大腸桿菌致家兔膽囊炎的動物模型研究

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(1.吉林省中醫藥科學院 藥效毒理評價中心，吉林 長春 130012；2.吉林大學中日聯誼醫院 外科，吉林 長春 130031)

膽囊炎是由于膽道系統的結石、細菌感染及其他原因引起的膽囊炎性疾病，其發病率為8%～10%,隨著我國人民生活水平的提高,飲食結構發生了很大變化,導致膽囊炎發病人數與日俱增。研究治療膽囊炎藥物的單位越來越多，制做膽囊炎模型較為關鍵，現將筆者制做的比較成型的膽囊炎模型介紹如下，供大家參考。

1 實驗材料

1.1 動物 新西蘭家兔，雌雄各半，體質量(2.4±0.2)kg,購自中國人民解放軍208醫院，生產許可證編號〔SCXK(軍)-2002-005〕。

1.2 菌株 ATCC 25922標準大腸桿菌菌株，105CFC/mL。由吉林大學中日聯誼醫院化驗科提供。

2 實驗方法

2.1 造型 取家兔在實驗觀察室適應2 d后，隨機分2組。正常對照組和模型組。全部家兔禁食24 h，不禁水。耳動脈采血1 mL，用于白細胞計數。30 mg/kg戊巴比妥鈉麻醉，剪去腹部毛，強力碘消毒，鋪上無菌巾。腹部正中切口，暴露膽囊，在膽囊底部進針抽出膽汁后，正常對照組向膽囊內注射生理鹽水0.2 mL/只,模型組向膽囊內注射標準ATCC25922大腸桿菌菌株105CFC/mL 0.2 mL/只，結扎針口。雙層關閉腹腔。正常飼養7 d。

試驗結束后取膽囊，作膽囊組織病理學檢查。

3 實驗結果

3.1 一般狀態 給予大腸桿菌后，家兔精神萎靡，活動明顯減少，弓背倦怠，皮毛松，無光澤，體重下降。

3.2 對家兔白細胞、膽道內壓、降速及膽汁流量的影響 見表1。

表1 對家兔白細胞值、降速、膽道內壓、膽汁流量的影響

3.3 膽囊檢查 對照組家兔膽囊壁薄，膽囊較大，膽汁呈黃綠色，透明無顆粒。模型組家兔膽囊壁不同程度增厚，膽汁顏色深綠色，發暗，不透明,有顆粒懸浮或堆積(色素樣顆粒)，約占膽囊體積的1/4～1/6。膽囊光鏡下觀察，正常家兔：膽囊黏膜一層高柱狀上皮，固有膜較薄，含小血管和淋巴管，肌層排列不規整，外被一層漿膜。模型組的家兔黏膜下血管充血，有黏膜水腫、潰瘍、壞死，固有層有大量炎細胞浸潤，有的深達肌層。

4 討論

向家兔膽囊內注射標準ATCC 25922大腸桿菌菌株105CFC/mL 0.2 mL/只，可以引起家兔急性膽囊炎。臨床上膽囊炎主要致病菌為大腸桿菌(占60%～70%)，故用大腸桿菌制做膽囊炎模型，臨床上膽囊炎患者常見膽汁潴留，排泄不暢，導致膽囊內壓力增高，膽汁酸刺激膽囊黏膜，使膽囊黏膜出現水腫、充血、滲出等炎癥反應，嚴重者出現潰瘍、壞死等癥狀。筆者所做的家兔膽囊炎模型出現的膽囊變化與這些癥狀非常相似。大腸桿菌是臨床常見菌株，容易得到，試驗方法操作簡單，重現性好，通過筆者反復試驗證明注射105CFC/mL 0.2 mL/只大腸桿菌就可以造成家兔急性膽囊炎。

[1]李儀奎,金若敏,王欽茂.中藥藥理實驗方法學[M].2版.上海:上海科學技術出版社,2006:481-484.