魚腥草多糖體內抗氧化活性研究

馬新方,李 勇

(1.鄭州市婦幼保健院 ,河南鄭州 450053;2.河南中醫學院,河南鄭州 450008)

魚腥草(Houttuynia cordata Thunb.)又名蕺菜、側耳根,為三白草科蕺菜屬多年生草本植物,具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋的作用,臨床上用于痰熱咳喘、熱淋等癥[1]。據文獻報道,魚腥草多糖具有較好的體外抗氧化活性,對羥自由基和超氧自由基有較明顯的清除作用[2],但有關體內抗氧化活性的報道相對較少。本研究通過研究魚腥草多糖對超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)、丙二醛(MDA)的影響,來探討魚腥草多糖的體內抗氧化活性。

1 材料與方法

1.1 動 物

50只普通級昆明種小鼠,鼠齡 2個月,體質量(20±2)g,雌雄各半,購于湖南中醫藥大學實驗動物中心,動物質量合格證號:醫動字 20001號。

1.2 藥品、試劑與儀器

魚腥草,購自河南鄭州張仲景大藥房,粉碎并過40目篩得到粗粉,密封備用。SOD、GSH-Px和MDA試劑盒,購自南京建成生物工程研究所,批號20090502;其他試劑均為分析純。島津 UV-2001型紫外可見分光光度計;METTLER AE 240萬分之一精密天平,梅特勒 -托利多上海儀器有限公司產品。

1.3 魚腥草多糖的提取

參照文獻[3],取魚腥草藥材粉末(過 40目篩) 1 kg,加 15倍量水,90℃水浴回流提取3次,每次提取3 h,過濾,合并提取液并濃縮至2 000 m L。加入95%乙醇至終濃度為 80%進行醇沉,靜置過夜,傾倒上清液,沉淀離心,依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌沉淀,沉淀,揮干乙醚,即得魚腥草多糖。

1.4 動物分組與給藥

將小鼠適應性飼養 1周后,隨機分成空白對照組、模型對照組、魚腥草多糖低劑量組(400μg/g)、魚腥草多糖中劑量組(800μg/g)及魚腥草多糖高劑量組(1 200μg/g)5組,每組10只。模型對照組和各藥物組小鼠每天頸背部皮下注射5%D-半乳糖0.5mL,空白對照組注射等量生理鹽水,每3 d稱體質量 1次。連續灌胃給藥 15 d,魚腥草各劑量組灌以相應藥物、空白對照組及模型對照組給等量生理鹽水,每天小鼠給藥0.02m L/g。

1.5 檢測指標

末次給藥后24 h,處死動物,分別取小鼠血液及肝組織(制備1%肝組織勻漿)。小鼠血清和肝組織SOD、GSH-Px及MDA測定按照試劑盒上方法進行。

1.6 統計學方法

采用SPSS 13.0統計分析軟件處理。計量資料數據以均數(BZ_139_2138_999_2156_1045)±標準差(s)表示,組間比較采用t檢驗。以 P＜0.05為差別有統計學意義。

2 結 果

2.1 魚腥草多糖對小鼠肝組織SOD、GSH-Px、MDA的影響

與空白對照組對比,模型對照組SOD、GSH-Px活力下降,MDA水平升高,差別有統計學意義(P＜0.01或 ＜0.05),提示造模成功。與模型對照組對比,魚腥草多糖高、中劑量組小鼠肝組織中 SOD和 GSH-Px活性增加,MDA水平降低,差別有統計學意義(P＜0.01或P＜0.05);魚腥草多糖低劑量組肝組織中SOD活性升高(P＜0.05)、MDA水平降低,差別有統計學意義(P＜0.05或P＜0.01),但GSHPx活性與模型對照組對比,差別無統計學意義(P＞0.05)。見表 1。

表1 各組小鼠肝組織中SOD、GSH-Px、MDA水平對比 ±s

表1 各組小鼠肝組織中SOD、GSH-Px、MDA水平對比 ±s

注:與模型對照組對比,*P＜0.05,**P＜0.01。

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2.2 魚腥草多糖對小鼠血清SOD、GSH-Px的影響

從表 2可以看出,魚腥草多糖高、中劑量組小鼠血清中SOD和GSH-Px活性提高,與模型對照組對比,差別有統計學意義(P＜0.01),而低劑量組兩指標與模型對照組對比,差別無統計學意義(P＞0.05)。

表2 各組小鼠血清中SOD、GSH-Px水平對比 ±s

表2 各組小鼠血清中SOD、GSH-Px水平對比 ±s

注:與模型對照組對比,*P＜0.05,**P＜0.01。

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3 討 論

SOD和GSH-Px是機體重要的抗氧化酶,可保護細胞膜結構和功能完整,能有效清除氧自由基,從而保護細胞免于氧化損傷。MDA是機體氧化系統和抗氧化系統失去平衡時產生的一種脂質過氧化物,是反映脂質過氧化損傷的常用指標,可與磷脂、蛋白質、核酸等形成穩定的不溶性代謝終產物,含量異常增高會引起細胞損傷?？寡趸瘎┛芍苯忧宄w內過剩自由基和脂質過氧化物(如MDA),或通過增強體內抗氧化酶(如SOD、GSH-Px)活力起增強抗氧化作用,有效地防止或減輕體內自由基所導致的氧化損傷,增強機體免疫能力,延緩衰老。本實驗結果表明,高、中劑量魚腥草多糖可以提高模型小鼠血清和肝組織中SOD、GSH-Px的活性,降低模型小鼠肝組織中MDA水平。此說明魚腥草多糖具有明顯的抗氧化作用,值得進一步研究與開發。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[M].北京:中國醫藥科技出版社,2010:208.

[2]張建新.微波提取魚腥草水溶性多糖清除自由基特性的研究[J].食品科技,2006(8):115-117.

[3]楊云,馮衛生,孟江,等.正交試驗法優選大棗渣多糖水煎煮提取工藝[J].中藥新藥與臨床藥理,2003,14(3): 200-202.