噴昔洛韋原位膠化滴眼液的制備與質量控制

李軍，楊惠玲

(鄭州大學第一附屬醫院藥劑科，450052)

噴昔洛韋(penciclovir)是英國SKB公司開發的開環核苷類抗病毒藥物，是無環核苷活性衍生物，是伐昔洛韋的活性代謝物。有抗單純皰疹病毒 HSV-Ⅰ，HSV-Ⅱ，帶狀皰疹病毒等的作用，它的作用機制與阿昔洛韋相似。與阿昔洛韋比較，其抗病毒效果顯著，是一種抗病毒譜較廣的藥物［1］。主要用于治療單純皰疹病毒引起的感染，也可用于治療帶狀皰疹病毒感染。噴昔洛韋同類藥物的眼用凝膠劑治療病毒引起的皰疹性角膜炎、眼瞼單純皰疹、病毒性角膜炎及流行性結膜炎等，均有較好療效［2-3］。筆者研制了噴昔洛韋原位膠化滴眼劑并制訂質量標準。

1 儀器與試劑

高效液相色譜儀(美國Dionex P680);UV-754紫外分光光度儀(上海第三分析儀器廠);噴昔洛韋(麗珠集團常州康麗制藥有限公司，批號:061208);噴昔洛韋對照品(由原料藥精制所得，含量＞99.5%);海藻酸鈉(青島膠南明月海藻化工有限公司 ，批號:061113);硼酸(青海制藥廠有限公司，批號:060521)，其余試劑均為藥用規格或分析純。水為注射用水。

2 處方與制備

2.1 處方 噴昔洛韋2 g，海藻酸鈉10 g，硼酸18 g，5%羥苯乙酯醇溶液10 mL，注射用水加至1 000 g。

2.2 制法 稱取海藻酸鈉 10 g，加入注射用水200 mL，水浴加熱，攪拌使溶解;另取噴昔洛韋2 g，硼酸18 g，用適量注射用水溶解，攪拌加入尼泊金乙酯醇溶液(必要時加熱)，混勻。在迅速攪拌下將噴昔洛韋溶液緩緩加入制備好的海藻酸鈉溶液中，攪拌至澄清，以0.1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液調 pH 至5.0 ～7.0，混勻，抽濾，經濾器加注射用水至全量，以100℃流通蒸汽滅菌30 min，無菌分裝，即得。

3 質量控制

3.1 性狀 本品為無色澄明液體，pH為5.0～7.0，其他符合滴眼液項下規定［4］。

3.2 鑒別 取噴昔洛韋原位膠化滴眼液適量(相當于噴昔洛韋10 mg)，加水20 mL，置水浴中加熱使溶解，過濾，濾液中滴加氨制硝酸銀試液數滴，即產生白色沉淀。參照高效液相色譜法［3］操作，樣品主峰保留時間與噴昔洛韋對照品峰保留時間一致，均為8.282 min。

3.3 含量測定

3.3.1 色譜條件 固定相:Diamonsil C18色譜柱(4.6 mm× 250 mm，5 μm); 流 動 相: 甲 醇20.01 mol·L-1磷酸二氫鉀緩沖液(用三乙胺調 pH至7.0)(10∶90);檢測波長:252 nm;進樣量:20 μL;理論塔板數按噴昔洛韋峰計算應≥2 000。

3.3.2 標準曲線的繪制 精密稱取干燥至恒重的噴昔洛韋對照品50 mg，置于100 mL量瓶中 ，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 1.0，5.0，10.0，15.0，20.0 mL 分別置 100 mL 量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，進樣20 μL，照高效液相色譜法測定峰面積，記錄色譜圖，將峰面積(Y)對噴昔洛韋濃度(X)進行回歸處理，得回歸方程:Y= －7 627.76X+60 800.52，r=0.999 7。結果表明噴昔洛韋濃度在 5.00～100.00 μg·mL-1范圍內線性關系良好。

3.3.3 溶液穩定性實驗 取“3.3.2”項下溶液1份(50 μg·mL-1)，分別在 0，1，2，4，6，8 h 進樣 20 μL，照高效液相色譜法測定峰面積，結果樣品在8 h內穩定，峰面積的RSD=0.91%。

