高效液相色譜-串聯質譜法分析大腸桿菌代謝組中樣品提取方法的比較

摘要 比較了基于液相色譜和串聯質譜聯用技術（LCMS/MS）的E.coli代謝組分析的5種不同樣品提取方法。在對樣品進行淬滅和洗滌后，分別使用冷甲醇法、熱乙醇法、甲醇/氯仿法、熱甲醇法和高氯酸法對樣品平行提取3次，每個樣品重復進樣3次。結果顯示，冷甲醇法所得到的相對提取率最高，且重復性好（RSD＜5%）。從相對提取率、重復性等方面綜合考察5種提取方法，從優到劣依次為：冷甲醇法＞甲醇/氯仿法＞高氯酸法＞熱乙醇法＞熱甲醇法。此外，以冷甲醇法的提取溶劑配制系列不同濃度的代謝物標樣測定的結果表明，本方法的代謝物檢測線性較好，線性范圍較寬，提取溶劑的基體效應對代謝物的定量分析影響較小。本方法的檢出限為0.05～0.36 SymbolmA@ mol/L。

關鍵詞代謝組分析； 液質聯用； 提取方法； 大腸桿菌