年齡和處理季節對山羊超數排卵效率影響因素的研究

劉長河 常仲樂 邱建華 （山東農業大學動物科技學院 泰安 271018）

趙中旺 （山東省汶上縣糧食局）

超數排卵和胚胎移植技術是加速優良種畜繁育和胚胎工程技術所必不可缺的基礎，但現有超排方法的獲卵率和可用胚數還都不太穩定[1～3]。自2006年代以來，泰安郊區為了擴大遼寧絨山羊的純繁速度，先后自遼寧引進絨山羊，以改善當地山羊產絨量，為提高純種遼寧絨山羊的數量，對遼寧絨山羊實施了超數排卵和胚胎移植研究。

1 材料與方法

1.1 材料

用于同期發情的情酮栓由南京農業大學生產，促卵泡素(FSH)由中國科學院動物研究所生產，供體羊為純種遼寧絨山羊共40余只，年齡5歲以下，產后60d以上。選擇體型較大、繁殖正常、經產的當地山羊作為受體。

1.2 方法

1.2.1 供體超排處理 于發情周期任1天在供體山羊陰道內放置情酮栓。放置栓后第14d開始進行超數排卵處理：（1）促卵泡素6～7mg以4d遞減量注射；注射2次/d，于第7次注射時取出情酮栓。（2）去除情酮栓后用結扎輸精管的公羊試情，接受爬跨時肌注促黃體素并輸精。間隔8～10h重復輸精。

1.2.2 胚胎的采集、鑒定 在供體山羊發情后6～7d，利用手術法采集桑椹胚和囊胚。按Elsden等的分級標準分為A、B、C和D4個等級。只有A、B級胚胎被判定為可用胚。

1.2.3 受體羊的發情同步處理 受體山羊與供體組同時放入情酮栓。在供體去除情酮栓前0.5d去除受體情酮栓，去栓后，用試情公羊檢查發情，并記錄發情日期和時間，同組供體與受體同步發情的差異不超過24h。

1.2.4 胚胎移植 受體母羊局部麻醉，腹中線切口，暴露出卵巢和子宮，向子宮角前1/3移入胚胎。

1.2.5 數據處理 利用SPSS軟件進行數據處理，統計各測定指標的平均數、標準差，用LSD法檢驗分析組間差異。

2 結果

2.1 不同年齡山羊超數排卵和胚胎移植效果

在秋季對43只年齡為1～4歲年齡的遼寧絨山羊采用國產FSH 6～7mg 4d遞減處理。從表1可以看出，2～3歲山羊平均排卵數最高，顯著高于<1歲山羊；2歲和3歲山羊可用胚率差異不顯著，但顯著高于<1歲山羊。2～3歲山羊胚胎經移植妊娠率最高，顯著高于<1歲山羊和4歲山羊。遼寧絨山羊超數排卵和胚胎移植的最佳年齡應為2～3歲。

表1 不同年齡山羊超數排卵和胚胎移植效果

2.2 季節對超數排卵效果的影響

對45只2～3歲年齡山羊在春(3～5月)、秋(9～11月)和冬季(12～次年2月)用國產FSH 6～7mg 4d遞減劑量處理。結果發現，秋季平均排卵數顯著高于春季，可用胚率顯著高于冬季。春季與冬季在平均排卵數和可用胚率上差異均不顯著。胚胎經移植妊娠率冬季顯著低于春、秋兩季，春季與秋季間無顯著差異。

表2 季節對超數排卵效果的影響

3 討論與小結

研究發現，秋季平均排卵數顯著高于春季，可用胚率顯著高于冬季。春季與冬季在平均排卵數上差異不顯著。胚胎經移植妊娠率冬季顯著低于春、秋兩季，春季與秋季間無顯著差異。這說明，在山東地區冬季對山羊移植妊娠率有影響。因此，盡管經過多年的飼養馴化遼寧絨山羊似乎已經失去繁殖的季節性，但秋季仍然是遼寧絨山羊的發情盛季，這一時期卵巢對激素的反應能力、卵質量都優于其它季節。冬季胚胎經移植妊娠率低可能與在檢胚及胚胎運輸過程中低溫打擊對胚胎造成損傷有關[4～5]。

對于優秀供體，人們總是期望盡早實施超排，獲得大量胚胎進行移植[6]。筆者的試驗結果還表明，遼寧絨山羊在1歲前已具備了對FSH反應的能力，超排可以獲得一定數量的可用胚，但平均排卵數、可用胚率和妊娠率均明顯低于其它年齡山羊。因此，遼寧絨山羊進行超排和胚胎移植的最佳年齡為2～3歲。

[1] Loi P, Ptak G.Embryo transfer and related technologies in sheepreproduction. Reprod Nutr Dev 1998; 38:615–628.

[2] Cognie Y. State of the art in sheep-goat embryo transfer.Theriogenology 1999; 51:105–116.

[3] Ptak G, Loi P.Offspring from onemonth-old lambs: studies on the developmental capability of prepubertal oocytes. Biol Reprod 1999;61:1568–1574.

[4] Ptak G, Dattena M. Ovum pick up in sheep: present situation and future perspectives. 14th International Congress on Animal Reproduction;Stockholm; July 2–6, 2000; p. 267.

[5]Downing JA, Joss J. Ovulation rate and the concentrations of gonadotrophic and metabolic hormones in ewes fed lupin grain. J Reprod Fertil 1995;103:137–145.

[6]王建國，張鎖鏈等，山羊手術法胚胎移植對供受體母羊重復使用的影響[J]，內蒙古大學學報(自然科學版),1997,28(3).414-418.