淺談血液分析時影響血小板檢測的因素

彭曉蓉

(公安縣人民醫院病理科,湖北公安434300)

在醫學技術不斷發展的今天,血液分析儀的靈敏度和準確度也有了空前提高,血液分析儀的簡便、快捷、高效、高重復性的特點使得血常規檢查在臨床診斷中起來越發揮出極其重要的作用,但是在實際操作中,血小板檢測結果的不穩定也是比較突出的一個問題,現將多年臨床檢驗工作中所了解的關于影響血小板檢測的因素進行如下探討。

1 方法學的缺陷

目前血液分析血小板大多數采用電阻抗法進行計數,也有光散射法或其他方法,其原理大都是根據細胞的大小、形態進行區分和計數。這種檢測原理決定了對于血小板數量和形態正常的標本,結果比較可靠,但是對于血小板明顯減少或形態異常者,結果誤差就比較大。正常人的血小板體積平均分布是2～30fl,體積分布直方圖明顯地向右延伸,不對稱,即都存在一定數量的大血小板。在病理情況下,大血小板會更多增加,由于大部分血液分析儀不能將大血小板與小紅細胞進行區分,致使許多大血小板被當成小紅細胞計數導致血小板計數結果偏低。

2 儀器、試劑的因素

血液分析儀是精密電子儀器,由于測量的脈沖訊號非常小,容易受到各種因素的干擾,所以儀器應安置在一個不受振蕩、不受磁場、電場、噪聲干擾、防潮、防塵,始終保持室溫的環境中。儀器液路的定期維護清洗也至關重要,計數管路的不清潔會造成血小板數量明顯升高。試劑的質量對血小板結果也有著直接的影響,必須使用與儀器相配套的試劑[1],進口試劑價格較貴,因此使用合格的國產試劑是避免試劑因素影響血小板計數的關鍵。

3 抗凝劑因素

ICSH推薦使用EDTA鹽抗凝,含量規定為1.5～2.0mg/ml,即1.5～2.0mg的EDTA-2K抗凝1ml的全血可以抑制血小板聚集,從而達到抗凝的目的。工作中常用的是EDTA-2K的能抗凝2ml全血真空采血管,這就要求采血時盡量準確到2ml,采血量過多或過少都會影響檢測結果。如血液比例過高則抗凝劑相對不足,標本會出現微凝塊阻塞儀器檢測孔;抗凝劑比例偏高血液相對不足,血小板會腫脹崩解,產生正常血小板大小的碎片而無法得出正確的結果[2]。還有極少數人的血小板在用EDTA抗凝時出現血小板聚集,這種情況可能與血漿中存在的某些自身抗體有關,多發生在腫瘤患者自身。

4 標本采集、儲存的因素

采血過程也是保證血小板準確計數的關鍵。末梢采血時應提前充分按摩采血部位后再行采血。尤其是嬰幼兒,若方法不當,如采血速度慢、出血不暢、擠壓采血部位等,就會造成血小板假性減少。靜脈經多次穿刺而引起的水腫及皮下出血時,因組織損傷,組織凝血因子混入血液標本中產生肉眼看不見的小凝快,也可以引起血小板假性減少,此時必須重新采血測定。血液標本采集后,最好放置15～30min,因為血小板離體后,其形態立即發生變化,其外膜形成的微小管游離端向外伸展形成絲狀偽足,數個偽足相互纏繞,形成血小板可逆聚集體,其體積一般和淋巴細胞大小相似,造成血小板假性減少,隨著時間廷長,這種假生聚集就會發生解聚。

5 小紅細胞增多或巨大血小板增多的因素

當患者紅細胞大小不均、尤其是以體積＜70fl的小紅細胞居多時,部分極小紅細胞會計入血小板數,引起血小板假性增高。這種現象在使用電阻抗法原理計數的儀器中易出現,因為血小板和紅細胞是在同一個檢測系統中通過體積大小來識別,小紅細胞的脈沖信號可能被視為血小板信號而導致血小板計數假性增高,同理,當血液中巨大血小板增多時,也會使血小板計數減少。還有所謂的衛星現象,是因EDTA抗凝中血小板黏附于分葉核粒細胞表面,出現巨大血小板,所以計數時沒有包括在內,此時都應用顯微鏡重新計數血小板以保證結果的準確性。

6 樣品溶血不完全

溶血不完全對白細胞計數和分類影響較大,會使白細胞假性升高,但在實際中作中發現不但影響白細胞的計數和分類,還會影響下一例樣品和血小板計數,可能由于紅細胞碎片沖洗不徹底造成血小板假性增高,這種情況在半自動血液分析儀需手工滴加溶血劑時較易出現。

7 高鎂血癥及脂類與蛋白聚集的影響

臨床上常用MgSO4來預防控制妊高癥子癇的發作及用于治療先兆子癇。高濃度的Mg2+鎂離子有類似Ca2+的生理作用,通過改變血小板胞內cAMP水平而引起血小板聚集,造成血小板計數假性降低。脂類與蛋白的聚集體,是因為低密度脂蛋白和載脂蛋白可促進血液高凝狀態,使凝血因子活性增強,血小板聚集性增高,纖溶性降低,引起假性血小板減少。

8 疾病因素

菌血癥患者血液中的大量細菌可導致血小板計數結果增高,在多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統增殖性疾病、轉移癌、自體免疫性疾病、重度感染及某些不明疾病血漿中冷球蛋白增加或白血病、妊娠、血栓性疾病、糖尿病等血槳中冷纖維蛋白增加,可使血中非晶體物質聚集,引起血小板計數值假性增高[3],此時可將標本放置37℃水浴后計數。

以上關于血小板檢測的影響因素是在臨床工作中比較常遇到的,了解了這些因素后,在操作中就可以做到心中有數、有的放矢。遇到有問題的標本、有問題的結果,就要認真分析仔細研究,一定要讓最后發出的報告最真實的反映客觀實際,這需要在實際工作中不斷學習、探索和總結。

[1]朱蕓.不同血液分析儀試劑使用的比較[J].河北醫藥,2000,22(11):854-855.

[2]劉健.抗凝劑對血小板及其參數檢測結果的影響分析[J].國際醫藥衛生導報,2004,10(8):64-65.

[3]嚴麗華,邱方城,鄭衛東.血液細胞分析的影響因素探討 [J].國外醫學:臨床生物化學與檢驗學分冊,2005,26(9):660-661.