ω-3多不飽和脂肪酸對慢性輕度應(yīng)激鼠海馬基因表達的影響☆

郭曉云俞瑾崔東紅傅迎美吳根誠江三多翁史旻張燃江開達

·論 著·

ω-3多不飽和脂肪酸對慢性輕度應(yīng)激鼠海馬基因表達的影響☆

郭曉云*俞瑾△*崔東紅*傅迎美*吳根誠△江三多*翁史旻*張燃*江開達*

目的 采用基因芯片技術(shù)篩選ω-3多不飽和脂肪酸（omega-3 polyunsaturated fatty acids，ω-3PUFAs）對慢性輕度應(yīng)激（chronic mild stress，CMS）抑郁大鼠海馬作用的相關(guān)基因。方法 將大鼠根據(jù)隨機數(shù)字表分為3組（6只／組）給予相應(yīng)處理8周：研究組（ω-3PUFAs 3.1 ml·kg－1·d－1＋CMS），模型對照組（生理鹽水＋CMS）和正常對照組。每周進行行為學(xué)指標(biāo)（體重和糖水?dāng)z入量）的測定。采用大鼠10，891條全基因組cDNA芯片，檢測研究組（隨機取3只大鼠）和模型對照組（全部大鼠）海馬的差異表達基因，評價ω-3PUFAs對基因表達的影響。結(jié)果 整個試驗過程，ω-3PUFAs對體重沒有顯著影響（P＞0.05），試驗第7、8周，研究組糖水?dāng)z入量高于模型對照組（P＜0.01），且與正常對照組無差異（P＞0.05）。與模型對照組比較，研究組共35條基因有差異表達，其中12條基因上調(diào)表達，23條基因下調(diào)表達，其中主要包括：轉(zhuǎn)運蛋白基因（Slc17a9、Rtp4、Slc15a4、Kpnb1、Abcb7），信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路基因（Jun、Strada），電壓依賴性離子通道基因（Vdac2），免疫功能蛋白基因（IgE受體β亞單位、IgG2a重鏈）等。結(jié)論 ω-3PUFAs具有抗抑郁作用，其作用機制可能與對轉(zhuǎn)運蛋白、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、離子通道、免疫功能蛋白等多類基因的表達調(diào)節(jié)有關(guān)。

抑郁癥 ω-3多不飽和脂肪酸 基因芯片 慢性輕度應(yīng)激抑郁模型

一直以來，新藥開發(fā)以及新的抗抑郁靶點的探索是精神醫(yī)學(xué)界的重要課題。分子藥理學(xué)從基因表達的角度去闡釋藥物作用機制，這為新藥開發(fā)以及新抗抑郁靶點的探索研究開辟了嶄新的領(lǐng)域。ω-3多不飽和脂肪酸（omega-3 polyunsaturated fatty acids，ω-3PUFAs）在近年來的很多臨床試驗結(jié)果中顯示能有效改善抑郁癥的臨床癥狀［1－2］，對ω-3PUFAs作用機制的深一步探討可能會給新藥開發(fā)及新抗抑郁靶點的探索帶來突破。由于海馬的結(jié)構(gòu)和功能異常在抑郁癥患者廣泛存在，而海馬損傷導(dǎo)致了與抑郁癥相關(guān)的情感、認知以及記憶的損害［3］。因此，本研究選用慢性輕度應(yīng)激（chronic mild stress，CMS）抑郁癥大鼠的海馬這一特定腦區(qū)，從基因表達的水平著手，采用高通量的大鼠全基因組cDNA芯片，研究ω-3PUFAs的作用機制，從而可能極大地增加發(fā)現(xiàn)新的藥物靶點的機率。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 清潔級雄性Sprague-Dawley大鼠（上海斯萊克實驗動物有限公司），共18只，體質(zhì)量100 g～120 g。除特別說明外，動物房維持室溫（22±1）℃，所有大鼠均單籠（40 cm×25 cm×20 cm）飼養(yǎng)，自由飲水和攝食，人工明／暗12 h／12 h晝夜節(jié)律（光照時間9：00－21：00）。本研究所有試驗操作均遵守中華人民共和國實驗動物管理條例和上海市實驗動物管理條例。

