2006至2010年銅綠假單胞菌分布及耐藥性分析

陳建安，周 靜，張麗華，張 麗

(中山大學附屬東華醫院檢驗科，廣東東莞 523110)

2006至2010年銅綠假單胞菌分布及耐藥性分析

陳建安，周 靜，張麗華，張 麗

(中山大學附屬東華醫院檢驗科，廣東東莞 523110)

目的分析2006至2010年中山大學附屬東華醫院臨床分離的646株銅綠假單胞菌的耐藥情況。方法采用全自動微生物分析儀VITEK32進行細菌鑒定，用Kirty-Bauer法進行藥敏試驗。并用WHONET5.5對其耐藥性進行分析。結果5年共分離銅綠假單胞菌646株，以呼吸道標本分離株為主，占65.9%。分離菌對抗菌藥物耐藥率最高的是左氧氟沙星(18.5%)，其次為慶大(18.1%)，亞胺培南(18.0%)。對美羅培南的耐藥率為13.7%。敏感率最高的是妥布霉素(88.2%)，其次為哌拉西林/他唑巴坦(88.1%)，頭孢他啶(87.0%)。結論連續5年回顧性分析，銅綠假單胞菌是我院醫院感染的主要病原菌，其耐藥率較高,并呈不斷上升。

銅綠假單胞菌；耐藥性；感染

銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginasa)屬于非發酵菌，廣泛分布于自然界、土壤、水、空氣中，人體的皮膚、腸道、呼吸道均有存在，當人體免疫力低下時極易成為條件致病菌，是醫院感染的主要病原菌。我國銅綠假單胞菌的耐藥性仍處于較高水平，不同醫院抗菌藥物的耐藥性相差較大，應加強監測，指導臨床合理使用抗菌藥物并控制醫院耐藥菌感染的流行[1]。為此我們對我院2006至2010年臨床分離的銅綠假單胞菌細菌耐藥性進行回顧性分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 均為2006至2010年東莞東華醫院臨床分離的銅綠假單胞菌，剔除相同部位的重復菌株，共646株。

1.1.2 質控菌株銅綠假單胞菌ATCC27853購于衛生部臨床檢驗中心。

1.1.3 抗生素藥敏紙片和培養基哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南、亞安培南、美羅培南、阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素、環丙沙星、左氧氟沙星12種抗菌藥紙片均購自英國OXOID公司。Mueller-Hinton(MH)培養基為廣州市迪景公司產品。

1.2 方法

1.2.1 細菌鑒定按《全國臨床檢驗操作規程》第3版進行分離培養，采用法國生物梅里埃公司全自動微生物分析儀VITEK32，及GNI＋細菌鑒定卡鑒定到種。

1.2.2 藥敏試驗采用紙片擴散法(K-B)，結果采用對應每年的CLSI推薦的標準執行，總耐藥率采用2010年的CLSI推薦的標準計算。

1.2.3 統計方法用WHONET 5.5軟件進行分析。

2 結果

2.1 銅綠假單胞菌的標本分布

2006 至2010 年我院共分離銅綠假單胞菌646株，逐年分離的銅綠假單胞菌分別為95株、116株、131株、152株和152株。標本主要來自下呼吸道(痰標本)，共427株 (66.1%)；其次傷口分泌物98株(15.2%)；尿標本 48 株(7.4%)；血標本 17 株(2.6%)，其他標本(深靜脈導管、胸腹水、腦脊液等)占8.7%。

2.2 銅綠假單胞菌科室分布

呼吸內科檢出194株(30.0%)，ICU檢出111株(17.2%)，神經外科檢出54株(8.4%)，神經內科檢出48株(7.4%)，血液內科檢出33株(5.1%)，腫瘤內科檢出30株(4.6%)，門診檢出27株(4.2%)，腎內科檢出23株(3.6%)，其他科室檢出126株(19.5%)。

表1 2006至2010年銅綠假單胞菌對12種抗菌藥物的耐藥率(%)

2.3 銅綠假單胞菌對常用抗生素的耐藥性分析

銅綠假單胞菌對12種抗菌藥物的耐藥率見表1。2006年至2010年5年中我院分離的銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的總耐藥率最高的是左氧氟沙星(18.5%)，其次為慶大(18.1%)，亞胺培南(18.0%)。敏感率最高的是妥布霉素(88.2%)，其次為哌拉西林/他唑巴坦(88.1%)，頭孢他啶(87.0%)。5年中除亞安培南外 (亞安培南2010年的CLSI推薦的標準有較大改動)耐藥率上升較快的有哌拉西林(8.4%～21.1%)，哌拉西林/他唑巴坦 (7.4%～15.1%)，頭孢他啶 (7.4%～14.5%)， 氨曲南 (9.5%～17.9%)，美羅培南 (3.0%～17.9%)，環丙沙星(9.5%～18.4%)，左氧氟沙星(16.7%～21.1%，P＜0.01)。對亞安培南的耐藥率從2006到2008年有所增加，2009年有所回落，2010年按新的CLSI推薦的標準又增高到21.7%。

