王博,李莉云,曹英豪,劉子光,劉國振
河北農業大學生命科學學院,保定 071001
五個水稻類受體激酶的抗體制備及檢測
王博,李莉云,曹英豪,劉子光,劉國振
河北農業大學生命科學學院,保定 071001
類受體激酶在植物發育、自交不親和、雄性不育、抗逆和抗病等生命過程中起著重要的調控作用。為了對水稻類受體激酶的功能及生物學特性進行深入研究,本實驗克隆表達了水稻中 5個類受體激酶抗原表位片段,以純化的蛋白質為抗原免疫新西蘭兔,獲得了特異性較高的多克隆抗體。Western blotting檢測結果表明,5個類受體激酶均在葉片中表達。
水稻,類受體激酶,蛋白質純化,多克隆抗體
Abstract:Receptor-like kinase involves self-incompatibility, male sterility, stress responses, and disease resistance.To better understand the physiological function and biological characteristics of rice receptor-like kinase, we cloned five predicted epitope fragments of rice receptor-like kinase.The purified fusion protein was used as antigen to immunize rabbit to get specific polyclonal antibodies.Western blotting analysis shows that the five receptor-like kinases were expressed in rice leaves.
Keywords:rice, receptor-like kinase, protein purification, polyclonal antibody
水稻Oryza sativaL.是世界上最重要的谷類作物之一,是研究作物產量、轉基因、雜種優勢、植物病蟲害抗性和其他抗逆等方面的重要遺傳材料。近年來,隨著水稻基因組的測序完成,越來越多的研究者將目光投向了這一模式植物。
植物類受體激酶(Receptor-like kinase,RLK)在真核生物中廣泛存在,水稻中已經發現了約1 130個類受體激酶,其數目大約是擬南芥的 2倍[1],它們在抗病、發育、自交不親和性、植物激素的信號傳遞、器官脫落、細胞分裂和生長等過程中發揮重要作用。目前克隆的植物類受體激酶數目不多,主要來源于擬南芥、水稻、油菜和煙草等植物[1],對植物類受體激酶的功能更是知之甚少。
植物類受體激酶主要由胞外結構域、跨膜結構域和胞內激酶結構域 3部分組成。根據胞外受體結構域的特點,植物類受體蛋……