鹽酸昂丹司瓊氯化鈉注射液處方工藝控制研究

李 潔，黃桂華，崔美蘭，邵義紅，王麗華

(1.山東大學藥學院，山東濟南250012;2.山東齊都藥業有限公司，山東淄博255400)

鹽酸昂丹司瓊(ondansetron hydrochloride)作為一類抗腫瘤輔助用藥，為高選擇5－羥色胺受體阻斷劑，臨床上主要用于腫瘤放療、化療以及手術治療所引起的嘔吐［1］，鹽酸昂丹司瓊已明確的主要微量雜質包括:1，2，3，4－四氫－9－甲基－4 H－咔唑酮(中間體I)、9－甲基－3－(二甲胺基)甲基－1，2，3，9－四氫－4 H－咔唑－4－酮鹽酸鹽(中間體Ⅱ)、1，2，3，9－四氫－9－甲基－3－亞甲咔唑酮(雜質Ⅲ)［2］。生產過程中發現該產品可見異物和滅菌后的有關物質受pH值影響較大，產品滅菌后有明顯變化的雜質峰出現。直接接觸藥液的包裝材質不同，貯存過程中會出現沉淀;臨床使用過程中與pH值大于5.7的藥液配伍會發生沉淀反應［4］。為此，我們對鹽酸昂丹司瓊氯化鈉注射液生產工藝進行研究，考察最佳的pH值控制范圍，直接接觸藥液的包裝材料，滅菌參數，儲存條件等，以減少生產和儲存過程中藥物的降解，提高產品質量，為該藥物的質量控制參數提供依據。

1 儀器與試藥

PHS－3C型pH計(上海精科雷磁儀器廠)，BS110S電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司)，SPX智能生化培養箱(寧波江南儀器廠)，ZWF－J6激光注射液微粒分析儀(天津市天河醫療儀器有限公司)，YB－2澄明度檢測儀(天津藥典標準儀器廠)，WD－B藥物穩定性檢查儀(天津藥典標準儀器廠)，600－717－2414型Waters高效液相色譜儀(美國Waters公司)。

鹽酸昂丹司瓊氧化鈉注射液樣品(山東齊都藥業有限公司)，活性炭(上海活性炭廠)。

2 方法與結果

2.1 處方 鹽酸昂丹司瓊(二水合物)8 g，氯化鈉900 g，注射用水適量，溶解定容至100 L。

2.2 生產工藝

2.2.1 制備工藝 在配制罐中加入適量注射用水，加入氯化鈉，加入適量1 mol·L－1稀鹽酸調節pH值在3.5～5.5范圍內，于攪拌下加入處方量的鹽酸昂丹司瓊，溶解后，加入已預先潤濕的活性炭，攪拌吸附10 min后，檢驗pH值、含量，精濾、灌裝。灌裝好的產品于121℃水浴滅菌15 min，燈檢，包裝。

2.2.2 檢測方法 照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版二部附錄V D)測定［3］。

鹽酸昂丹司瓊:色譜條件與系統適用性試驗用氰基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02 mol·L－1磷酸二氫鈉溶液(用氫氧化鈉溶液調節pH至5.4)－乙腈(50∶50)為流動相，檢測波長310 nm。理論塔板數按鹽酸昂丹司瓊峰計算，應不低于2 000。

測定法:精密量取本品適量，加流動相稀釋制成每1 mL中約含昂丹司瓊80 μg的溶液，精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖;另取鹽酸昂丹司瓊對照品，精密稱定，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。

有關物質檢測方法:本品適量，加流動相制成每1 mL中約含80 μg的溶液，作為供試品溶液;精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。除檢測波長為216 nm外，照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液10 μL注入液相色譜儀，調節儀器檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10%～15%，再精密量取供試品溶液與對照溶液各10 μL，分別注入色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的4倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質峰，各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%)。

