楊 梅 ,汪立琴 ,陳 童 ,郭志勤 ,郝 根 ,莎 拉 ,郭 立
(1.大連市金州區動物衛生監督管理局,遼寧 大連 116100;2.新疆畜牧科學院農業部家畜繁育生物技術重點開放實驗室,新疆 烏魯木齊 830000;3.新疆畜牧科學院畜牧研究所,新疆 烏魯木齊 830000)
當前,綿羊同期發情大多采用經孕激素處理的陰道栓(CIDR、海綿栓)或注射PGF2α結合PMSG的方法。該方法存在繁瑣、費時、成本高,且陰道栓易造成綿羊生殖道感染等問題。為此,我們在綿羊的繁殖季節,結合胚胎移植的同時,采用GnRH+PGF2α對受體綿羊進行同期發情處理試驗。
1.1.1 受體羊 選擇2~4歲,健康、膘情中等經產綿羊為受體羊。
1.1.2 試驗藥品 注射用促排卵素3號(杭州動物藥品廠,批號:050403);氯前列烯醇(齊魯動物保健品廠)。胚胎解凍液、胚胎移植液(實驗室配制)。
1.1.3 器械 外科手術器械,手術保定架,體式顯微鏡,加熱板,檢卵針,移植管等。
1.1.4 試情公羊 體格健壯,體重在70 kg以上的性欲較好的公羊為試情羊。
1.1.5 胚胎 為OPS玻璃化冷凍薩??搜蚺咛ァ?/p>
1.2.1 受體羊同期發情 采用注射促排卵素3號和PG對受體綿羊進行發情處理。受體綿羊在飼養管理條件、體況基本相同的情況下,隨即分為3個試驗組。受體羊從11月6~8日注射促排卵3號,每只羊注射劑量為5 μg,第9天注射氯前列烯醇。根據PG劑量不同,試驗分3個組。1組PG劑量0.161 mg/只,2組PG劑量0.2146 mg/只,3組PG劑量0.322 mg/只。24 h后,將試情公羊系試情布打入受體羊群,每日早晚兩次試情,觀察并記錄受體羊發情時間。
1.2.2 胚胎解凍 將OPS管從液氮中取出,迅速浸入含有0.35 mol/L蔗糖溶液的培養皿中,回收胚胎并迅速移入新鮮的0.20 mol/L蔗糖溶液中平衡5 min,最后在MPBS中平衡5min,洗凈后稍做培養,準備移植。
1.2.3 胚胎移植 采用手術法移植。受體羊在手術前24 h禁食,羊麻醉后保定在手術架上,在乳房的前上方腹中線處刮毛、消毒,用手術刀切開一個約5 cm的切口,用食指和中指從腹腔中夾出子宮和卵巢,檢查、記錄受體羊卵巢上黃體發育情況。將黃體發育良好一側的子宮角取出體外,用12#針頭在子宮角戳一口,用移植管吸1~2枚優質胚胎于開口處移入子宮角內,上涂抹油制劑青霉素,將子宮還原腹腔并縫合創口。
采用SPSS軟件進行統計分析。
采用促排卵3號+PG誘導繁殖季節綿羊同期發情的試驗結果表明,在注射PG后的72 h內,3組羊均表現發情,發情率為100%;發情集中在48 h,分別為68.57%、57.58%和61.29%,3組間無顯著差異(P>0.05)(表 1)。

表1 不同試驗組同期發情效果
根據受體羊發情后胚胎移植時的黃體觀察,3組的發情羊的排卵率均在90%以上,組間無顯著差異(P>0.05);第1組的平均黃體為2.77±1.29個/只,與第2、3組平均黃體數比較,差異極顯著(P<0.01)(表2)。

表2 不同試驗組排卵數比較
根據受體羊排卵和黃體發育情況,對86只受體羊的黃體側子宮角,移入兩枚經玻璃化冷凍-解凍后的胚胎,其總受胎率為38.37%,產羔率為112.12%,組間無差異(P>0.05)(表3)。
本試驗得出,采用促排卵3號+PG在繁殖季節誘導綿羊同期發情的方法是有效的,72 h內發情率達100%,排卵羊在90%以上,平均為93.94%(93/99);3種不同PG劑量試驗組之間,發情率無顯著差異,發情集中在PG注射后48 h。從表2、3結果可看出,低劑量PG誘導同期發情,排卵率高,黃體發育好,受胎率亦高。
上述結果說明,在綿羊繁殖季節,由于羊都處在發情周期,卵巢具備充分活性,所以采用促排卵3號+PG誘導綿羊同期發情方法是可行的。而且,每只羊僅需促排卵3號5μg和PG 0.161 mg,成本低、方法簡便,利于推廣應用。
[1] 王光亞.山羊胚胎工程[M].楊凌:天則出版社,1993.
[2] 郭志勤.家畜胚胎工程 [M].北京:中國科學技術出版社1998.
[3] 楊梅.利用CIDR+PMSG對乏情期綿羊同期發情處理的研究[J].草食家畜,2004.3.