尿糖對白細胞干化學(xué)法檢測結(jié)果的影響

關(guān) 濤 （長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗部，湖北 荊州434020）

為探討尿糖對尿液分析儀白細胞干化學(xué)檢測結(jié)果的影響，我們分析了我院門診干化學(xué)檢測尿糖陽性且鏡檢白細胞陽性的患者尿液標本200例的尿檢資料，現(xiàn)報道如下。

1 臨床資料

1．1 設(shè)備與試劑

本實驗室所用儀器為GEB-600自動尿液分析儀 （廣州市花都高爾寶生物技術(shù)有限公司），及配套的試紙條GEB-11（100人份／筒）；尿液質(zhì)控品 （上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn)）；鏡檢用雙目顯微鏡（日本產(chǎn)奧林巴斯公司）；10ml定量吸管；牛鮑氏計數(shù)板；低速自動平衡離心機 （4000r／min）。

1．2 標本來源

隨機選取我院門診干化學(xué)尿糖≥2．8mmol／L為陽性的尿液標本200例，其中男50例，女150例，年齡18～65歲。

1．3 檢測方法及結(jié)果

1．3．1 尿液分析儀檢測尿糖 用定量吸管吸取混勻的10ml新鮮尿液于玻璃試管中，將尿試紙條浸入1s后取出，試紙帶由藍色→棕色的顏色變化來指示，藍色為無尿糖，用 “-”表示，棕色越深，“＋”越多，尿糖越高。結(jié)果報告為±、＋、2＋、3＋、4＋。檢測結(jié)果見表1。

表1 尿液檢測結(jié)果

1．3．2 鏡檢 取尿液10ml于試管中，以2000r／min離心5min，棄去上清液，留沉淀0．2ml。充分混勻后，取出約20μl滴于載玻片上，加蓋玻片，然后用較弱的光線先以低倍鏡觀察全貌，再用高倍鏡辨認細胞。為避免尿液中有形成分的破壞，所有檢測均在取樣后1h內(nèi)完成。尿液干化學(xué)質(zhì)控參照叢玉隆［1］報道的方法。尿沉渣鏡檢判讀標準：以白細胞≥14×106個／L為陽性［2］。

2 討 論

尿液干化學(xué)分析儀是測定尿中某些化學(xué)及有形成分的自動化儀器，它無論是在哪一級醫(yī)院里都是非常普通但又是非常重要的自動化檢測設(shè)備，這種儀器具有體積小、操作簡單、快速等優(yōu)點。但是在使用中有許多因素都有可能影響該儀器檢測結(jié)果的準確性，不僅會引起實驗結(jié)果的偏差，而且耽誤了臨床醫(yī)生的診斷。因此，除了要求操作者熟練掌握尿液分析儀的原理、使用方法、注意事項及影響因素等方面之外，還要定期對其進行保養(yǎng) （如日、周、月、年保養(yǎng)等），這樣才能確保尿液分析儀處在一個最佳狀態(tài)，從而讓它所檢測的結(jié)果更準確。

尿液干化學(xué)分析儀各測試項目的主要檢測原理是依據(jù)多聯(lián)試紙帶上各自對應(yīng)模塊化學(xué)反應(yīng)后顏色變化的深淺來確定尿液中的含量，其測試原理的本質(zhì)是光的吸收和反射，試劑塊顏色的深淺對光的吸收、反射是不一樣的，光值量越小，反射光量值越大，反射率也越大。換言之，特定試劑塊顏色的深淺與尿液中特定化學(xué)成分濃度成正比，因此任何外源性物質(zhì)或人為因素對尿液標本對多聯(lián)試紙帶模塊的干擾，均可引起檢測結(jié)果的誤差。我科采用的與儀器配套的GEB11型尿試紙條檢測白細胞模塊的原理則是白細胞酯酶法，因為單核細胞、淋巴細胞無這種酯酶，只有中性粒細胞內(nèi)含有酯酶，這種酶能水解一種3-羥基吲哚酚酯類底物，釋放出酚從而與重氮試劑反應(yīng)生成紫紅色化合物，所以干化學(xué)法白細胞檢測方法只對粒細胞敏感。另外，如果白細胞被破壞后，酯酶釋放到尿液中，其干化學(xué)結(jié)果為陽性，而沉渣結(jié)果為陰性，在實際操作中應(yīng)注意。尿糖測定的原理則是基于葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng)，只與葡萄糖發(fā)生反應(yīng)，當葡萄糖氧化酶特異性氧化β-D-葡萄糖醛縮合過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下，使指示劑氧化而呈現(xiàn)出棕色，試紙后一步反應(yīng)為氧化還原反應(yīng)，當尿液中含有比色素還原能力更強的物質(zhì)時，可使尿糖結(jié)果偏低，甚至可以出現(xiàn)假陰性；如尿液中含有維生素C，可使尿糖結(jié)果偏低，可出現(xiàn)假陰性［3］，當尿糖陽性即尿糖≥2．8mmol／L時，干化學(xué)法檢測白細胞的結(jié)果的假陰性率達35%～85%，尿糖對于化學(xué)法測定白細胞的干擾程度隨著尿糖含量的增加而升高。

3 體 會

①尿干化學(xué)分析須使用新鮮尿液標本，標本量應(yīng)該在10ml以上。②在使用任何一種尿試紙前，首先應(yīng)該認真閱讀使用說明書，并嚴格按照它的要求和操作方法執(zhí)行。試紙應(yīng)該在有效期內(nèi)使用，禁止用手觸摸試紙上的試劑反應(yīng)區(qū)。每次取出試帶后應(yīng)立即蓋緊蓋子，將余下的試帶儲藏在避光、干燥的試帶瓶內(nèi)，室溫條件下保存。③各廠家生產(chǎn)的尿試紙，其反應(yīng)原理和項目排列方式都有不同，反應(yīng)時間、顏色變化、靈敏度等各有不同，選用的測定單位也不一致，因此，不能混合使用或用不同的比色板比色。④試紙浸入尿液的時間不要太長，嚴格掌握比色時間，在規(guī)定時間時完成比色。某些反應(yīng)如葡萄糖、酮體、潛血試驗等會因比色時間延長而使得結(jié)果偏高。⑤由于干化學(xué)法是依靠顏色變化來反映檢測結(jié)果的，因此人眼睛對顏色的識別和判斷非常重要。但是目測法因人與人之間對顏色的辨別能力不同，會出現(xiàn)判別誤差，因此在有條件的情況下盡量使用半自動或全自動尿液分析儀。⑥干化學(xué)儀器法檢查白細胞只能作為一種篩選試驗，絕不能代替顯微鏡檢查。

［1］叢玉隆 ．尿液常規(guī)分析質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用體會 ［J］．臨床檢驗雜志，2001，19（4）：241-243．

［2］李小龍，郭仁勇，陳曉東．Diasys尿沉渣測定方法的參考值確定 ［J］．臨床檢驗雜志，2003，21（1）：46-47．

［3］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子喻 ．全國臨床檢驗操作規(guī)程 ［M］．3版 ．南京：東南大學(xué)出版社，2006：284-285．