胡 梅,柴建亭,馬權輝
(1.河南農業職業學院動物科學系,河南 鄭州 451450;2.河南省靈寶市畜牧局,河南 三門峽 472500)
牛傳染性角膜炎俗稱紅眼病,是由牛摩拉氏菌(moraxella bovis)引起的眼角膜和結膜的急性炎癥,其臨床特征是羞明、流淚、結膜炎和角膜混濁。近年來,不少牛場時有發生,嚴重地影響牛場的正常生產,造成了巨大的經濟損失。報告1例牛傳染性角膜結膜炎的病例如下。
2009年4月底,河南省鄭州市中牟縣萬灘某奶牛養殖場奶牛群中大部分奶牛表現為食欲下降,羞明,流淚,眼角分泌物呈漿液性或黏稠性,觸摸眼睛有疼痛感,結膜發紅、充血、腫脹,角膜或鞏膜為淡紅至深紅色,眼瞼半閉合狀,呆立,表現有明顯癥狀的牛有122頭,發病率達56%,其產奶量總體下降,嚴重影響了該牛場的正常生產,造成了嚴重的經濟損失,遂來我院就診。
2.1 細菌形態觀察 取患病牛眼部分泌物涂片、觸片鏡檢發現有少量散在、雙鏈或短鏈,不運動﹑不形成芽孢的鏈狀革蘭陰性菌,顯微測微尺測定其大小為1.5μm~2μm ×0.8μm ~1μm 。
2.2 細菌的分離培養 取病牛眼部分泌物在營養瓊脂培養基上分離劃線,37℃,p H值為7.2~7.5,培養48 h后,觀察菌落特征。培養結果:在血巧克力瓊脂培養基上,可見圓形、半透明、灰白色、少黏稠性的溶血菌落,菌落粗糙,邊緣不整齊,有菌毛;在Muller-hinton培養基上呈灰白色、濕潤、表面光滑、邊緣整齊的圓形小菌落。
2.3 生化試驗 用待檢菌純培養物進行生化試驗。試驗結果:分離菌株的氧化酶試驗與明膠液化試驗均為陽性;糖發酵試驗、硫化氫試驗、靛基質試驗、尿素酶試驗均為陰性。
2.4 藥敏試驗 取待檢菌純培養物1 m L,用“L”型涂菌棒均勻涂布于Muller-hinton瓊脂培養基表面,用無菌鑷子按照一定的順序貼上藥敏紙片,置37℃恒溫箱溫育10~18 h后,測量抑菌圈直徑,并根據試驗結果篩選敏感藥物。結果表明,分離菌株對土霉素(27 mm)、青霉素(22 mm)、鏈霉素(20 mm)、慶大霉素(19 mm)極度敏感;對磺胺二甲嘧啶(14 mm)、氯霉素(13 mm)中度敏感;對金霉素(10 mm)的敏感度較低。
2.5 動物試驗 取健康小鼠4只,隨機分為兩組(對照組、試驗組)。對照組腹腔接種改良馬丁液體培養液0.5 m L,試驗組腹腔接種0.5 m L待檢菌純培養物,觀察小鼠發病及致死情況。接種次日試驗組小鼠表現精神委頓,食欲減退,少動或不動,第3天全部死亡,死亡小鼠外表皮膚無可見變化,剖檢可見眼結膜充血,肝臟等實質器官可分離到與接種菌一致的細菌,而對照組的小鼠均表現正常。
根據以上流行病學的調查、病牛的臨床癥狀、細菌分離、生化試驗和動物試驗結果可綜合判斷本次牛患的是由牛摩拉氏菌感染引起的牛傳染性角膜結膜炎。
3.1 治療方案 根據該牛場實際情況,將病牛集中隔離飼養,嚴格消毒牛舍,避免日光、塵埃和昆蟲對病牛眼部的刺激。為了不影響牛乳的質量,盡量減少抗生素的使用,采用了以下綜合治療方法。
3.1.1 西藥局部處理 采用0.1%硼酸液沖洗患眼,清洗眼分泌物,同時眼結膜下注射青霉素G 30萬IU,每日1次,連注3 d,在此治療期間停采牛乳;氯霉素眼藥水點眼,每日3~4次,連用至痊愈;嚴重病例,患眼滴加5%硝酸銀溶液,以防角膜穿孔。
3.1.2 順氣孔插枝療法 即用約20 cm長(火柴棍粗細)的剝皮柳樹條(其他柔韌挺直光滑枝條亦可),酒精消毒,插入病牛順氣孔(即上頜齒板切齒乳頭兩側的小孔)至底,將多余部分枝條在距孔緣1~2 cm處折斷。枝條插入后,不用取出,病愈后會自行脫出。同時,每頭每日喂土霉素片2 g輔以治療。
3.1.3 外科手術 對角膜潰瘍的牛只,采用眼瞼暫時完全縫合術。用不吸收合成線4~6針結節水平、褥狀全層縫合。
3.2 治療效果 經過上述治療,72 h后觀察表明,全部病牛停止流淚,結膜腫脹消失。角膜白斑消失者72頭,占治療病牛的60%;其他病牛白斑亦顯著減小。連續治療7 d后,100頭痊愈,20頭基本痊愈,有2頭嚴重病牛也略見好轉,角膜潰瘍部由肉芽組織開始填充愈合,角膜渾濁減輕,體溫恢復正常,食欲明顯增強,產奶量也逐漸回升。治愈率達98.36%。
4.1 關于本病的發病學機理目前尚未完全清楚。據資料報道,致病性摩拉氏菌的菌毛與溶血有關。在流行時,溶血株的分離率高,毒力強,溶血毒對牛嗜中性粒細胞會產生一定的毒性作用。細菌產生的一種皮膚壞死毒素,接種到犢牛角膜內,能產生與紅眼病相同的角膜病變。牛摩拉氏菌感染眼睛,其所產生的趨化因子,激發嗜中性粒細胞和其他炎性防御反應,引起嗜中性粒細胞大量浸潤,并釋放較多的膠原酶,從而助長了角膜基質的破壞。
4.2 從藥敏試驗結果看,治療應首選土霉素,青霉素也有較好的療效,但從實際生產出發,我們采用了綜合療法。順氣孔插枝療法對機體產生一種良性雙相調整作用,對治療疑難病癥有特殊療效。神經系統是插枝治療主要作用基礎,犁鼻器、鼻腔嗅區黏膜均分布有大量嗅覺神經細胞,嗅神經細胞以其軸突與大腦相連;三叉神經分枝主要分布在鼻中隔,甲骨,硬腭及舌上面,插枝的刺激作用可通過這些神經細胞傳遞至中樞神經,在中樞神經系統的調節作用下,在體液和經絡的參與下,激發機體抗病防衛生理機能,增強機體的自動調節功能。治療結果表明,本治療方案實用快捷、療效顯著,治愈率達98.36%,且大大減少了抗生素用量,保證了牛奶的品質。
4.3 本病發生后一般在強烈的紫外線照射下才能產生典型的癥狀。所以,筆者認為,治療該病時,除及時發現并隔離治療病牛外,避免強烈陽光照射也是一項重要的防治措施。