腹腔注射七氟烷對小鼠鎮痛及催眠作用的影響

石丹萍 陳小嬌 陳銀寶 周艷 申璐 王賀 張雪艷 戴體俊

七氟烷是一種新型的鹵族吸入全麻藥，具有誘導快、蘇醒快、麻醉深度易調節、對循環抑制輕、呼吸道刺激小、有一定的肌松作用等優點，是臨床上常用的揮發性吸入全麻藥，具有很好的鎮痛和催眠作用［1］。但每種麻醉藥都需特殊揮發罐裝置，既不經濟也不宜于現場急救，且誘導緩慢、對呼吸道有一定的刺激性。因此，人們一直在探索其他給藥途徑的可能性。近來有大量的研究證明，吸入麻醉藥通過靜脈、腹腔、硬膜外等途徑給予原藥或乳劑均能達到麻醉的作用［2-4］。本實驗進一步研究腹腔注射七氟烷對小鼠鎮痛及催眠作用的影響。

1 材料和方法

1.1 試劑與儀器 七氟烷:上海恒瑞醫藥股份有限公司，批號:08061837;YLS-6B智能熱板儀(上海，中國)。

1.2 實驗動物 昆明種小鼠，清潔級，徐州醫學院實驗動物中心提供，體質量(25±3)g。實驗前3 d使小鼠熟悉實驗室環境，自由攝食飲水，每日于同一時間進行實驗。

1.3 動物分組及處理

1.3.1 按分層隨機區組設計，將120只小鼠(雌雄不拘，熱板法僅選用雌性)分為12組(n=10)，分別用于熱板實驗(40只):對照組(NS 組)，Sev1、Sev2、Sev3 組(1.96、2.8、4 mg/ml)。扭體試驗(40 只):對照組(NS組)，Sev1、Sev2、Sev3 組(1.96、2.8、4 mg/ml)。催眠實驗(40 只):對照組(NS 組)，Sev1、Sev2、Sev3 組(2.7、3.8、5.5 mg/ml)。

1.3.2 熱板實驗［5］雌性小鼠置于YLS-6B智能熱板儀(55±0.5)℃，記錄從足部接觸熱板到舔后足的時間即熱板法痛閾(HPPT)。給藥前每只小鼠測HPPT2次，間隔5 min，取平均值為基礎痛閾(Basal HPPT)，剔除基礎痛閾大于30 s或小于5 s的動物。為防止足部燙傷，觀察截止時間為60 s，超過60 s者，HPPT計為60 s。記錄各組小鼠的基礎痛閾和腹腔注射七氟烷后 5、15、25、35、45、60、90 min 的 HPPT。

1.3.3 扭體實驗［5］小鼠腹腔注射1%冰醋酸溶液0.01 ml/g致痛，使小鼠出現腹部內凹、軀干與后肢伸張、臀部高抬等行為反應(扭體反應)。各組先以NS、Sev腹腔注射，20 min后注射1.5%醋酸，以15 min內發生的扭體次數為疼痛定量指標。扭轉法記錄各組小鼠腹腔注射醋酸后15 min內的扭轉次數。

1.3.4 催眠實驗 小鼠以NS、Sev腹腔注射后，放入瓶蓋打孔的棕色廣口瓶中，并記錄小鼠從腹腔注射后到翻正反射消失的時間，即潛伏期;以及到翻正反射恢復的時間，即為睡眠時間(ST)。

1.4 統計學方法 采用SPSS 13.0軟件進行統計分析，實驗數據以(±s)表示，組內采用配對t檢驗和單個重復測量因素方差分析;組間用單因素方差分析和q檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 熱板實驗 與基礎痛閾比較，Sev1給藥后15、25、60 min的HPPT 增加(P ＜0.05，P ＜0.01)，Sev2給藥后 25、35、45、60、90 min的 HPPT增加(P ＜0.05，P ＜0.01)，Sev3給藥后15、25、35、45、60 min 的 HPPT 增加(P ＜ 0.05，P ＜ 0.01)，而NS組沒有明顯變化(P＞0.05)。與NS組比較，Sev1各時點的HPPT的差別無顯著性(P＞0.05)，Sev2 25、35 min的HPPT增加(P＜0.05)，Sev3給藥后15～90 min的HPPT增加(P＜0.05，P＜0.01)。見表1。

