前列通片提取工藝的研究

昌志紅,鄧小玉 (仙桃市彭場衛(wèi)生院,湖北仙桃43301 8)

前列通片由黃柏等10味中藥組成,是我院仿制制劑之一。其制法規(guī)定:黃柏與其它6味藥用水提取兩次。而黃柏與其它藥味煎煮可能導(dǎo)致鹽酸小檗堿在提取物中的含量顯著降低[1]。為了盡量降低前列通片制備過程中藥物之間相互作用對成品有效成分的影響,我們進行了如下實驗,現(xiàn)報道如下。

1 實驗材料

1.1 儀器

LD-6A高效液相色譜儀;SPD-10B檢測器;LC-2002色譜工作站;TDL-40B型臺式離心機,721紫外分光光度計。

1.2 藥品

廣東王不留、黃芪、車前子、關(guān)黃柏、兩頭尖 、蒲公英、澤蘭經(jīng)本市藥品檢驗所鑒定為藥典收載品種,鹽酸小檗堿 (713-9961)、蘆丁 (0085-9705)延胡索乙素 (0087-9630)對照品購自湖北省藥品檢驗所。

2 方法與結(jié)果

2.1 工藝設(shè)計

黃柏單獨用水煎提,土茯苓、丹參、川楝子、苦參、赤芍、三棱、當歸、香附、芡實等9味藥合并用水煎煮提取。

2.2 黃柏的提取

2.2.1 提取條件選擇 選用L9(34)正交設(shè)計表,以鹽酸小檗堿的含量為指標,考察加水量、提取時間、提取次數(shù)對提取工藝的影響。因素水平見表1,正交試驗結(jié)果見表2,方差分析結(jié)果見表3。由表2、表3可知:黃柏提取過程中A、C因素對試驗結(jié)果有顯著影響,B因素對實驗結(jié)果影響較小,故優(yōu)化提取方案選擇A3B2C3。即提取水量為凈藥材的10倍,水提3次,每次2h。

表1 黃柏提取方法因素水平

表2 黃柏提取方法正交試驗

2.2.2 含量測定 取黃柏9份,每份100g,按表2所示方案提取,將以上各樣品提取液過濾,并濃縮至50ml,按藥典方法測定鹽酸小檗堿含量[2]。

2.3 黃芪等6味中藥提取方案試驗

2.3.1 提取條件 選用L9(34)正交設(shè)計表,以總黃酮的含量為指標,考察 A、B、C因素對提取工藝的影響。因素水平表見表4,試驗結(jié)果見表5,分析結(jié)果見表6。由表5、表6可知:黃芪等6味藥水提過程中提取次數(shù)對試驗結(jié)果有顯著影響,A和C因素對試驗結(jié)果影響較小,優(yōu)化提取方案選應(yīng)A2B2C3。即提取條件為:提取水量為凈藥材量的8倍,水提3次,每次2h。

表3 黃柏提取方法方差分析

表4 黃芪等提取方法因素水平

表5 黃芪等取方法正交試驗

2.3.2 含量測定 取王不留40g、黃芪46g、車前子26g、兩頭尖34g、蒲公英33g、澤蘭33g按正交設(shè)計條件用水提取,過濾,濃縮至500ml備用。

1)樣品溶液制備。精密量取各試驗號的水提液25ml除去水份,以30%乙醇溶解,移至10ml容量瓶中,再加30%乙醇至5ml,各加入10%NaNO20.3ml溶液,混合均勻,取2ml加入10%Al(NO2)30.3ml搖勻,放15min,加入4%NaOH溶液,混合均勻,然后用30%乙醇稀釋至規(guī)定量。

表6 黃芪等提取方法方差分析

2)準曲線繪制。按文獻方法測定蘆丁含量測定標準曲線[3],得回歸方程A=0.0126C+0.0057,r=0.9996。線性范圍 10.0～80.0μ g/ml。

3)含量測定。精密吸取50μ l以上樣品溶液,移至10ml容量瓶中,加30%乙醇溶液稀釋至規(guī)定量,混勻,依法測定,計算即得。

3 結(jié) 論

實驗表明,前列通片質(zhì)量標準中的水提取工藝應(yīng)改為:黃柏加水量為原藥材量的10倍,以水提取3次,每次2h。其余藥材水提用水量為凈藥材量的10倍,水提3次,每次2h。提取方法變更后可明顯提高前列通片中有效成份的含量,方法較為簡單。

[1]郭東艷,陳娟.黃柏中鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中的提取率 [J].時珍國醫(yī)國藥,2009,20(6):1054-1055.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典 (一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:94,214.

[3]喻雄華,王天明,曾愛兵.婦炎康片提取工藝的研究 [J].湖南中醫(yī)雜志,2010,26(2):115.