1.2 材料和儀器 魚油 （貨號F8020）購自美國Sigma公司。采用的大鼠全基因組表達譜芯片（v1.5）（產(chǎn)品編號SBC-R-RC-100-13）購自上海生物芯片公司，該芯片包含10，891條基因。RNA抽提試劑TRIzol和RNA純化試劑購自德國Qiagen公司，Cy3、Cy5熒光染料購自英國 Amersham公司，G2655AA芯片掃描儀和G2938B分析軟件購自美國Agilent公司。

1.3 ω-3PUFAs對慢性輕度應(yīng)激模型作用的行為學(xué)實驗

1.3.1 大鼠糖水?dāng)z入試驗訓(xùn)練及行為學(xué)評估 本

實驗動物模型的制造在復(fù)旦大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合系完成。先對大鼠進行3 d的適應(yīng)性飼養(yǎng)，繼而進行每周1次共4次的糖水?dāng)z入試驗訓(xùn)練，在以后的每周六（共8次）的12：00－13：00采用糖水?dāng)z入試驗對大鼠進行行為學(xué)評估。方法：將大鼠禁食禁水14 h，大鼠在1 h內(nèi)自由飲用質(zhì)量分數(shù)為1%的稀蔗糖水，所飲用的蔗糖水質(zhì)量為糖水?dāng)z入量（sucrose intake）。最末次糖水?dāng)z入試驗訓(xùn)練結(jié)束計為第0周。

1.3.2 大鼠抑郁模型的建立及ω-3PUFAs干預(yù) 將上述訓(xùn)練后的大鼠根據(jù)隨機數(shù)字表分為3組（6只／組）：研究組、模型對照組、正常對照組。試驗1～4周采用慢性輕度應(yīng)激（chronic mild stress，CMS）法對研究組和模型對照組進行抑郁模型的建立。模型建立方法：每周2次禁食禁水，2次45°鼠籠傾斜，2次隨機配對飼養(yǎng)，2次頻閃儀的閃光刺激（300次／min），2次潮濕墊料（300 mL水潑入墊料中），1次通宵照明，1次白噪聲刺激（90 db），每次刺激持續(xù)12～14 h。試驗第5～8周在CMS模型建立同時，研究組每日灌胃魚油 3.1 mL／kg（含 ω-3PUFAs 0.72 mg），模型對照組每日等體積生理鹽水灌胃。末次糖水?dāng)z入試驗結(jié)束的次日清晨，將大鼠用10%水合氯醛（350 mg／kg）腹腔注射麻醉后，斷頭取腦，冰上分離雙側(cè)海馬，冰生理鹽水沖洗，稱重，用錫紙包裹迅速投入液氮中，－80℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 基因芯片雜交與分析 研究組 （隨機數(shù)字表隨機抽取6只中的3只大鼠）及模型對照組（6只大鼠）海馬樣本。將所取樣本雙側(cè)海馬組織抽提總RNA，繼而純化RNA，所得RNA用紫外分光光度計檢測260 nm和280 nm處吸光度值 （A260和A280）。RNA純度用A260／A280比值判定（標(biāo)準(zhǔn)范圍1.8－2.1），結(jié)果顯示RNA質(zhì)檢全部合格。等量混合6個模型對照組RNA作為陰性對照，每張芯片需1個研究組和6個混合模型對照組的一對樣本，所需RNA總量為2 μg。反應(yīng)體系總體積為20 μL。用MMLV反轉(zhuǎn)錄酶1 μL反轉(zhuǎn)錄RNA，用Inorganic焦磷酸酶0.6 μL將RNA轉(zhuǎn)錄為cRNA，取上述純化后的cRNA 4 μg加入到Cy3，Cy5熒光染料中混勻，其中研究組RNA采用Cy3熒光標(biāo)記，模型對照組RNA采用熒光Cy5標(biāo)記。RNA進行標(biāo)記后利用等量的探針進行雜交：42℃16 h雜交，55℃洗片。