3 討論

由于廣譜抗菌藥物、激素及免疫抑制劑的廣泛應用，各種侵入性診斷和治療手段的不斷增加，銅綠假單胞菌在醫院感染病原體中占有越來越重要的地位，在2007年我院的細菌耐藥性檢測中占主要病原菌的第二位，僅次于大腸埃希菌[2]。5年中，銅綠假單胞菌臨床分離株數呈逐年上升趨勢，標本來源主要為下呼吸道66.1%，傷口分泌物15.2%，尿標本7.4%。這可能與廣譜抗生素的應用，氣管插管、尿道內插管等侵入性操作有關。科室分布主要在呼吸內科30%和ICU 17.2%。銅綠假單胞菌主要引起下呼吸道感染，也是醫院獲得性肺炎最常見的病原菌。ICU患者病情危重，免疫力低下，加上大劑量廣譜抗生素的使用，易于銅綠假單胞菌的定植，造成院內感染。

銅綠假單胞菌的天然耐藥性引人矚目，獲得性耐藥性也極常見。通過以上回顧性研究，我院銅綠假單胞菌對β-內酰胺類的耐藥性有一定程度的上升，其中哌拉西林的耐藥性由2006年的8.4%上升到2010年的21.1%，哌拉西林/他唑巴坦的由7.4%上升到15.1%，頭孢他啶由7.4%上升到14.5%，頭孢吡肟的耐藥性變化不大。其耐藥機制主要是獲得β-內酰胺酶，調節增強的泵出，以及膜孔蛋白丟失，LPS的改變，青霉素結合蛋白的改變。銅綠假單胞菌對氨基糖苷類藥物的耐藥性有一定程度下降。其中阿米卡星由2006年的15.8%降到2010年的9.9%，慶大霉素由21.1降到18.5%，妥布霉素的耐藥性變化不大。對此類藥物最常見的耐藥機制為藥物的不可滲透性及泵出，酶滅活，呼吸突變等。雖然氨基糖苷類藥物的抗菌活性保持的不錯，但此類藥物對老年及腎病患者有增加腎毒性的危險，應慎用。

喹諾酮類藥物對治療銅綠假單胞菌感染應用廣泛，與之相對的耐藥率也逐年上升。環丙沙星由2006年的9.5%上升到2010年的18.4%，左氧氟沙星由16.7%上升到21.1%。銅綠假單胞菌對此類藥物的耐藥主要由于作用靶位親和力的改變即DNA螺旋酶A亞單位和拓撲異構酶Ⅳ的C亞單位突變引起[3]。碳青霉烯類抗菌藥物對革蘭陰性桿菌具有強大的抗菌活性，因此被廣泛用于重癥感染患者，特別是ICU病房，它對銅綠假單胞菌的耐藥性也是不斷上升。亞安培南的耐藥率從2006年的6.4%到2008年的15.4%，2009年有所回落，2010年按新的CLSI推薦的標準又上升到21.7%。美羅培南從2008年開始的3%上升到2010年的17.9%，短短3年時間耐藥性上升近6倍，應引起臨床醫生的重視。有文獻報道銅綠假單胞菌對碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥性主要是由于膜孔蛋白OprD2含量減少甚至丟失引起外膜通透性下降所致[3，4]。

我院銅綠假單胞菌這5年的總耐藥率在10.4%到18.5%之間，總體來說并不算高，2007年的耐藥率在11.2%到21.6%之間，低于2007年中國CHINET銅綠假單胞菌的耐藥性監測報道的18.7%到40.1%[1]。2009年的耐藥率在4.6%到21.7%之間低于2009中國CHINET銅綠假單胞菌的耐藥性監測報道的14.8%到30.9%[5]。這可能與地區差異有關，東莞外來務工人員較多，流動性大，年齡以中青年為主，其他因素有待進一步探討。

[1]孫景勇,倪語星,汪 復,等.2007年中國CHINET銅綠假單胞菌耐藥性監測[J].中國感染與化療雜志,2009,5(3):192-195.

[2]張麗華,張 麗,李超強,等.東莞東華醫院2007年細菌耐藥性監測[J].中國感染與化療雜志,2008,8(5)379-382.

[3]Pai H,Kim JW,Kim J,et al.Carbapenem resistance mechanisms in Pseudomonas aeruginasa clinical islates[J].Antimicrob Agents Chemother,2001,45(2):480-484.

[4]黃支密,單 浩,郭滿盈,等.多重耐藥銅綠假單胞菌耐藥基因及親緣性分析[J].中華醫院感染學雜志,2007,17(4):366-369.

[5]張 博,倪語星,孫景勇,等.2009中國CHINET銅綠假單胞菌細菌耐藥性監測[J].中國感染與化療雜志,2010,10(6):436-440.

Distribution and antibiotic resistance of P.aeruginosa isolates from 2006 to 2010

CHEN Jianan, ZHOU Jing,ZHANG Lihua,et al.Tungwah Hospital of Sun Yat-Sen University,Guangdong Dongguan 523110,China

ObjectiveTo analyze the distribution and drug resistance of P.aeruginosa isoltated in Tungwah Hospital for using antibiotic correctly.MethodsAutomated microbe analyzer(VITEK32)was used to analyze antibiotic susceptibility by means of Kirty-Bauer method.ResultsA total of 646 strains of P.aeruginosa,mainly from respiratory tract(65.9%),were isolated during five years.These strains showed the highest resistance(18.5%)to levofloxacin,followed by gentamicin(18.1%),imipenem(18.0%)and meropenem(13.7%).The sensitivity to tobramycin was the highest(88.2%),followed by piperacillin-tazobactam (88.1%)and ceftazidime(87.0%).ConclusionP.aeruginosa,with rising resistance rate,is the main pathogen of nosocomial infections.

P.aeruginosa；Drug resistance；Infection

R378.99+1,R446.5,Q939.92

B

1674-1129(2011)05-0539-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2011.05.028