足細胞TRPC6的過度表達與誘導細胞骨架重建的關系

瞬時受體電位陽離子通道6（TRPC6）是足細胞實現濾過屏障功能的關鍵分子之一。在一些獲得性和遺傳性的腎臟疾病中常發現其足細胞上TRPC6呈過度表達，在動物模型中TRPC6的過表達能導致蛋白尿。本文探討了TRPC6的過表達對足細胞功能的影響及其在腎病中與蛋白尿的關系。

研究通過在大鼠足細胞上瞬時轉染TRPC6互補DNA（cDNA）質粒使TRPC6過表達，制成TRPC6過表達的足細胞模型。結果如下：（1）與野生型足細胞相比，轉染TRPC6質粒的足細胞收縮，足突數量明顯減少，并且nephrin蛋白表達量降低。（2）TRPC6通道的激動劑OAG能夠較大程度地增加TRPC6過表達的足細胞內Ca2+濃度，這一作用能被磷脂酶C（PLC）的抑制劑U73122所抑制。（3）在全細胞膜片鉗實驗中，OAG能夠明顯地增加TRPC6過表達足細胞的膜電流，同時使用U73122后作用消失。（4）免疫共沉淀實驗表明在TRPC6過表達足細胞中，F-actin的分布紊亂并伴隨張力纖維的消失。synaptopodin的表達降低，但α-actinin-4的表達不變。當使用U73122來抑制TRPC6通道或BAPTA-AM來清除胞內Ca2+時，這2種蛋白表達的下調被緩解。（5）本研究進一步證明，在TRPC6過表達的足細胞上，足突的收縮、F-actin分布的紊亂以及nephrin和synaptopodin表達的下調與細胞因子RhoA的激活有關。使用RhoA抑制劑Y-27632后，上述現象逐漸恢復正常。（6）由于U73122和BAPTA-AM能夠抑制RhoA的激活，因此TRPC6過表達足細胞上RhoA的激活是Ca2+依賴的，即Ca2+的增加激活了RhoA并產生了一系列異常反應。

綜上所述，足細胞上TRPC6的過度表達導致這種非選擇性陽離子通道激活，使得Ca2+內流增加，激活了Ca2+依賴的RhoA信號通路。這種異常的RhoA通路的激活進一步引起細胞骨架蛋白分布的紊亂和足突的消失，并下調2種重要分子的表達。這2種分子蛋白分別是裂孔隔膜上的nephrin和細胞骨架上的synaptopodin。因此，足細胞TRPC6的過度表達與裂孔隔膜的功能異常和蛋白尿的產生密切相關。

（楊佳佳摘 楊卓審校 譯自Exp Biol Med,2011,236:184-193）