芯片結(jié)果采用Agilent（Axon）掃描儀進行掃描，軟件讀取數(shù)據(jù)，最后采用Genespring進行均質(zhì)化處理分析，最后比值為Cy3／Cy5，比值≥2或≤0.5表明該基因具有上調(diào)或下調(diào)2倍以上的差異表達。根據(jù)基因芯片信息中所提供的基因號，通過美國國立醫(yī)學(xué)生物信息中心（NCBI）http：／／www.ncbi.nlm.nih.gov中的Gene數(shù)據(jù)庫對差異基因進行基因信息學(xué)分析：在Summary中查找基因名；Genomic context中查找基因位點；在Pathways from Biosystems和 Gene Ontology中查找基因功能分類。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。行為學(xué)實驗結(jié)果采用（±s）表示。采用一般線性模型（general linear model，GLM）的重復(fù)測量過程 （repeated measures）分析大鼠行為學(xué)指標(biāo)（體重和糖水?dāng)z入量）隨試驗周次的變化趨勢，以組別作為組間因素，試驗周次作為組內(nèi)因素；隨后采用多元方差分析 （multivariate analysis of variance，MANOVA）分析各時點造模和給藥兩個因素對行為學(xué)指標(biāo)的影響，以LSD檢驗進行兩兩比較。檢驗水準(zhǔn)α＝0.05，雙側(cè)檢驗。

2 結(jié)果

2.1 ω-3PUFAs對抑郁模型大鼠體重和糖水?dāng)z入量的作用 重復(fù)測量數(shù)據(jù)分析結(jié)果顯示，試驗第0～8周試驗周次（F＝29.14，P＜0.01）和組別（F＝45.6，P＜0.01）對體重有顯著影響，兩者之間存在交互作用（F＝3.44，P＜0.01）。MANOVA分析顯示，整個試驗過程ω-3PUFAs對體體重沒有顯著影響（P＞0.05）；自第4周起至第8周，CMS造模對體重有顯著影響 （F分別為：25.29，18.82，16.70，18.39，24.03，P均小于0.01）。兩兩比較顯示，第4、5、6、7、8周，研究組與模型對照組體重均明顯低于正常對照組（P＜0.01）。

重復(fù)測量數(shù)據(jù)分析結(jié)果顯示，試驗第0～8周試驗周次（F＝3.42，P＜0.01）和組別（F＝8.58，P＜0.01）對糖水?dāng)z入量有顯著影響，兩者之間存在交互作用（F＝8.30，P＜0.01）。MANOVA分析顯示：自第3周起至第8周，CMS造模對糖水?dāng)z入量有顯著性影響 （F分別為：18.90，13.03，24.83，22，75，18.71，23.81，P均小于0.01）；自第7周起，ω-3PUFAs對糖水?dāng)z入量有顯著性影響（F＝22.51，P＜0.01；F＝38.84，P＜0.01）。兩兩組間比較顯示，試驗第3、4、5、6周，研究組糖水?dāng)z入量低于正常對照組（P＜0.01），與模型對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；試驗第7、8周，研究組糖水?dāng)z入量高于模型對照組（P＜0.01），與正常對照組無差異（P＞0.05）。見表1。

2.2 ω-3PUFAs對抑郁模型大鼠海馬基因表達的影響 3對樣本共做3張芯片，芯片信號強度高，片內(nèi)信號均一，具有較低的整體背景和較高的信噪比。陽性質(zhì)控點信號均勻一致，陰性質(zhì)控點信號低，變異系數(shù)變化小。按照 cy3／cy5比值均≥2或≤0.5的標(biāo)準(zhǔn)挑選表達差異基因，共有35條，其中12條基因為上調(diào)表達，23條基因為下調(diào)表達。具體基因見表2。

