三聚氰胺導致分化的PC12細胞凋亡

三聚氰胺是一種在合成樹脂和塑料中常見的化學試劑，不用于食品，2008年在中國被發現作為奶粉添加劑來提高蛋白質表觀測量值水平。三聚氰胺易導致嬰兒腎臟功能障礙。但是目前有關其對中樞神經系統（CNS）的毒性研究尚少見報道。因此研究三聚氰胺對CNS的可能毒性很有必要。

本研究目的是評估三聚氰胺對已分化PC12細胞（常用的神經細胞株）的影響。以不同三聚氰胺濃度（0、33、330、990、1 980和3 300 mg/L）分別處理細胞12、24和36 h后用MTT法檢測細胞的活性，熒光顯微鏡定性觀察Hoechst 33258熒光染色后細胞核的形態，流式細胞儀檢測Annexin V/PI染色后細胞的凋亡和壞死率，最后用分光光度法檢測細胞內T-SOD水平。

MTT的結果表明三聚氰胺抑制PC12細胞的存活能力，且隨三氯氰胺濃度增大和培養時間延長，PC12細胞的存活率逐漸下降。Hoechst 33258染色顯示，用三聚氰胺培養的細胞染色質固縮，聚集于核膜，并且產生更多易染色顆粒，呈典型凋亡形態。流式細胞儀測試結果顯示，三聚氰胺引起早期細胞凋亡主要濃度范圍是33～3 300 mg/L，并呈濃度依賴性，在3 300 mg/L以下幾乎不會引起分化的PC12細胞壞死。SOD結果顯示T-SOD隨濃度增加而減少，SOD作為重要的抗氧化物質，其減少使氧化應激反應增加。

因此，三聚氰胺通過引起細胞凋亡來抑制分化的PC12細胞的增殖，并且氧化應激參與了這一過程。這項研究有助于估測三聚氰胺對神經細胞的毒性，為研究三聚氰胺及其衍生物制品的潛在毒性提供了依據。

（馬燕燕摘 楊卓審校 譯自Cell Mol Neurobiol，2011，31:65-71）