金黃色葡萄球菌的檢測分析

曲 林

（吉林省農安縣人民醫院檢驗科，吉林 農安 130200）

金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）是可引起多種嚴重感染的一種重要病原菌，隸屬葡萄球菌屬（Staphylococcus）[1]。據路透社2005年7月15日報道，美國研究人員，大量實驗發現金色的細菌比其它無色細菌更具殺傷力。全世界每年有上千萬人死于葡萄球菌感染。在第二次世界大戰之前尤為嚴重[2]。后來科學家用發明的抗生來治療葡萄球菌的感染。直到80年代起，抵抗抗生素的菌株不斷出現，致使特效的藥物失靈[3]。一方面由于金色葡萄球菌是人體內最常見的細菌，被1/3的人口攜帶，它能夠導致一系列疾病，也是主要的醫院感染源。另一方面發現，金色葡萄球菌能夠輕易地與其他葡萄狀球菌交換基因，并能在很短的時間里重新獲得更大抵抗抗生素的能力。因此對其深入專業的研究將會給全人類帶來了巨大的福祉。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

隨機選擇2002年1月至2010年1月診治的435例金黃色葡萄球菌患者的各類臨床標本，包括痰液、膿液、尿液、血液、泌尿生殖道分泌物等。

1.2 菌株分離與鑒定

所采用的435例菌株均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》對其進行培養、分離、鑒定。

1.3 紙片擴散法的藥敏檢測試驗

①培養基：凍干血漿、特定瓊脂等適合葡萄球菌生長的適宜培養基，使其良好生長，更好的進行試驗。②藥敏紙片的選擇：萬霉素、利福平、頭孢哌酮、丁胺卡那素、頭孢唑林、 慶大霉素、 環丙沙星、青霉素G。以上的藥物必須在保質期內使用，確保結果的準確性與科學性。③質控菌液、被檢測菌：首先選取在純培養平板上生長的菌落，再用準備好的無菌生理鹽水調節被選中的菌液濃度，使用與麥氏比濁管0.5的比濁相同。菌落計數相當于1.5×108/mL。④試驗操作：按照每張紙片都不少于29mm，紙片的中心距離平板不能少于18mm，將藥敏紙片用無菌鑷子夾起平貼于涂有菌液的培養基表面。⑤判斷藥敏的標準：參照國家臨床實驗室標準化正確無誤的讀取結果。

2 藥敏試驗結果

2.1 2002年1月至2010年1月的八年來，從臨床選擇的435例金黃色葡萄球菌培養的菌株中，耐甲基西林金黃色葡萄球菌為170株，占25.6%。甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株數為265，占總菌數的60.9%。①2002年1月至2010年1月的耐甲基西林金黃色葡萄球菌菌株分別為15、13、19、20、26、27、25、25。②2002年1月至2010年1月甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株數菌株分別為25、23、23、38、24、39、41、37。③耐藥率分別為26.5%、26.7%、37.4%、33.9%、42.1%、41.5%、47.8%、48.9%。

2.2 金黃色葡萄球菌對萬霉素、利福平、頭孢哌酮、丁胺卡那素、頭孢唑林、 慶大霉素、 環丙沙星、青霉素G的敏感率分別為99．5%、978%、77.8%、77.8%、70.1%、59.7%、2.1%。

3 討 論

金黃色葡萄球菌是球菌中革蘭陽性菌的一種最典型代表。它可以被結晶紫初染，碘液媒染，乙醇處理，沙黃（紅色）復染后呈現紫紅色。革蘭陽性菌是由細胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸組成[4]。由于其肽聚糖的網狀結構比革蘭陰性菌致密，造成了不同革蘭陰性菌呈現紅色的染色結果。

