菊酯類農(nóng)藥殘留的快速測定

王朝瑾，李彥磊，王文豪，唐 明

（1.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海 201306；2.上海市營養(yǎng)食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗站，上海 200082）

現(xiàn)在農(nóng)藥殘留給食品帶來的影響已受到人們重視。尤其是近年來，隨著人們生活水平的不斷提高，食品的安全性也越來越受到重視，故對農(nóng)藥最高殘留限量的要求也日益嚴(yán)格。聯(lián)合國食品法典委員會（FAO/WHO）對食品中的農(nóng)藥殘留量作了十分嚴(yán)格的規(guī)定[1]。而擬除蟲菊酯是果樹上防治害蟲經(jīng)常使用的殺蟲劑。因此，建立一套高效、快速、準(zhǔn)確的測定食品中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留速測方法迫在眉睫。

目前國內(nèi)外對菊酯類的殘留分析方法包括色譜法[2-4]、免疫分析法[5]等。而無論是氣相色譜檢測，還是液相色譜檢測，都存在需昂貴儀器等缺點，并且不能進(jìn)行現(xiàn)場在線檢測或跟蹤監(jiān)測;免疫分析法有特異性強，靈敏度高等優(yōu)點，但同樣儀器價格昂貴，且也只用于單一化合物或結(jié)構(gòu)相似的化合物。

筆者以甲氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、聯(lián)苯菊酯為研究對象來研究菊酯類農(nóng)藥的測定，參考了硫化鈉顯色以測定丙烯菊酯等擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留量[6]，發(fā)現(xiàn)在一定濃度范圍內(nèi)菊酯類農(nóng)藥的含量與吸光度呈正比關(guān)系。同時通過選擇適當(dāng)?shù)娜軇┖蜅l件優(yōu)化實驗，擬開發(fā)出一種能夠簡單、快速、準(zhǔn)確檢測樣品中菊酯類農(nóng)藥殘留量的方法。

1 材料與方法

1.1 材料

試劑（主要試劑均為分析純）：九水合硫化鈉、硫酸鈉、氫氧化鉀、四氯化碳、無水乙醇、石油醚（沸程60～90℃）、丙酮。配制混合菊酯（甲氰、溴氰、氰戊、聯(lián)苯菊酯按1∶1∶1∶1混合），儲備液（1 000 mg/kg），標(biāo)準(zhǔn)液（10 mg/kg）。

儀器：UV-2000型分光光度計（尤尼柯上海儀器有限公司）、SZ-88-I恒溫臺式恒溫振蕩器（太倉市光明試驗分析儀器廠）。

1.2 方法

1.2.1 比色法測定 將蔬菜洗凈，用剪刀剪成碎塊，稱取20 g樣品，置于250 mL三角瓶中，三角瓶中各加30 mL丙酮，加入20 g無水硫酸鈉脫水，同時加入1 g活性炭脫色。用保鮮膜封住瓶口，充分搖勻后用超聲波振蕩器振蒎提取20 min，拿出三角瓶浸泡在涼水中冷卻至蔬菜與硫酸鈉結(jié)晶成塊后用濾紙過濾溶液于100 mL小燒杯中，將燒杯放入70℃水浴鍋中加熱，蒸發(fā)近干、無溶液存在后冷卻至室溫，然后加入適量石油醚充分溶解后移至25 mL容量瓶中待測。向容量瓶中分別加入2 mLCCl4溶液（注意此時要做個空白，即同樣加入2 mLCCl4溶液，但是不加樣品提取液），搖勻，再加入2 mL顯色劑，蓋蓋充分搖勻15 s，用石油醚定容到25 mL。于60℃水浴中加熱30 min，至溶液顯橙紅色時取出，靜置30 min。溶液過濾于25 mL容量瓶中，以空白為零管在UV-2000型分光光度計470 nm波長處測吸光度。

1.2.2 色譜法測定 同樣的樣品處理，樣品蒸干后石油醚溶解轉(zhuǎn)移到25 mL容量瓶中。色譜條件如下。載氣:N2；色譜柱:BD-35MS（安捷倫）；進(jìn)樣口溫度：260℃；柱溫：100℃保持 1 min，10℃/min 升至270℃保持15 min；檢測器溫度:300℃；流速:3.0 mL/min；定量：外標(biāo)法。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理中浸提液的選擇

擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是親酯性化合物，用有機溶劑提取比較容易。目前常用的提取菊酯類農(nóng)藥的溶劑有乙腈、丙酮、丙酮－石油醚、丙酮－正己烷等溶劑。GB/T5009.46—2003提取使用丙酮和石油醚混合溶劑[7]，但存在凈化步驟較多，溶劑的消耗量大，前處理周期過長等缺點。有文獻(xiàn)報道[8]，采用乙腈提取效果較好，雜質(zhì)少，但乙腈的毒性較大，而且蔬菜水果中的水分難以分離。本方法采用無水硫酸鈉吸附樣品中的水分，再用石油醚提取。試驗結(jié)果表明本法提取率較高，且消除了水分干擾，有利于進(jìn)行萃取凈化處理。

2.2 比色法對不同菊酯類農(nóng)藥的測定

做甲氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯、聯(lián)苯菊酯以及這四者混合菊酯的標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如圖1所示。

在0~4 mg/kg的線性范圍內(nèi)氰戊菊酯回歸方程A=0.085 9 X+0.025 1（r=0.990 9），溴氰菊酯回歸方程為A=0.109 6 X+0.047 2（r=0.985 9），聯(lián)苯菊酯的回歸方程為 A=0.133 4 X+0.014 4（r=0.992 0），甲氰菊酯其回歸方程為A=0.109 6 X+0.047 2（r=0.985 9），混合菊酯 A=0.110 8 X+0.003 1（r=0.991 4），皆符合比爾定律。

圖1 不同菊酯的濃度與吸光度的關(guān)系

2.3 色譜法與比色法對樣品的測定結(jié)果比較

將甲氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、聯(lián)苯菊酯的標(biāo)準(zhǔn)品，分別加入到已知含量的菠菜樣品中，分別進(jìn)行5次，用比色法和色譜法檢測。結(jié)果如表1所示，比色法完全可以滿足對樣品的初步篩選測定要求的。在圖2中保留時間17.378 min的為聯(lián)苯菊酯，保留時間17.994 min的為甲氰菊酯，保留時間22.371 min的為氯氰菊酯，保留時間24.635 min和25.312 min的皆為氰戊菊酯，保留時間27.828 min的為溴氰菊酯。

表1 菊酯樣品測定結(jié)果

圖2 菊酯色譜圖

3 結(jié)論

通過本試驗，找到了一種能夠快速準(zhǔn)確的測定菊酯類殘留農(nóng)藥的方法，整個測定時間不超過4 h，加標(biāo)回收率能控制在84.0%～115.0%之間。筆者用該法對從冬季到夏季時令蔬菜，如番茄、黃瓜、杭州小白菜、雞毛菜、青菜、空心菜、芹菜、生菜、筧菜等進(jìn)行跟蹤檢測，均收到了良好的效果，適合于食品中菊酯類農(nóng)藥的殘留快速檢測。該方法的不足之處是只能檢測出是菊酯類農(nóng)藥，不能檢測出具體是哪種菊酯農(nóng)藥，且檢出限為0.25 mg/kg。雖然該法靈敏度比氣相色譜法低，但在實際工作中使用方便，操作簡單、快速、成本低，可用于完成蔬菜中菊酯類農(nóng)藥的殘留量初篩試驗，然后對陽性及可疑陽性試樣，用氣相色譜法進(jìn)行復(fù)檢。

[1]張志恒.農(nóng)藥合理使用規(guī)范和最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社.2007.

[2]湯 峰，岳永德，花日茂，等.板蘭根中三種擬除蟲菊酯殺蟲劑的殘留分析[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2001，3（1）:69-72.

[3]孔祥虹，仇農(nóng)學(xué)，李建華，等.毛細(xì)管氣相色譜法測定中藥材中多種擬除蟲菊醋農(nóng)藥殘留量[J].分析實驗室，2005，25（4）:89-92.

[4]高天兵，張曙明，田金改.三七、白芍及西洋參中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的殘留量測定 [J].藥物分析雜志，1999，19（5）:313-316.

[5]劉曙照.九十年代農(nóng)藥殘留分析新技術(shù)[J].農(nóng)藥，1998，37（6）:11-13.

[6]Cuets C，Dale WE.Rapid Colorimetric determination of total Pyrethrin by Reaction with sulfur，allethrin and furethrin[J].Anal Chem，1953，25（8）:1367-1369.

[7]GB/T5009.146—2003.食品衛(wèi)生檢驗方法-理化部分[S].

[8]蔣定國，方從容，楊大進(jìn)，等.測定茶葉中27種有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分殘留氣相色譜法 [J].中國食品衛(wèi)生雜志，2005，17（5）:385-389.