甲基綠-派洛寧染色方法在慢性子宮內(nèi)膜炎診斷中的應(yīng)用

【摘要】目的:探討甲基綠-派洛寧染色方法在慢性子宮內(nèi)膜炎診斷中的應(yīng)用。方法:采用Cook甲基綠-派洛寧提純法染色子宮內(nèi)膜組織，診斷慢性子宮內(nèi)膜炎。結(jié)果:294例子宮內(nèi)膜組織有64例診斷為慢性子宮內(nèi)膜炎。結(jié)論:甲基綠-派洛寧染色方法是一種簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的方法，可以做為慢性子宮內(nèi)膜炎診斷的首選方法。

【關(guān)鍵詞】甲基綠-派洛寧;慢性子宮內(nèi)膜炎;診斷

【中圖分類號(hào)】R711.32【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2010)14-145-1

慢性子宮內(nèi)膜炎為子宮內(nèi)膜的慢性炎癥。慢性子宮內(nèi)膜炎雖然發(fā)病率較低，可一旦患病則會(huì)給患者生活、工作帶來諸多影響，也給患者本人造成許多痛苦。在子宮內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)找到漿細(xì)胞是診斷子宮內(nèi)膜炎的關(guān)鍵。但是，混雜在子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞之間的漿細(xì)胞很不容易找到，不成熟的漿細(xì)胞就更不容易辨認(rèn)。造成慢性子宮內(nèi)膜炎漏診。我們應(yīng)用甲基綠-派洛寧染色方法幫助辨認(rèn)漿細(xì)胞，確診慢性子宮內(nèi)膜炎64例，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料及方法

1.1材料

山西省汾陽醫(yī)院門診及住院功能性子宮出血病例294例。

1.2方法

采用Cook甲基綠-派洛寧提純法[1]

[試劑配制]

(1)甲基綠原液2%甲基綠溶液，氯仿抽提五次。

(2)派洛寧原液2%派洛寧。

(3)醋酸緩沖液(pH4.8)0.2M醋酸液41ml，0.2M醋酸鈉59ml。

(4)甲基綠-派洛寧染液。甲基綠提純液15ml，派洛寧原液1ml，醋酸緩沖液20ml，甘油10ml。臨用前配制。

[染色步驟]

(1)組織切片脫蠟至水。

(2)用醋酸緩沖液(pH4.8)浸洗。

(3)置于甲基綠-派洛寧染液染色3分鐘。

(4)用醋酸緩沖液(pH4.8)清洗。

(5)濾紙吸干，迅速丙酮分化30秒。

(6)用純丙酮、二甲苯等量(1:1)混合液分化、脫水30秒。

(7)二甲苯透明，光學(xué)樹膠封固。

2結(jié)果

圖1

294例功能性子宮出血病人的子宮內(nèi)膜組織，其中64例診斷為慢性子宮內(nèi)膜炎。子宮內(nèi)膜組織呈淡紅色，漿細(xì)胞核呈綠色，漿細(xì)胞胞漿呈鮮紅色。在HE形態(tài)下，子宮內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)有散在的或成簇淋巴細(xì)胞浸潤，部分淋巴細(xì)胞出現(xiàn)漿細(xì)胞樣分化，較少出現(xiàn)典型的成熟的漿細(xì)胞。早期的漿細(xì)胞的核形態(tài)與淋巴細(xì)胞相似，胞漿增多，核周出現(xiàn)淡染區(qū)，后期則出現(xiàn)核內(nèi)染色質(zhì)分布呈點(diǎn)彩樣，成熟的漿細(xì)胞出現(xiàn)典型的車輪狀核。長期的慢性炎癥間質(zhì)細(xì)胞可出現(xiàn)纖維化及毛細(xì)血管增生。見圖1。

3討論

甲基綠和派洛寧兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同，甲基綠對(duì)DNA親和力強(qiáng)，使DNA顯現(xiàn)出綠色，而派洛寧對(duì)RNA的親和力強(qiáng)，使RNA呈現(xiàn)出紅色。漿細(xì)胞的胞漿內(nèi)合成蛋白質(zhì)旺盛，含有豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，上有大量的核糖體，內(nèi)含大量的核糖核酸，故漿細(xì)胞胞漿著色呈鮮紅色。淋巴細(xì)胞分為T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞兩大類。B淋巴細(xì)胞最終發(fā)育為漿細(xì)胞，產(chǎn)生抗體，在發(fā)育的過程中，漿細(xì)胞內(nèi)核糖體逐漸增多。分泌抗體功能逐漸加強(qiáng)，形態(tài)也逐漸典型。

慢性子宮內(nèi)膜炎在婦科臨床雖沒有宮頸糜爛及陰道炎那樣多見，但仍是危及廣大婦女身體健康的主要原因之一。慢性子宮內(nèi)膜炎多由急性子宮內(nèi)膜炎治療不徹底所致。慢性子宮內(nèi)膜炎的癥狀有疼痛的、白帶增多、經(jīng)量增多。由于子宮內(nèi)膜的生理性周期剝脫，嚴(yán)重的慢性子宮內(nèi)膜炎并不多見。這就給臨床診斷帶來困難。鏡下見內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)有多少不等的漿細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤，而漿細(xì)胞的存在是診斷慢性子宮內(nèi)膜炎的依據(jù)之一。但有時(shí)內(nèi)膜細(xì)胞增生、經(jīng)前期內(nèi)膜的蛻膜樣改變以及大量淋巴細(xì)胞的存在可能影響對(duì)漿細(xì)胞的辨認(rèn)。應(yīng)用免疫組化方法有助于診斷，但無法排除假陰性的問題，其費(fèi)用較高，操作復(fù)雜，在沒有開展免疫組化的基層醫(yī)院很難實(shí)行。本方法294例功能性子宮出血病人的子宮內(nèi)膜組織，其中64例診斷為慢性子宮內(nèi)膜炎。漿細(xì)胞核呈綠色，漿細(xì)胞胞漿呈鮮紅色，特別鮮艷奪目容易辨認(rèn)。因此，本法簡(jiǎn)便、易行、實(shí)用，可清晰顯示漿細(xì)胞的存在，可明確診斷慢性子宮內(nèi)膜炎。

輕度炎癥病人，雙合診可無異常情況發(fā)現(xiàn)，故臨床常診斷為功能失調(diào)性子宮出血。有人在1000例功能失調(diào)性子宮出血病人中作病理組織檢查，發(fā)現(xiàn)11%為子宮內(nèi)膜炎。在增生過長的子宮內(nèi)膜組織中如發(fā)現(xiàn)星星點(diǎn)點(diǎn)的淋巴細(xì)胞做甲基綠-派洛寧染色往往能找到漿細(xì)胞，所以內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞即可認(rèn)為是慢性子宮內(nèi)膜炎。使用抗生素治療往往有效，可一旦漏診則造成病人不必要的痛苦。

參考文獻(xiàn)

[1] 龔志錦.病理組織制片和染色技術(shù)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，1994，1:301.