8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

摘要：采用菌絲生長(zhǎng)速率法和孢子萌發(fā)法進(jìn)行了8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌(Phytophthoracapsicl)的毒力測(cè)定。結(jié)果表明，供試8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)均具有一定的抑制效果，其中1％申嗪霉素懸乳劑對(duì)南瓜疫病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)，2％寧南霉素次之，5％井岡霉素水劑最弱。

關(guān)鍵詞：生物殺菌劑；南瓜疫病菌；毒力測(cè)定

南瓜疫病是南瓜生產(chǎn)上的毀滅性病害，在我國(guó)普遍發(fā)生，通常發(fā)病率在30％以上，嚴(yán)重地塊造成絕產(chǎn)。南瓜疫病菌以卵孢子在土壤中越冬，游動(dòng)孢子侵入寄主，病菌可通過土壤傳播。選育和合理使用抗病品種是控制南瓜疫病危害最有效的方法。但由于南瓜疫病傳播和侵染的特點(diǎn)，以及目前尚無理想的抗病品種，藥劑防治仍是主要的防治手段。但化學(xué)防治具有污染環(huán)境等缺點(diǎn)，因而利用生物殺菌劑是生產(chǎn)綠色蔬菜的主要措施。筆者通過室內(nèi)毒力測(cè)定方法測(cè)定了8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌的毒力，擬為南瓜疫病防治提供理想的殺菌劑。

1 材料與方法

1.1供試材料

供試菌種：南瓜疫病菌由本研究室從南瓜疫病植株上分離保存。供試藥劑：3％中生菌素可濕性粉劑，由福建凱立生物制品有限公司生產(chǎn)：5％井岡霉素水劑，由武漢科諾生物科技股份有限公司生產(chǎn)：2％春雷霉素水劑，由河北博嘉農(nóng)業(yè)有限公司生產(chǎn)：3％多抗霉素可濕性粉劑，由陜西綠盾生物制品有限公司生產(chǎn)：4％農(nóng)抗120水劑，由武漢科諾生物科技股份有限公司生產(chǎn)：2％寧南霉素水劑，由黑龍江強(qiáng)爾生物技術(shù)開發(fā)有限公司生產(chǎn)：1％申嗪霉素懸浮劑，由上海農(nóng)樂生物制品股份有限公司生產(chǎn)：2％武夷菌素水劑，由山東濰坊萬勝生物農(nóng)藥有限公司生產(chǎn)：對(duì)照化學(xué)藥劑25％甲霜靈可濕性粉劑，由江蘇省南通染化廠生產(chǎn)。

1.2方法

1.2.1幾種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌菌絲生長(zhǎng)的影響將供試菌株接種于胡蘿卜瓊脂培養(yǎng)基(CA.配方為胡蘿卜200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，定容至1000mL)上，25℃恒溫箱培養(yǎng)5d，待菌絲布滿培養(yǎng)皿后用無菌打孔器在菌落邊緣打取直徑5mm菌餅備用。將供試藥劑按照稀釋500、800、1000倍稱量試驗(yàn)所需用量，待小三角瓶中培養(yǎng)基溫度降到50℃時(shí)分別加入供試藥劑并充分搖勻后倒平板，以無菌水為對(duì)照，每個(gè)處理倒3個(gè)培養(yǎng)皿。待皿內(nèi)培養(yǎng)基凝固后，每皿加入菌餅1枚，置于25℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)5d后，采用十字法測(cè)量菌落直徑，3次重復(fù)。根據(jù)菌絲生長(zhǎng)抑制率分析法計(jì)算毒力回歸曲線，并求出EC₅₀值。

菌絲生長(zhǎng)抑制率(％)=(對(duì)照菌落直徑一處理菌落直徑)，

對(duì)照菌落直徑×100

1.2.2幾種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌孢子囊萌發(fā)的影響將供試菌株接種于CA平板上，25℃下培養(yǎng)5d，然后用直徑5mm無菌打孔器在菌落邊緣打孔制得菌餅，將菌餅放入含有10mL無菌水的無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，25℃保濕培養(yǎng)36h，即產(chǎn)生孢子囊。毒力測(cè)定時(shí)將供試藥劑按照稀釋500、800及1000倍分別加入孢子囊懸浮液中，以無菌水為對(duì)照，混合后置于25℃恒溫箱中培養(yǎng)48h。觀察孢子囊萌發(fā)情況，每個(gè)處理觀察記錄200-300個(gè)孢子囊。以游動(dòng)孢子全部從孢子囊中游出被記錄為萌發(fā)。3次重復(fù)。然后根據(jù)孢子萌發(fā)抑制率分析法計(jì)算毒力回歸曲線，并求出ECho值。