2.3 產品控制參數的篩選

2.3.1 調節劑選擇及用量的確定 本品主要有效成分為鹽酸昂丹司瓊，因其助溶基團為鹽酸基，制備注射液時加入稀鹽酸來調節pH值，使制劑中不再引入其他成分，保持制劑的穩定性。

2.3.2 pH值控制范圍的篩選 pH值篩選試驗:鹽酸昂丹司瓊氯化鈉注射液pH值范圍為4.5～6.5(鹽酸昂丹司瓊氯化鈉注射液質量標準YBH01592003)，參照其pH值范圍，按處方配制一定量的藥液，分別用10%鹽酸溶液和10%氫氧化鈉溶液調節pH值至3.5、4.5、5.5、6.0、6.3左右后灌裝50瓶(中性高硼硅玻璃瓶包裝)，每個pH值條件留樣2瓶，剩余樣品121℃，12 min滅菌。比較不同pH值條件下，樣品滅菌前后性狀、pH值、含量、有關物質等指標變化情況。根據試驗結果選擇最佳pH值控制范圍。試驗結果見表1。

表1 pH值范圍的篩選試驗結果

分析:隨著藥液pH值的升高，特別是pH值大于5.8以后，樣品變渾濁。取樣檢測，有關物質及含量。將渾濁的藥液加入稀鹽酸溶解至澄清狀態，取樣檢測。檢測結果見表2、3、4。

表2 不同pH值范圍的有關物質檢測結果(%)

分析結論:隨著藥液pH值的升高，在調節pH值5.5以上時，藥液滅菌后有關物質檢測色譜圖上在保留時間4 min左右有明顯的新雜質峰出現，該雜質峰隨pH值的升高呈明顯上升趨勢，成品pH值5.8的樣品其有關物質已超出限度。

表3 不同pH值范圍的鹽酸昂丹司瓊含量檢測結果(%)

分析結論:隨著pH值的升高，鹽酸昂丹司瓊溶解度呈明顯下降趨勢，含量偏低。

表4 復溶后的鹽酸昂丹司瓊注射液含量及有關物質檢測結果

由試驗結果可知:各個pH值條件的樣品滅菌后與滅菌前相比pH值均有不同程度的升高，但有滅菌前半成品pH值越高，滅菌后pH值升高幅度越大的趨勢。另由表2、表3統計結果可知:隨著pH值的升高，樣品中鹽酸昂丹司瓊含量呈下降趨勢，滅菌后有關物質呈上升趨勢。

表4結果顯示，即隨著pH值的升高，鹽酸昂丹司瓊的溶解度降低，原先已溶解的主藥析出結晶，含量下降，有關物質增加。但復溶后原料重新溶解，含量與初始配制液吻合。但有關物質稍有增加。

2.3.3 直接接觸藥液包裝材料的選擇 分別采用普通鈉鈣玻璃瓶、高硼硅玻璃瓶、中性高硼硅玻璃瓶、非PVC包裝，注射液pH值控制在5.0和5.5，40℃加速條件放置1個月后室溫放置6個月，檢測外觀、pH值、含量、有關物質，檢測結果如表5。

表5 穩定性考察的鹽酸昂丹司瓊注射液含量及有關物質檢測結果

分析:普通鈉鈣玻璃瓶含有過多的玻璃堿或對水的抵抗力不強時，經熱滅菌或長期儲存后將顯著增加注射液的pH值，導致昂丹司瓊析出結晶。

2.3.4 滅菌參數選擇 由鹽酸昂丹司瓊的化學性質及結構可知，本品對滅菌溫度有一定的敏感性，主要體現在滅菌后產品有關物質增高，我們分別按制備工藝制備了3批樣品，批號100901、100902、100903，三批產品各取50瓶，采用121℃、12 min條件滅菌，剩余樣品115℃、30 min滅菌，滅菌結束后按本品含量測定和有關物質測定項下方法測定有關物質及主藥含量，對比滅菌條件對產品造成的影響，結果如表6。

