不同冠心病炎癥因子測定及意義

孫小軍 盧競前 李易

易損斑塊和急性心肌梗死(AMI)發(fā)病之間關(guān)系密切，如何防止穩(wěn)定斑塊向不穩(wěn)定斑塊進(jìn)展，防止斑塊破裂仍是目前亟待解決的重要問題。大量研究顯示炎癥在動脈粥樣硬化(AS)的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，其中C反應(yīng)蛋白(CRP)被認(rèn)為是冠心病發(fā)病較強(qiáng)的獨(dú)立預(yù)測因子，并做為心血管危險(xiǎn)因素寫入歐洲心臟病協(xié)會(ESC)指南。近年研究發(fā)現(xiàn)可溶性CD40配體(sCD40L)可通過多種生物學(xué)作用導(dǎo)致動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定，炎癥反應(yīng)加劇，從而促進(jìn)AMI的發(fā)生發(fā)展。本研究通過檢測非冠心患者、穩(wěn)定型心絞痛患者和AMI患者sCD40L和高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)的變化以及兩者之間是否具有相關(guān)性，為下一步尋找臨床更為特異的炎癥指標(biāo)和特異性治療奠定基礎(chǔ)和理論依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料 研究對象為昆明醫(yī)學(xué)院第四附屬醫(yī)院心內(nèi)科2007年3月至2008年1月間住院并經(jīng)過冠狀動脈造影確診的患者，根據(jù)臨床和冠造結(jié)果，按照2001年中華醫(yī)學(xué)會《急性心肌梗死診斷和治療指南》和2006年ESC《穩(wěn)定型心絞痛診治指南》標(biāo)準(zhǔn)分為:對照組(排除冠心病，n=20)，女6例，男14例，平均年齡(65.70±5.83)歲;穩(wěn)定型心絞痛組(n=20)，女8例，男12例，平均(67.20±5.96)歲;急性心肌梗死組組(n=40)，女12例，男28例，平均年齡(65.43±7.01)歲，詳細(xì)資料見表1。

1.2 診治方法 所有入選患者入院后根據(jù)胸痛癥狀、心電圖改變和心肌酶學(xué)改變初步診斷為穩(wěn)定型心絞痛和急性心肌梗死。所有入選的患者最終根據(jù)冠狀動脈造影結(jié)果進(jìn)行最終診斷，穩(wěn)定型心絞痛為冠狀動脈至少有1支冠脈血管狹窄大于50%且無心肌酶學(xué)增高，急性心肌梗死為冠狀動脈至少有1支冠脈血管狹窄大于50%且伴有心肌酶學(xué)增高3倍以上并心電圖有相鄰導(dǎo)聯(lián)ST段抬高大于0.1 mV以上，對照組則為有胸痛癥狀但冠脈造影排除冠心病的患者。穩(wěn)定型心絞痛按照冠心病二級預(yù)防治療，急性心肌梗死患者根據(jù)胸痛至入院時(shí)間，結(jié)合患者血流動力學(xué)情況和患者及家屬意愿等因素綜合考慮進(jìn)行直接PCI、溶栓后補(bǔ)救PCI或擇期PCI治療。

1.3 sCD40L和hs-CRP檢測 所有入選的研究對象均在入院后即采集靜脈血5 ml，置于普通離心管，在2 h內(nèi)以3000 r/min離心15 min分離血清，以Eppendorf管分裝后置于-70℃冰箱中貯存。應(yīng)用sCD40L試劑盒(奧地利Bender Medsystems提供)和hs-CRP試劑盒(德國Herrenberg公司提供)，嚴(yán)格按照說明書操作，在昆明醫(yī)學(xué)院第四附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清sCD40L和hs-CRP水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS15.0軟件包。計(jì)量資料統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)均以±s表示，采用方差分析，計(jì)數(shù)資料的對比應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用直線相關(guān)性分析，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

3組研究對象的基本資料，包括性別、年齡、高血壓病、糖尿病、高血脂、吸煙、飲酒、及冠心病家族史、BMI等均無明顯差異性(P＞0.05)(見表1)。

表1 3組研究對象基本資料

3組血清sCD40L濃度比較結(jié)果顯示，急性心肌梗死組血清sCD40L水平(2.02±0.35 ng/ml)顯著高于穩(wěn)定型心絞痛組和對照組(P＜0.01)，穩(wěn)定型心絞痛組(1.20±0.23 ng/ml)血清sCD40L水平高于對照組(1.04±0.12)ng/ml，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。3組血清hs-CRP濃度比較結(jié)果顯示，急性心肌梗死組血清hs-CRP(3.41±0.38)mg/L顯著高于穩(wěn)定型心絞痛組和對照組(P＜0.01)，穩(wěn)定型心絞痛組血清hs-CRP水平(2.21±0.22)mg/L明顯高于對照組(1.11±0.13)mg/L(P＜0.05)。通過對血清sCD40L和hs-CRP的相關(guān)性分析，可見sCD40L和 hs-CRP兩指標(biāo)間呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.894，P ＜0.05)。

