮮度，最好浸制液中添加２％苯酚浸泡并在腹腔注射（因為苯酚滲透性差，不容易滲入）。

４小結

本試驗主要以紅色、黃色、黑色３種顏色的草金魚研究彩色魚類浸制標本保存與保色的最佳方法。試驗結果表明，８％福爾馬林中加入２％苯酚的混合浸制液對黑色、紅色、黃色草金魚的保色效果最好。但是，魚類色彩繁多，除以上３種外，還有藍色、綠色等，對這些魚類顏色的保存，還需進一步研究，以期獲得最佳保色法。

參考文獻：

［１］ 龐紅梅．讓生物標本成為學生的良師益友［Ｊ］．衛生職業教育，２００５，２３（９）：６３．

［２］ 王玉欣．保色標本和透明標本的制作［Ｊ］．生物學雜志，１９９７（１）：４２．

［３］ 陳凱．生物標本的管理與維修［Ｊ］．安徽農業科學，２００５，３３（２）：３７１－３７２．

［４］ 黃永政．魚類體色研究進展［Ｊ］．水產學雜志，２００８（1）：８９－９４．

［５］ 孟慶聞，蘇錦祥，李婉端．魚類比較解剖［Ｍ］．北京：科學出版社，１９８７．４９－５３．

［６］ 王鑒衷．關于彩色魚類、兩棲類、爬行類浸制標本保色法的探討［Ｊ］．浙江海洋學院學報（人文科學版），１９９４（３）：５４－５６．