表1 3組大鼠不同試驗階段行為學(xué)指標(biāo)的比較（g，±s）

表1 3組大鼠不同試驗階段行為學(xué)指標(biāo)的比較（g，±s）

造模過程中的體重造模后干預(yù)中的體重n組別研究組模型對照組正常對照組666第0周328.6±29.4 307.9±16.6 296.0±22.6第1周360.7±18.61）313.2±14.5 365.4±22.5第2周358.2±39.0 328.2±11.1 383.1±17.2第3周376.9±48.9 350.9±15.6 434.1±35.7第4周407.2±31.32）345.3±29.01）467.0±30.3第5周398.3±36.32）370.8±42.92）496.2±34.4第6周398.0±33.22）396.0±45.82）516.2±34.4第7周406.2±38.92）395.0±49.22）534.8±44.4第8周414.4±45.82）414.4±45.82）535.5±35.7

續(xù)表1

3 討論

慢性輕度應(yīng)激模型是一個具有高的信度和效度的抑郁癥動物模型，被一致認為適用于抗抑郁藥的藥理機制研究，該模型采用糖水消耗試驗評估動物的快感缺失的程度（結(jié)構(gòu)效度），糖水消耗量降低反映動物快感缺失，多種抗抑郁藥物能逆轉(zhuǎn)能逆轉(zhuǎn)造模所致的糖水?dāng)z入量的降低 （預(yù)測效度）［4］。因此，糖水?dāng)z入量的改變是國內(nèi)外很多研究作為造模是否成功及抗抑郁藥治療療效評估的指標(biāo)［4］。本研究結(jié)果顯示，試驗第3、4、5、6周，研究組糖水?dāng)z入量低于正常對照組但與模型對照組無差異，而試驗第7、8周研究組糖水?dāng)z入量高于模型對照組，表明ω-3PUFAs能有效逆轉(zhuǎn)慢性輕度應(yīng)激大鼠糖水?dāng)z入量降低這一類抑郁樣行為。這與既往結(jié)果一致，均提示ω-3PUFAs對緩解抑郁癥狀有效。一個包含了21項臨床隨機對照研究的Meta分析顯示，ω-3PUFAs能有效改善患者抑郁癥狀，并存在劑量-效應(yīng)關(guān)系［5］；而動物研究也發(fā)現(xiàn)，長期慢性給予ω-3PUFAs能有效逆轉(zhuǎn)抑郁癥動物模型所致的類抑郁樣行為［6］。

表2 －1 ω-3多不飽和脂肪酸上調(diào)基因

表2 －2 ω-3多不飽和脂肪酸下調(diào)基因

目前關(guān)于ω-3PUFAs的抗抑郁機制仍不清楚，對ω-3PUFAs作用機制的深一步探討可能會給新藥開發(fā)及新抗抑郁靶點的探索帶來突破?；蛐酒某霈F(xiàn)為分子藥理學(xué)研究提供了有效的手段，因此，本研究采用基因芯片這一高通量和系統(tǒng)性的研究手段，研究ω-3PUFAs作用相關(guān)基因。結(jié)果顯示，CMS抑郁癥動物模型海馬基因的表達受到ω-3PUFAs的調(diào)節(jié)，這些基因與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多種功能相關(guān)，對這些基因的深一步研究，對于發(fā)現(xiàn)新的抗抑郁藥物靶點并由此開發(fā)新的抗抑郁藥物，具有重要意義。