表2 3組血清sCD40L(ng/ml)和hs-CRP(mg/L)濃度比較

3 討論

已有資料表明動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病，炎癥反應(yīng)在粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展和心血管觸發(fā)事件中起著重要作用［1］。近年來隨著對AMI發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)粥樣斑塊內(nèi)局部炎癥細(xì)胞浸潤以及全身性炎癥是導(dǎo)致動脈粥樣硬化斑塊破裂引起 AMI的主要原因之一［2］。Nemann等［3］研究也提示AMI患者中存在一種炎癥的高反應(yīng)狀態(tài)。隨著越來越多的生化標(biāo)志物被用于識別具有高危心血管事件的患者，炎癥生化標(biāo)志物作為有別于心肌壞死和血流動力學(xué)應(yīng)激標(biāo)志物，能夠定量評價(jià)心血管特異性炎癥，為臨床預(yù)測動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥提供依據(jù)，因而備受關(guān)注。

CRP作為一種非特異性的炎癥標(biāo)志物，參與全身或局部炎性反應(yīng)，是最廣泛應(yīng)用的炎性標(biāo)志物之一。大量的研究已明確證實(shí)CRP是心血管事件的危險(xiǎn)標(biāo)志物，而最新的研究表明，CRP可能還直接參與了動脈粥樣硬化的形成。高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)可檢測出低水平(0.1～10.0 mg/L)的CRP濃度，在臨床上已經(jīng)普遍應(yīng)用，是炎癥反應(yīng)的敏感指標(biāo)［4］，被認(rèn)為是與AS關(guān)系最密切的炎癥標(biāo)志物之一。CRP通過在AS中的直接病理作用，誘導(dǎo)細(xì)胞粘附分子的產(chǎn)生，誘導(dǎo)單核細(xì)胞趨化蛋白-1的產(chǎn)生，減少血管內(nèi)皮減少一氧化氮(NO)的表達(dá)［5］，使血管內(nèi)皮功能失調(diào)，并上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，導(dǎo)致斑塊的不穩(wěn)定。增加血管內(nèi)皮細(xì)胞纖溶酶原激活物抑制物-1的表達(dá)及生物活性［6］，促進(jìn)循環(huán)纖溶系統(tǒng)失衡，從而易導(dǎo)致血栓形成。本實(shí)驗(yàn)中AMI患者血清中hs-CRP水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛患者和對照組證明炎癥參與了AMI的病理過程，這與許多國內(nèi)外研究結(jié)果相一致。

但是CRP是一種非特異性的炎癥標(biāo)志物，除了心臟疾患，其他組織炎癥也對其產(chǎn)生影響，為尋找更為特異性的炎癥指標(biāo)，本研究測定了sCD40L水平，sCD40L是腫瘤壞死因子(TNF)超家族成員，是目前冠心病研究中一個(gè)較新的特異性炎癥性標(biāo)記物。近年研究發(fā)現(xiàn)它廣泛存在于斑塊的各種細(xì)胞(ECs、SMCs 和 Mf)［7］，并且與斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)，F(xiàn)rancesco等［8］發(fā)現(xiàn)冠狀動脈介入術(shù)前高的血清sCD40L水平預(yù)示著更強(qiáng)的炎癥反應(yīng)，并與介入術(shù)后的再狹窄有關(guān)。sCD40L可以促進(jìn)炎癥介質(zhì)IL-1、TNF-α的表達(dá)，誘導(dǎo)一系列粘附分子如E-選擇素、VCAM、ICAM-1等的表達(dá)，誘導(dǎo)趨化因子如巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1(MIP-1)、間質(zhì)細(xì)胞來源因子-1(SDF-1)和MCP-1等的表達(dá)和釋放，抑制炎癥細(xì)胞的凋亡，上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，并促進(jìn)粥樣斑塊中新生血管形成，因此sCD40L可能是導(dǎo)致AMI血栓形成的更為特異的炎性介質(zhì)之一。本實(shí)驗(yàn)中AMI組血清sCD40L水平較穩(wěn)定型心絞痛組和對照組明顯升高，且分別在穩(wěn)定型心絞痛組和AMI患者中濃度逐級升高，提示sCD40L可能是冠脈病變的活動性標(biāo)志物。而且sCD40L水平和hs-CRP水平相關(guān)，更提示了炎癥與AMI的發(fā)生有關(guān)，且sCD40L作為反映炎癥程度和斑塊不穩(wěn)定性的指標(biāo)有進(jìn)一步的研究價(jià)值。

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