高效液相色譜法測(cè)定九味參蓉片中淫羊藿苷含量

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(1.長(zhǎng)春市中心醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130051；2 長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春，130021)

九味參蓉片是由人參、淫羊藿等九味藥，經(jīng)過(guò)提取分離后制成的制劑。具有陰陽(yáng)雙補(bǔ)的作用，用于陰陽(yáng)兩虛引起的頭暈耳鳴、失眠多夢(mèng)、心悸氣短、畏寒肢冷、潮熱汗出、腰膝酸軟、性機(jī)能減退。

1儀器與材料

LC-2010A高效液相色譜儀(日本島津)，SPD-10AvP檢測(cè)器。 標(biāo)準(zhǔn)品：淫羊藿苷對(duì)照品(批號(hào)：0737-200111，規(guī)格：供含量測(cè)定用)，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(28：82)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270 nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于5 000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取淫羊藿苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含39 μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取本品20片，除去包衣，精密稱(chēng)定，研細(xì)，取約0.9 g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50 mL，稱(chēng)定重量，超聲處理(功率100 W，頻率40 KHZ)45 min，放冷，稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系的考察 分別精密吸取對(duì)照品溶液4.0、7.0、10.0、13.0、16.0 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定。回歸方程為Y=1 832.320X-9 992.382，r=0.999 7，線性范圍：156.8～627.2 μg。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 依上述色譜條件，分別在0、4、8、12、24 h測(cè)供試品溶液吸收峰峰面積， RSD為0.86%。

2.6 精密度試驗(yàn) 將供試品溶液重復(fù)測(cè)定5次，RSD為0.79%。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)的樣品，平行制備6分供試品溶液，依法進(jìn)行測(cè)定，RSD為1.22%。

2.8 加樣回收率試驗(yàn) 精密取已知含量的同一批號(hào)樣品6分，研細(xì)，取約0.5 g(含量為1.878 mg/g)，精密稱(chēng)定，精密加入淫羊藿苷對(duì)照品溶液2 mL(濃度為0.49 mg/mL)，按2.3方法制備供試品溶液，測(cè)定，平均回收率為98.32%，RSD為1.52%。

2.2.9 樣品含量測(cè)定 按2.3方法制備供試品溶液，取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10 μL，分別進(jìn)樣，測(cè)定平均含量為0.453 1 mg/片。

3 討論

3.1 供試品溶液制備方法的選擇 通過(guò)比較超聲提取法和回流提取法，結(jié)果2種方法制備的供試品溶液中回流法略高于超聲法，但二者沒(méi)有顯著性差異，且回流法雜質(zhì)多，分離不好，故采用超聲提取法制備。

3.2 測(cè)定波長(zhǎng)及流動(dòng)相的選擇 按供試品溶液制備時(shí)取樣量，折算成處方中除淫羊藿外其他藥材的取樣量，按上述方法制成空白溶液。取一定量的對(duì)照品溶液、供試品溶液及空白溶液，參考有關(guān)文獻(xiàn)[1-2]，以乙腈和水的不同比例為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果測(cè)定波長(zhǎng)為270 nm，乙腈-水(28：82)時(shí)，對(duì)照品及供試品溶液在相就的保留時(shí)間處有吸收峰，而空白溶液無(wú)吸收峰，說(shuō)明空白溶液無(wú)干擾。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:229.

[2]董雪蓮,董金香.舒冠片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].吉林中醫(yī)藥,2007,27(8):52.