本研究采用混合模型對照組RNA的方法，選取差異基因的標(biāo)準(zhǔn)為所有的研究組基因均大于2或小于0.5的標(biāo)準(zhǔn)，以減少研究組和對照組單個樣本產(chǎn)生的誤差。本研究結(jié)果顯示共有35條基因表達異常，提示他們可能參與了ω-3PUFAs作用機制。根據(jù)基因的功能分類分析結(jié)果表明，其中ω-3PU FAs對 5個轉(zhuǎn)運蛋白基因 Slc17a9（XM＿130749）、Rtp4（BQ191369）、Slc15a4（NM＿144758）、Kpnb1（NM＿017063）、Abcb7（AI072132）可能起到調(diào)節(jié)作用。Abcb7基因產(chǎn)物的主要功能為ATP轉(zhuǎn)運，目前認為，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，ATP是一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，在神經(jīng)膠質(zhì)細胞之間以及神經(jīng)膠質(zhì)細胞-神經(jīng)元的相互作用中，起到重要作用［7］，而ATP的釋放又受到囊泡核苷酸轉(zhuǎn)運體 Slc17a9的影響［8］，因此，本研究結(jié)果提示，ω-3PUFAs可能通過對Abcb7和Slc17a9基因的調(diào)節(jié)，對ATP這一特殊神經(jīng)遞質(zhì)的功能起重要調(diào)節(jié)作用。另外，本研究還顯示ω-3PUFAs對Slc15a4基因起上調(diào)作用，該基因產(chǎn)物在海馬密集分布，主要參與寡肽的降解過程［9］。目前認為，除了經(jīng)典的單胺類、乙酰膽堿及氨基酸以外，一些寡肽在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有神經(jīng)遞質(zhì)的作用。上述研究結(jié)果提示，ω-3PUFAs可能通過對轉(zhuǎn)運蛋白從而對神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)，調(diào)控中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能。

本研究結(jié)果顯示，ω-3PUFAs對兩個信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路基因Jun（X17215）和 Strada（NM＿028126）也可能起調(diào)控作用。本研究顯示ω-3PUFAs上調(diào)Jun基因（X17215）的表達。而目前研究表明，該基因參加了眾多的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，包括：凋亡途徑，B細胞受體信號通路，Notch信號通路，ErbB信號通路，神經(jīng)營養(yǎng)信號通路，MAPK信號通路，Wnt信號通路，而抗抑郁藥物和情感穩(wěn)定劑能有效逆轉(zhuǎn)抑郁癥所存在的上述通路的異常［10－11］。另外一個Strada基因參與了胰島素的信號通路，主要功能是對胰島素受體起活化作用，而I型糖尿病與抑郁癥可能存在生物學(xué)相關(guān)［12］。因此，對上述基因進行進一步研究，對于尋找ω-3PUFAs對抑郁癥信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的靶點并由此開發(fā)新的抗抑郁藥物，具有重要意義。

本研究結(jié)果顯示，ω-3PUFAs能下調(diào)電壓依賴性離子通道基因Vdac2（NM＿031354）的表達。Vdac基因共有 3個同分異構(gòu)體：Vdac1、Vdac2和Vdac3。Vdac基因表達產(chǎn)物蛋白位于細胞質(zhì)和線粒體膜，在調(diào)控細胞凋亡過程中起重要作用。Akanda等［13］研究顯示，在正常的海馬神經(jīng)元中，Vdac的通道呈關(guān)閉狀態(tài)，然而在凋亡的神經(jīng)元中，Vdac通道開放，抗Vdac的抗體則能有效抑制神經(jīng)元凋亡。King等［14］的研究也表明，ω-3PUFAs能有效減少成年大鼠脊髓擠壓損傷導(dǎo)致的神經(jīng)細胞凋亡，增加神經(jīng)細胞的存活。上述研究提示，ω-3PUFAs可能通過下調(diào)Vdac基因表達繼而抑制凋亡的途徑，發(fā)揮抗抑郁效應(yīng)。

本研究結(jié)果表明，ω-3PUFAs對2條免疫功能蛋白基因：IgE受體β亞單位（S83311）、IgG2a重鏈（L22652）的表達均起到下調(diào)作用。目前已有研究發(fā)現(xiàn)，IgE可誘發(fā)變態(tài)反應(yīng)性疾病，并可引起腦的神經(jīng)生化改變，患者在春季抑郁癥和自殺的高發(fā)生率可能與IgE升高有關(guān)［15］。上述研究提示，ω-3PUFAs可能通過抗炎作用的機制發(fā)揮抗抑郁作用。