典型的金黃色葡萄球菌對其所需的生長條件要求一般，為需氧或兼性厭氧，普通培養基便可使其良好生長。在最適溫度37°C，pH7.4的干燥環境中即可存活數周的時間[5]。由于其較強的生長力和近年來抗生素的廣泛應用，耐甲基西林金黃色葡萄球菌被檢出率呈逐年上升的勢態。八年來從隨機的檢測結果中就可以看出其耐藥性的不斷攀升，所呈趨勢不容樂觀。所被檢測的地區的1985年至1986年的耐甲基西林金黃色葡萄球菌的分離率為26%，1993年至1994年的分離率上升至61%，1999年至2004年的分離率平均到達88.4%，較比1994年提高近27.4%，從這幾組百分率的比中我們不難看出問題的嚴重性。2007年至2010年的分離率則更是達到93.2%。本院處于經濟尚未發達，交通仍不十分發達的縣城，在此處情況已經不夠樂觀，尚且不用說經濟與人文發達的沿海等大眾城市的形勢會如何了，一定會更加的突出。

葡萄球菌病主要是由金黃色葡萄球菌引起的一種急性或慢性傳染病。在臨床上常可以表現為多種類化膿，由于此類疾病的特殊性給人們帶去巨大的痛苦[6]。內臟器官感染如肺炎、膿胸、腦膜炎、等各種嚴重的病癥，隨時奪去人們的生命。葡萄球菌可通過多種途徑侵入機體，導致皮膚或器官的多種感染，甚至敗血癥。新生兒各種的技能尚未發育完全，機體防御能力低嚴重受損時表皮葡萄球菌也可引起嚴重敗血癥。皮膚軟組織感染主要有癤、癰、毛囊炎、麥粒腫傷口管的患者，切除前列腺的患者尤多見于。主要是因為大多菌株可以分解尿素和新生霉素的耐藥因素導致。金葡菌可致急性化膿性骨髓炎，兒童及男性多見，可為血源性感染，亦可繼發于外傷或化膿性關節炎，致殘率極高。葡萄球菌尚還可以引起肝、脾、腎膿腫，腎周圍膿腫等臟器疾病。

自青霉素在上世紀對治療金黃色葡萄球菌發揮的巨大的作用起，到80年代的耐藥菌株的被發現，都在表明耐藥性的不斷提高。在增加治療難度的同時，也在提醒著我們醫療工作者們一個不可忽視的嚴峻問題;廣泛的抗生素應用只會導致“濫用”。其用意是好的，但其結果卻是事倍功半。所以我們要徹底改變普通的用藥習慣，而是應該認真謹慎的，在不充分把握的情況下進行金黃色葡萄球菌的檢測與分析，用科學來指導合理的用藥原則。尤其是基層醫生更要對其理解掌握。對實際的臨床治療具有的指導重要意義。影響也將必定是深遠的。金黃色葡萄球菌的檢驗還可以應用3M快速金黃色葡萄球菌數測片或者是TD5A-WS臺式低速離心機等多種方法進行檢測。例如應用1TD5AWS臺式低速離心機其檢測，檢測結果也較準確，但由于相對費用較昂貴，需要一定的技術和條件，不宜推廣。而紙片擴散法簡單易行、準確、經濟，尤其適用于基層醫院經金黃色葡萄球菌感染的檢測。

綜上所述，通過對金黃色葡萄球菌采用紙片擴散法檢測可進行檢測，可以準確、安全的選擇用藥，降低耐藥性的發生率。有益于為千千萬萬的患者解除其病痛。值得在基層醫院金黃色葡萄球菌的感染中推廣應用。

[1] 劉曉霞,劉蓬蓬,孫運波.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染的危險因素分析[J].齊魯醫學雜志,2009,24(5):447-450.

[2] 德忠,周文聰,饒冠利.膿毒癥患者病原菌分布及耐藥性分析[J].中國衛生檢驗雜志,2010,20(2):321-324.

[3] 白莉,李衛杰,王軍花.127種葡萄球菌對抗生素的分析[J].華北國防醫藥,2007,19(1):55.

[4] 崔自慧.細菌耐藥性臨床分析[J].中國醫藥導報,2010,7(7):116-117.

[5] 朱佩瓊,裘云慶.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥機制的研究近況[J].國外醫學流行病學.傳染病學分冊,2004,31(5):55.

[6] 陳亮,方平.臨床標本分離細菌耐藥性監測分析[J].安徽醫藥,2004,8(3):206-207.