孢子萌發(fā)抑制率(％)：(對(duì)照萌發(fā)孢子數(shù)-處理萌發(fā)孢子

2 結(jié)果與分析

2.1幾種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

試驗(yàn)結(jié)果(表1)表明，供試8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌菌絲生長(zhǎng)均具有一定的抑制效果，8種生物殺菌劑的有效成分ECso值的大小順序依次為：5％井岡霉素水劑>3％中生菌素可濕性粉劑>2％春雷霉素水劑>2％武夷菌素水劑>3％多抗霉素可濕性粉劑>4％農(nóng)抗120水劑>2％寧南霉素水劑>1％申嗪霉素懸乳劑。其中5％井岡霉素水劑最大，為160.9758mg，L^-1：1％申嗪霉索懸乳劑最小，為3.8225mg，L^-1。不同濃度各藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制作用相關(guān)性均達(dá)到極顯著水平，綜合各殺菌劑的EC₅₀值，1％申嗪霉素懸乳劑對(duì)南瓜疫病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)，2％寧南霉素水劑次之，5％井岡霉素水劑最弱。

2.2幾種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌孢子囊萌發(fā)的影響

試驗(yàn)結(jié)果(表2)表明，供試殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌孢子囊萌發(fā)的抑制效果明顯，8種殺菌劑的有效成分ECso值大小順序?yàn)椋?％井岡霉素水劑>3％中生菌素可濕性粉劑>2％春雷霉素水劑>4％農(nóng)抗120水劑>2％武夷菌素水劑>3％多抗霉素可濕性粉劑>2％寧南霉素水劑>1％申嗪霉素懸乳劑。其中5％井岡霉素水劑最大，為342.0267mg，L^-1：1％申嗪霉素懸乳劑最小，為8.6230mg，L^-1。不同濃度各藥劑對(duì)孢子囊萌發(fā)的抑制作用相關(guān)性均達(dá)到極顯著水平，綜合各殺菌劑的EC₅₀值，1％申嗪霉素懸乳劑對(duì)南瓜疫病菌孢子囊萌發(fā)的抑制作用最強(qiáng)，2％寧南霉素水劑次之，5％井岡霉素水劑最弱。

3 討論與結(jié)論

南瓜疫病是南瓜生產(chǎn)中的主要病害，生產(chǎn)中尚缺乏抗病品種，藥劑防治是防治該病的主要措施。使用生物農(nóng)藥不會(huì)產(chǎn)生農(nóng)藥殘留，而且環(huán)保無公害，可以替代一部分化學(xué)農(nóng)藥，能夠放心生產(chǎn)無公害食品和綠色蔬菜，可以在蔬菜生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。為了延緩化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生抗性，可采用生物農(nóng)藥和化學(xué)農(nóng)藥混配，提高防治效果。韓新才等分別利用農(nóng)抗120和百菌清對(duì)9種植物病原真菌進(jìn)行毒力測(cè)定，認(rèn)為農(nóng)抗120抑菌率好于百菌清，原因可能是植物病原菌已對(duì)百菌清產(chǎn)生一定的抗藥性。韓新才等分別利用農(nóng)抗120和多菌靈對(duì)棉花枯萎病菌進(jìn)行毒力測(cè)定，認(rèn)為農(nóng)抗120對(duì)植物病原菌的作用機(jī)理是抑制孢子萌發(fā)、導(dǎo)致菌絲畸形和原生質(zhì)凝聚，具有保護(hù)和治療作用。劉振海等認(rèn)為寧南霉素對(duì)水稻立枯病的防治效果好于多菌靈和甲霜靈。在南瓜疫病的防治過程中，由于大量使用甲霜靈等藥劑既污染環(huán)境同時(shí)也出現(xiàn)了抗藥性等問題，因此，可以將篩選出的高效生物防治藥劑與化學(xué)藥劑混配，提高防治效果，為南瓜疫病的防治提供一條新的途徑。

8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌進(jìn)行毒力測(cè)定的結(jié)果表明，8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌菌絲生長(zhǎng)均有抑制作用，且隨濃度增加抑制作用加大。其中1％申嗪霉素懸乳劑對(duì)南瓜疫病菌抑制效果最好，其次為2％寧南霉素水劑及4％農(nóng)抗120水劑。8種生物殺菌劑對(duì)南瓜疫病菌孢子囊萌發(fā)都有一定的抑制作用，其中抑制作用最大的是1％申嗪霉素懸乳劑，其次為2％寧南霉素水劑和3％多抗霉素可濕性粉劑，最高抑制率分別為63.2％、51.2％和50.2％。