另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，ω-3PUFAs對3個細胞骨架蛋白基因Ska1（BQ196248）Capzb（NM＿009798）、Epb42（AI103100）和2個細胞周期蛋白基因Nde1（NM＿053347）和Cdca4（AK010535）起調(diào)節(jié)作用。并且，ω-3PUFAs對轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)基因Suds3（XM＿132346）起下調(diào)表達作用，ω-3PUFAs對4個代謝相關(guān)基因Pld4（XM＿127131），Gucy2e（NM＿024380）、Clk1（AI409705）、Lbr（NM＿134453）。盡管目前關(guān)于這些基因與抑郁癥和抗抑郁藥物的研究還較少，但現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)以上幾類基因與腦也有著密切的關(guān)系，如Capzb蛋白在軸突末端的生長錐形成、軸突生長中發(fā)揮重要作用［16］。NDE1基因在神經(jīng)膠質(zhì)細胞高度表達，在大腦皮質(zhì)發(fā)育中起重要作用，NDE1缺陷導(dǎo)致神經(jīng)發(fā)育缺陷［17］。因此，對這些基因進一步研究，對于進一步闡明ω-3PUFAs與腦功能的聯(lián)系具有重要意義。

綜上，ω-3PUFAs能改善CMS模型鼠的類抑郁行為，并且本研究結(jié)果顯示ω-3PUFAs對該CMS模型的轉(zhuǎn)運蛋白、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、離子通道、免疫等基因以及一些功能未明基因起調(diào)節(jié)作用。對上述基因作進一步的基因定量表達驗證，排除假陽性發(fā)現(xiàn)，并對有陽性重復(fù)結(jié)果的基因作進一步研究，對于闡明ω-3PUFAs的作用機制，以及尋找新的抗抑郁靶點，具有重要意義。

致謝 中國醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院精神科李曉白教授對本課題設(shè)計及方法學(xué)的指導(dǎo)。

［1］Nemets H，Nemets B，Apter A，et al.Omega-3 treatment of childhood depression： a controlled， double-blind pilot study［J］.Am J Psychiatry，2006，163（6）：1098－1100.

［2］Marangell LB，Martinez JM，Zboyan HA，et al.A doubleblind， placebo-controlled study of the omega-3 fatty acid docosahexaenoic acid in the treatment of major depression［J］.Am J Psychiatry，2003，160（5）：996－998.

［3］Frodl T，Reinhold E，Koutsouleris N，et al.Interaction of childhood stress with hippocampus and prefrontal cortex volume reduction in major depression［J］.J Psychiatr Res，2010，44（13）：799－807.

［4］Willner P.Validity，reliability and utility of the chronic mild stress model of depression： a 10-year review and evaluation［J］.Psychopharmacology，1997，134（4）：319－329.

［5］Kraguljac NV，Montori VM，Pavuluri M，et al.Efficacy of omega-3 Fatty acids in mood disorders-a systematic review and metaanalysis［J］.Psychopharmacol Bull，2009，42（3）：39－54.

［6］ 郭曉云，崔東紅，顧靖，等.ω-3多不飽和脂肪酸對慢性輕度應(yīng)激抑郁癥動物模型的作用及單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響 ［J］.中華精神科雜志，2007，40（4）：238－242.

［7］Butt AM.ATP：a ubiquitous gliotransmitter integrating neuronglial networks［J］.Semin Cell Dev Biol，2011，22（2）：205－213.

［8］Larsson M， Sawada K， Morland C， et al.Functional and anatomical identification of a vesicular transporter mediating neuronal ATP release［J］.Cereb Cortex，2011.［Epub ahead of print］

［9］Yamashita T，Shimada S，Guo W，et al.Cloning and functional expression of a brain peptide／histidine transporter［J］.J Biol Chem，1997，272（15）：10205－10211.

［10］Bachis A， Cruz MI， Nosheny RL， et al.Chronic unpredictable stress promotes neuronal apoptosis in the cerebral cortex［J］.Neurosci Lett，2008，442（2）：104－108.

［11］Gupta A，Schulze TG，Nagarajan V，et al.Interaction networks of lithium and valproate molecular targets reveal a striking enrichment of apoptosis functional clusters and neurotrophin signaling［J］.Pharmacogenomics J，2011.