3.3.4 精密度實驗 取“3.3.2”項下溶液(50 μg·mL-1)，進樣量20 μL，連續進樣 5 次，測得峰面積RSD=0.51%。

3.3.5 回收率實驗 模擬處方配制高、中、低3種濃度，每種濃度取樣3次。精密稱取不同濃度的噴昔洛韋和輔料適量，置100 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻、過濾。精密量取續濾液10 mL，置100 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。進樣20 μL，照高效液相色譜法測定峰面積，計算回收率。結果平均回收率97.12%，RSD=1.84% ，見表 1。

表1 噴昔洛韋回收率實驗結果 μg·mL-1

3.3.6 樣品含量測定 精密稱取噴昔洛韋原位膠化滴眼液適量(相當于噴昔洛韋50 mg)置100 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻、過濾。精密量取續濾液10 mL，置100 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。進樣20 μL，照高效液相色譜法測定峰面積，測定含量。結果批號為090522，081019，081221的樣品，含量分別為標示量的 98.62%，97.79%和 99.17%。

4 穩定性實驗

取包裝完好，于室溫避光條件下放置12個月的樣品，批號:071221，080109，080118 ，觀察其外觀顏色無變化;參照含量測定項下 ，結果含量為標示量的99.06%。結果表明本品性質穩定。

5 刺激性實驗

取健康成年家兔5只(由河南中醫學院實驗動物中心提供，合格證號:SCXK-2008-0015)，體質量(2.5±0.5)kg，每只均于右眼滴入噴昔洛韋原位膠化滴眼液1滴，左眼滴入0.9%氯化鈉溶液1滴作對照，tid，每次用藥后觀察家兔躁動，眼部充血、紅腫、流淚、羞明、分泌物等現象。連續用藥2周后將家兔處死，取眼部組織作病理切片檢查，未發現任何病理變化。

6 討論

傳統的滴眼劑往往是一種藥物的溶液劑，給藥后，由于眼瞼的快速眨動和結膜囊內淚液不停地分泌，導致滴眼劑通過鼻淚管迅速排除，造成滴眼劑的生物利用度低(往往＜1%)［5］。眼部原位膠化給藥系統就是將藥物以水溶液的形式給藥，在滴入眼時，受到溫度、pH或離子強度的影響，迅速形成凝膠，減少給藥次數，延長藥物作用時間和具有較好的流變學性質，避免或減少血藥濃度的峰谷現象，提供平穩有效的血藥濃度［6-8］。

海藻酸鈉是海藻酸的鈉鹽，是一種親水性多聚糖，能夠與人體淚液中含有的鈉離子(Na+)、鉀離子(K+)、鈣離子(Ca2+)等陽離子發生作用而引起構象改變，使滴眼液由溶液轉化為凝膠。形成凝膠的強度依賴于海藻酸鈉中β-D甘露糖酸與α-L古洛糖酸的比例，以及海藻酸鈉的濃度［9］。

［1］侯煒，肖紅，毛琳，等.噴昔洛韋體外抗病毒的藥效學研究［J］.華西藥學雜志，2004，19(2):87 －89.

［2］孫文武，江先義，張小平，等.復方阿昔洛韋眼用凝膠的制備及臨床應用［J］.中國醫院藥學雜志，2001，21(11):695.

［2］許俊羽，劉玉旺，孫培紅，等.噴昔洛韋注射劑在中國健康人體內的藥代動力學［J］.中國臨床藥理學與治療學，2007，12(4):470 －473.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)［M］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄32.

［5］ZHANG J J，XIE L K，CHEN Z J，et al.Determination of fluconazole in tears and aqueoushumors after topically applied to rabbit eyes by gas-liquid chromatography［J］.Chin Ophthal Res，2000，18(5):385.

［6］孫海燕，杜興，沙紅玉，等.原位凝膠在滴眼劑中的研究進展［J］.中國藥業，2005，14(8):91.

［7］周軍.羥甲唑啉膠化滴眼劑的制備與質量控制［J］.醫藥導報，2010，29(12):1624 －1625.

［8］趙寧民，張凱，王豫輝.加替沙星原位膠化滴眼劑的制備及質量控制［J］.中國醫院藥學雜志，2008，28(22):1962－1963.

［9］鐘延強，蔣華芳，劉善奎，等.原位膠化緩釋滴眼劑的研究進展［J］.藥學服務與研究，2003，3(3):170 －172.