表6 不同滅菌條件對有關物質及鹽酸昂丹司瓊含量的影響

分析結論:121℃、12 min滅菌條件較115℃、30 min滅菌條件劇烈，產品有關物質增高，但檢測結果均合格。為增加無菌保證值，因此首選滅菌參數是121℃、12 min，F0≥12的過熱滅菌條件。

2.3.5 影響因素試驗 影響因素試驗在較為激烈的條件下進行的。其目的探討藥物的固有穩定性，了解影響其穩定性的因素及可能的降解途徑與降解產物，為制劑生產工藝、包裝、貯存條件和建立降解產物分析提供科學依據。

取樣品(批號:100901)，于低溫(4℃)和高溫(60℃)及光照，照度為(4500±500)lx條件下考察10 d，于第5、10天取樣，考察其性狀、可見異物、pH值、含量、有關物質是否有明顯變化，試驗結果見表7。

表7 影響因素試驗結果

由試驗結果可知，本品在光照(4500±500)lx、低溫4℃和高溫60℃條件下放置10 d后，光照條件下有關物質略有升高，其性狀、可見異物、含量均無明顯變化，故本品應避光密閉條件下保存。

2.3.6 低溫凍融試驗 由于本品在水中溶解度較低(略溶)，故儲存過程中易析出片狀結晶。我們進行低溫凍融試驗，考察試制樣品的穩定性。取樣品(批號:100901)分別于－15℃條件下放置2 d，然后于40℃條件下融化并放置2 d，而后檢查樣品性狀、可見異物、pH值，如此反復循環共3次。試驗結果見表8。

表8 凍融循環試驗結果

由試驗結果可知:凍融試驗前后，監測的各項指標均無明顯變化，但低溫析出結晶，建議常溫保存。

3 討論與結論

3.1 討論

3.1.1 通過pH值調節劑及范圍的選擇實驗結果可以看出，pH值大小對鹽酸昂丹司瓊溶解度影響較大，當pH值較高時，鹽酸基與氫氧化鈉發生反應，昂丹司瓊游離，溶解度減小，易析出結晶。

3.1.2 直接接觸藥品的包裝材料材質對產品影響極大，當玻璃瓶內壁保護膜退落后，玻璃中含有過多的玻璃堿，在貯存過程中可增加注射液的pH值，導致昂丹司瓊析出結晶。

3.1.3 低溫凍融試驗結果表明，低溫易析出結晶，需2次加熱溶解，增加了產品質量風險，因此注射劑要避免低溫放置。

3.1.4 通過穩定性及影響因素的考察結果表明，該產品室溫放置過程各質量指標無明顯變化，產品質量穩定。

3.2 結論 通過pH值調節劑及范圍的選擇、包裝材料的選擇、滅菌工藝的選擇、影響因素、低溫凍融等試驗結果表明，生產過程中發現該產品可見異物和滅菌后的有關物質受pH值影響較大，不同的pH值控制條件，產品滅菌后有明顯變化的雜質峰出現。貯存過程中會出現沉淀。為此，采用鹽酸調節pH值;半成品pH值控制在3.5～5.5之間;采用中、高硼硅玻璃瓶和非PVC包裝，過熱滅菌的制備工藝能夠得到穩定優質的產品。產品避光保存，更利于保證質量。

［1］ Wilde MI，Markham A.Onlansetron.A review of its pharmacology and preliminary clinical findings in novel applications［J］.Drugs，1996，52(5):773－794.

［2］ 馮茹，費紹芳，楊蓓蓓，等，HPLC/DAD/MS法測定鹽酸昂丹司瓊及其3種微量雜質［J］.藥物分析雜志，2010，30(3):499－503.

［3］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:731－732.

［4］ 馮國旗.中西藥注射劑配伍變化［M］.北京:軍事醫學科學出版社，2005:3.

［5］ 張春紅，張曉穎，張秀華.常見藥物及液體配伍問題［J］.護理研究，2006，20(6):1563－1564.