［12］Korczak DJ，Pereira S，Koulajian K，et al.Type 1 diabetes mellitus and major depressive disorder： evidence for a biological link［J］.Diabetologia，2011，54（10）：2483－2493.

［13］Akanda N，Tofighi R，Brask J，et al.Voltage-dependent anion channels（VDAC）in the plasma membrane play a critical role in apoptosis in differentiated hippocampal neurons but not in neural stem cells［J］.Cell cycle，2008，7（20）：3225－3234.

［14］King VR，Huang WL，Dyall SC，et al.Omega-3 fatty acids improve recovery，whereas omega-6 fatty acids worsen outcome，after spinal cord injury in the adult rat［J］.J Neurosci，2006，26（17）：4672－4680.

［15］Postolache TT，Roberts DW，Langenberg P，et al.Allergen specific IgE，number and timing of past suicide attempts，and instability in patients with recurrent mood disorders［J］.Int J Child Health Hum Dev，2008，1（3）：297－304.

［16］Davis DA，Wilson MH，Giraud J，et al.Capzb2 interacts with beta-tubulin to regulate growth cone morphology and neurite outgrowth［J］.PLoS Biol，2009，7（10）：e1000208.

［17］Bakircioglu M，Carvalho OP，Khurshid M，et al.The Essential Role of Centrosomal NDE1 in Human Cerebral Cortex Neurogenesis［J］.Am J Hum Genet，2011，88（5）：523－535.

The effect of omega-3 polyunsaturated fatty acids on gene expression profile in the hippocampus in chronic mild stress rats.

GUO Xiaoyun，YU Jin，CUI Donghong，F(xiàn)U Yingmei，WU Gencheng，JIANG Sanduo，WENG Shimin，ZHANG Ran，JIANG Kaida.Shanghai Mental Health Center，Shanghai Jiaotong University School of Medicine，No.600 South Wanping Road，Shanghai 200030.China.Tel：021－64860502.

Objective To study the effect of omega-3 polyunsaturated fatty acids（ω-3PUFAs）on gene expression profile of the hippocampus in chronic mild stress rats using microarray.Methods All rats were divided into three groups（6 rats per group）according to the table of random digit：research group（treateol with ω-3PUFAs 3.1 ml·kg-1· d-1＋CMS），model control group（treateol with saline＋CMS）and normal control group.Weight and sucrose intake were examined every week.The hippocampus tissues from research group （3rats randomly chosen） and model control group（all rats）was used to assess the impact ofω-3PUFAs on gene expression profile of the hippocampus using a cDNA microarray with 10，891 distinct rat genes.Results There were no difference in weight between research group and model control group throughout the whole experiment（P＞0.05）.On week 7 and 8， sucrose intake were higher in research group than in model control group（P＜0.01），but were no different between research group and normal control group（P＞0.05）.Thirty-five genes had altered change in ω-3PUFAs treated rats.Among them，12 genes were upregulated and 23 genes was downregulated.Those genes include transport protein gene（Slc17a9、Rtp4、Slc15a4、Kpnb1、Abcb7），signal transduction gene（Jun、Strada），voltage dependence ion channel gene（Vdac2）and immune function protein gene（IgE receptor β subunit、IgG2a heavy chain）.Conclusions ω-3PUFAs can improve the depressant-like behavior in chronic mild stress rats which may invlove many genes including transport protein， signal transduction， ion channel，and immune genes and some genes with ambiguous function.

Depression Omega-3 polyunsaturated fatty acids Microarray Chronic mild stress depression model

R794.4

A

2011－06－22）

（責(zé)任編輯：曹莉萍）

☆ 上海市科委“登山行動計劃”項目基礎(chǔ)性研究重點項目（編號：06JC14061）；上海市精神衛(wèi)生中心院級課題（編號：2010-YJ-06）

* 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬精神衛(wèi)生中心（上海 200030）

（Email：jiangkaida＠yahoo.com.cn；gcwu＠shmu.edu.cn）

△ 復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)系，針刺原理研究所