可調控表達甲型流感病毒M2蛋白的哺乳動物細胞系的建立與鑒定

劉曉宇，郭建強，姚立紅，陳愛珺，付金奇，張智清

中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所 病毒基因工程國家重點實驗室，北京 100052

流行性感冒是由流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病。流感病毒根據核蛋白 (NP) 和膜蛋白(MP) 的抗原特性及其基因特性的不同分為甲、乙、丙三型，其中甲型流感病毒對人類的危害最大，常引起世界流感大流行。2009年爆發于墨西哥的甲型H1N1流感病毒是一種三元重配病毒，人類普遍易感，對人類生命健康造成了巨大的威脅。

流感病毒基質蛋白 2 (M2) 是流感病毒表面的一種膜蛋白，雖然在病毒顆粒中含量很少，但在病毒感染細胞的表面大量存在。M2蛋白由97個氨基酸組成，天然狀態下以同源四聚體形成離子通道，在病毒感染宿主細胞時起到降低病毒粒子內 pH值的關鍵性作用[1]。1918?2005年間，感染人的多種甲型流感病毒的M2蛋白胞外區 (M2e) 序列沒有發生明顯變化，并且其特異性抗體能降低動物感染流感的風險，因此M2e成為研制流感通用疫苗的重要侯選蛋白[2]。在評價M2e候選疫苗免疫后刺激的體液免疫水平時，常選用重組的或化學合成的抗原來檢測抗M2e抗體。但因為這些抗原與天然M2蛋白四聚體結構不盡相同，所以檢測到的抗體在流感自然感染中并不都能與天然M2蛋白特異性識別和結合[3]。有研究表明，疫苗的保護性與小鼠免疫后血清中針對真核細胞表達的 M2蛋白的特異性抗體水平相關，而與抗M2e合成肽的抗體水平不相關[4]。所以用重組 M2蛋白或化學合成的 M2e多肽評價M2e抗體的保護作用具有一定的局限性。……