淋巴細胞主動免疫治療原因不明復發性流產的效果觀察

邢志艷 譚 欣 王金旺 賈永強 高立廷

內蒙古自治區計劃生育科學技術研究所(赤峰，024000)

近年來國內各大醫療及科研單位采用丈夫或男性第三者淋巴細胞皮內注射主動免疫方法治療原因不明復發性流產(URSA)，本所采用此方法進行了治療，并觀察其臨床效果。

1 對象與方法

1.1 對象與標準

1.1.1 主動免疫組 選擇2006年6月 ～2011年1月來本所診治的URSA患者62例，均經過詳細詢問病史及系統檢查。對象平均年齡29.98(21～43)歲。2次流產31例，3次流產21例，4次流產10例。妊娠＜12周自然流產56例，妊娠≥12周流產6例。無死胎、死產及活產史。夫妻染色體正常，女性生殖道無畸型，抗人白細胞抗原I類(HLA－I)抗體檢測陰性，內分泌激素指標正常，抗精子抗體、抗子宮內膜抗體、抗心磷脂酶抗體均陰性，TORCH檢測均陰性，女方血型為O型查抗體效價。男女雙方均無生殖道感染，男性精液正常，男方無抗精子抗體。

1.1.2 對照組 同期選擇22例URSA患者作為對照組，選擇標準同主動免疫組。平均年齡29.10(22～41)歲。2次流產12例，3次流產7例，4次流產3例。妊娠＜12周自然流產18例，妊娠≥12周流產4例。再次妊娠后采用傳統保胎方法(肌注黃體酮+hCG)。

1.2 方法

1.2.1 淋巴細胞來源 淋巴細胞來自URSA患者丈夫或者第三者(男性)，檢查人免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒螺旋體、肝炎病毒為陰性。

1.2.2 主動免疫治療 無菌條件下，抽取丈夫/第三者男性外周血20ml，加入肝素10ml，生理鹽水10ml混勻，靜置30min，經淋巴細胞分離液分離淋巴細胞(離心條件:1 800r/min)，然后吸取富含淋巴細胞的白膜層，洗滌兩次(700r/min)，每次洗滌前將管內細胞輕輕搖勻以防結塊，加入適量生理鹽水，將淋巴細胞濃度調整為(20～40)×106/ml，混勻備用。在計劃妊娠前2～3個月開始注射，即吸取淋巴細胞懸液，在患者前臂內側注射6個點，每個點0.2ml，間隔3周1次，3次為1療程，治療過程中避孕。療程結束后復查HLA－I，陰性者繼續進行下一療程，直至HLA－I陽性后，鼓勵患者3個月內受孕。如獲妊娠則按上述療法追加治療1次;如未妊娠則排除其他因素引起的不育癥后，重新治療。

1.2.3 傳統保胎治療方法 確定宮內妊娠后，自妊娠5周起，肌注黃體酮 20～60mg/d·次 +hCG 1 000U 2日1次，連用1～2周。

1.3 妊娠成功指標

妊娠超過28周，B超未見異常或分娩活嬰。

2 結果

2.1 一般情況

兩組對象年齡、流產次數、流產時妊娠時間差異無統計學意義(P＞0.05)。

2.2 治療效果

主動免疫治療組62例中有48例妊娠成功(包括足月分娩39例，早產9例)，14例失敗，妊娠成功率為77.42%;而未經主動免疫治療的對照組22例中5例妊娠成功(足月分娩)，17例失敗，妊娠成功率為22.73%。兩組比較差異有統計學意義(χ2=20.854，P ＜0.05)。

3 討論

復發性自然流產(RSA)發病原因復雜，包括遺傳、內分泌、解剖、感染、自身免疫因素，但仍有50%～60%以上的患者原因不明，稱為URSA［1］。1981年Taylar對4例抗丈夫淋巴細胞抗體(APLA)陰性的URSA患者進行免疫治療，有3例成功分娩，從而引起圍生學界的廣泛關注［2］。妊娠是一種同種異體移植，正常妊娠時，因受丈夫HLA受體致敏，妻子T、B淋巴細胞產生抗HLA受體的自身抗體，它存在于妊娠期婦女血清中，可抑制針對丈夫HLA特異性抗體的淋巴細胞毒活性，抑制異體移植的排斥，使孕婦免于流產。從近代生殖免疫學觀點看來，URSA可能是由于患者對胚胎父系HLA抗原的免疫低反應性所致，即患者由于對胚胎同種異體抗原無法產生足夠的封閉抗體，而使胚胎得不到免疫防護而流產［3］。采用皮內注射丈夫/第三者男性的淋巴細胞免疫治療后，封閉抗體陽性率明顯增高，再次妊娠的患者中，封閉抗體陽性者妊娠成功率明顯高于陰性者，說明免疫治療后，封閉抗體產生增加母體免疫耐受，胎兒易于存活，妊娠成功率提高。另外，免疫治療后，部分封閉抗體陰性者妊娠也獲得成功。可能是因為主動免疫治療使這些患者誘發了由細胞免疫參與的免疫抑制，使封閉效應增強所致［4］。關于主動免疫的作用機制現在尚未研究清楚，隨著生殖醫學的發展，URSA的發病機制及主動免疫治療的機制將會得到進一步闡明。

本組62例經淋巴細胞主動免疫治療的URSA患者妊娠成功率(77.42%)，高于對照組的妊娠成功率(22.73%)，證實主動免疫方法是有效的。該方法技術簡單，成功率高。應讓患者了解主動免疫的意義、注意事項及方法等，取得患者的信任感，使患者以樂觀的態度配合主動免疫治療。

1 劉艷秋，倉娟，周萍.原因不明反復自然流產患者的主動免疫治療［J］.江西醫藥，2009，44(2):299.

2 李帶莉.30例原因不明性反復自然流產患者免疫治療的臨床分析［J］.國際醫療衛生導報，2005，11(24):39.

3 Chaichian S，Shoaes S，Sanm iA，et al.Factors influencing success Rate of leukocyte inmunization and anti－paternal antibodies in spontaneous recurrent miscarriage［J］.Am J Reprod lmmnnol，2007，57(3):169－176.

4 Komolos L，Vardimon D，Notmann J，et al.Mixed maternal－paternal lymphocyte cultures before and after immunotherapy for recurrent spontaneous abortions［J］.Am J Reprod lmmnnol，1996，35(1):30－33.