表1 腹腔注射七氟烷對小鼠鎮痛作用的影響(±s，n=10)

表1 腹腔注射七氟烷對小鼠鎮痛作用的影響(±s，n=10)

注:#P ＜0.05，##P ＜0.01 vs basal HPPT，*P ＜0.05，*P ＜0.01 vs NS group

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2.2 扭體實驗 與NS組比較，Sev1、Sev2、Sev3組的WT減少(P＜0.01)。表明腹腔注射Sev可增加小鼠的鎮痛作用。見表2。

表2 腹腔注射七氟烷對小鼠鎮痛作用的影響(±s，n=10)

表2 腹腔注射七氟烷對小鼠鎮痛作用的影響(±s，n=10)

注:*P＜0.05，**P＜0.01 vs NS group

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2.3 催眠實驗 NS組比較，Sev1、Sev2、Sev3組的潛伏期縮短、睡眠時間增加(P＜0.01)。表明腹腔注射Sev有催眠作用。見表3。

表3 腹腔注射七氟烷對小鼠的催眠作用(±s，n=10，min)

表3 腹腔注射七氟烷對小鼠的催眠作用(±s，n=10，min)

注:*P＜0.05，**P＜0.01 vs NS group

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3 討論

吸入麻醉藥吸入給藥通常需配置昂貴的麻醉機，且誘導緩慢。有實驗發現吸入異氟醚可明顯加重脂多糖誘導的肺損傷病變且對手術室造成空氣污染。因此，吸入麻醉藥非呼吸道給藥具有一定價值。根據吸入麻醉藥的體內過程和以往的實驗證實，吸入麻醉藥腹腔注射給藥后同樣能夠達到催眠、鎮痛作用［2、5］。

本研究結果顯示，小鼠腹腔注射七氟烷，可增加熱板法痛閾值、減少扭體次數、延長睡眠時間。說明腹腔注射七氟烷完全可能產生鎮痛和催眠作用。但研究中也存在一些問題:小鼠可在腹腔注射后迅速入睡，并在較短時間內(＜300 s)恢復，而后再度入睡，這可能與藥物的再分布有關。

本研究為尋求吸入麻醉藥腹腔注射給藥途徑提供了實驗依據，但其鎮痛及催眠作用機制復雜［6-8］，故尚需進一步對其作用機掉、應用劑量、安全性及生物利用度做相關研究。

［1］張春艷，劉寶江.七氟醚的臨床應用現狀.醫學綜述，2008，14(7):2901-4901.

［2］戴體俊，葉妙，傅英.注射揮發性麻醉藥對動物的作用.臨床麻醉學雜志，2004，13(5):262-263.

［3］徐茜，陳玉培.靜脈乳化異氟醚的研究進展.醫學綜述，2008，14(15):0532-3532.

［4］柴云飛，宋靜波，楊靜，等.8%乳化異氟醚兔硬膜外麻醉作用觀察.四川醫學，2007，28(5):473-475.

［5］宋必衛，徐叔云，馬傳庚，等.鎮痛藥物實驗法/徐叔云，卞如濂，陳修主編.藥理實驗方法學.人衛生出版社，2002:882-887.

［6］杭黎華，邵東華，楊映紅，等.AMPA對吸入麻醉藥催眠、鎮痛作用的影響.中國藥理學通報，2008，24(4):482-485.

［7］閆肅，戴體俊，曾因明，等.神經元煙堿受體與異氟烷、七氟烷催眠和鎮痛作用的關系.中國藥理學通報，2008，24(3):318-322.

［8］王瑞明，方才，等.異氟烷催眠、鎮痛作用與NMD受體甘氨酸位點的關系.中國藥理學通報，2007，23(2):189-193.