不完全抗體交叉配血方法的比較觀察

項(xiàng)嘉亮 黃偉剛 賴金養(yǎng)

（廣東省江門市人民醫(yī)院，廣東 江門 529000）

近年來(lái)隨著醫(yī)學(xué)水平的不斷發(fā)展，對(duì)于輸血安全的程度也在逐步的提高，避免由于不完全抗體引起輸血反應(yīng)，危及患者生命安全，成為江門市人民醫(yī)院研究的熱點(diǎn)問(wèn)題[1,2]。本研究通過(guò)對(duì)江門市人民醫(yī)院交叉配血情況進(jìn)行觀察和分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取江門市人民醫(yī)院2008年1月至2009年1月輸血科120例接受輸血患者作為觀察對(duì)象，所有患者均在知情同意的情況下，參與本次調(diào)查，選取抗D、抗E、抗C、抗c抗體通過(guò)抗人球蛋白法、膠體促凝劑法、凝聚胺法敏感度分別測(cè)定。

1.2 儀器與方法

1.2.1 材料與儀器

人源血清抗D、抗E、抗C、抗c抗血清，用生理鹽水倍比稀釋人源血清抗D、抗E、抗C、抗c，每管中加入相應(yīng)的譜細(xì)胞2滴，混勻。分別通過(guò)四種不同試劑分別測(cè)定不同滴度的抗血清。

1.2.2 所有操作規(guī)程均按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》嚴(yán)格執(zhí)行。①凝聚胺法：向各個(gè)管中加入0.6mL低離子介質(zhì)，混勻，放置1min，向管中加入2滴凝聚胺應(yīng)用液，混勻，靜置15s，3000r/min，離心15s，倒掉上清液，輕搖，直到肉眼可見(jiàn)明顯凝集狀，加入重懸液2滴，輕搖，進(jìn)行結(jié)果判定：陰性：無(wú)凝集者；陽(yáng)性發(fā)生凝集反應(yīng)者。②膠體促凝劑法：向各管中加入2滴膠體促凝劑，離心3000r/min，1min，加入3滴生理鹽水進(jìn)行輕搖，進(jìn)行結(jié)果判定：陰性：無(wú)凝集者；陽(yáng)性發(fā)生凝集反應(yīng)者。③抗人球蛋白法：向標(biāo)記好的微孔內(nèi)加入50μL不同滴度的抗血清，每管加入相應(yīng)的譜細(xì)胞50μL，在37℃孵育15min，專用離心機(jī)離心5min，進(jìn)行結(jié)果判定：陰性：紅細(xì)胞完全沉降在凝膠管底部者；陽(yáng)性：紅細(xì)胞的凝集塊在凝膠表面或者凝膠中者。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察不完全抗體交叉配血方法靈敏度的對(duì)比情況。

2 結(jié) 果

觀察不完全抗體交叉配血方法靈敏度的對(duì)比情況（表1）。

凝聚胺法在不同抗體交叉配血方法中靈敏度明顯高于抗人球蛋白法、膠體促凝劑法，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 觀察不完全抗體交叉配血方法靈敏度的對(duì)比情況

3 討 論

近年來(lái)，隨著交叉配血應(yīng)用的不斷更新和發(fā)展，因ABO同型交叉配血不合引起輸血事故時(shí)有發(fā)生[3]。為了更進(jìn)一步確保輸血安全，減少由于不完全抗體引起的輸血反應(yīng)，為探討快速、靈敏的不完全抗體配血法，提供可靠的理論依據(jù)。本研究通過(guò)對(duì)江門市人民醫(yī)院不完全抗體幾種交叉配血方法，進(jìn)行分析。一般情況下，紅細(xì)胞表面有大量的負(fù)電荷存在，彼此之間相互排斥，但是當(dāng)不同類型不完全抗體誘導(dǎo)紅細(xì)胞出現(xiàn)聚集反應(yīng)時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)輸血反應(yīng)，威脅患者的生命安全。紅細(xì)胞聚集主要有兩條途徑，其一是通過(guò)紅細(xì)胞表面抗體某種變化，縮短紅細(xì)胞之間的距離，其二是在兩個(gè)紅細(xì)胞抗體之間架橋，誘導(dǎo)紅細(xì)胞發(fā)生聚集。根據(jù)紅細(xì)胞聚集原理，應(yīng)用不同方法，進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。常用的方法主要有菠蘿酶法、抗人球蛋白法、膠體促凝劑法、凝聚胺法。其中菠蘿酶法因耗時(shí)較多，主要應(yīng)用于特殊情況，本研究中不用于觀察。本研究分別通過(guò)不完全抗體分別應(yīng)用凝聚胺法、膠體促凝法、抗人球蛋白法進(jìn)行觀察。其中凝聚胺法主要是利用低離子介質(zhì)降低溶液的離子強(qiáng)度，進(jìn)而減少紅細(xì)胞周圍的陽(yáng)離子云，促進(jìn)血清中帶有正電荷的IgG抗體和紅細(xì)胞帶負(fù)電荷的抗原相結(jié)合，從而提高和紅細(xì)胞攝取抗體的速率，另外加入帶有大量正電荷高價(jià)陽(yáng)離子的多聚物-凝聚胺溶液，中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，形成非特異性聚集，使IgG型抗體直接凝集紅細(xì)胞。加入中和液后，僅由凝聚胺引起的非特異性聚集，會(huì)因電荷中和而分散，而由抗體介導(dǎo)的特異性凝集則不會(huì)分散。膠體促凝法是通過(guò)膠體促凝劑如魚(yú)精蛋白、聚乙二醇及草酸鹽等進(jìn)行的，其中魚(yú)精蛋白產(chǎn)生的陽(yáng)離子和紅細(xì)胞表面的陰離子結(jié)合，縮短了紅細(xì)胞之間的距離，聚乙二醇促進(jìn)反應(yīng)物碰撞和形成免疫復(fù)合物，從而提高反應(yīng)敏感度。抗人球蛋白是檢測(cè)不完全抗體常用的方法。凝聚胺法在不同抗體交叉配血方法中靈敏度明顯高于抗人球蛋白法、膠體促凝劑法。另外有研究表明，凝聚胺法不僅能檢測(cè)IgM抗體，又能檢測(cè)IgG抗體，可以解決急診輸血安全性的問(wèn)題。本研究通過(guò)選取抗D、抗E、抗C、抗c抗體通過(guò)抗人球蛋白法、膠體促凝劑法、凝聚胺法敏感度分別測(cè)定，結(jié)果表明，凝聚胺法在不同抗體交叉配血方法中靈敏度明顯高于抗人球蛋白法、膠體促凝劑法。綜上所述，凝聚胺法檢測(cè)不完全抗體敏感性較高，操作簡(jiǎn)便、快速，值得臨床推廣應(yīng)用。

[1]王雪明,虞秀蘭,劉冬梅,等.微柱凝膠試驗(yàn)交叉配血在臨床輸血中的應(yīng)用[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2005,23(4)：318-320.

[2]王俊濤,朱文克,付雪霞,等.不完全抗體交叉配血方法的比較[J].臨床醫(yī)學(xué),2010,30(3)：109-110.

[3]段佳慧,趙拉呱.多凝集紅細(xì)胞合并不完全抗體臨床分析[J].西南軍醫(yī),2007,9(2)：74.