單細胞凝膠電泳技術在環境毒理學實驗教學中的應用

汪承潤，王臣，姜傳軍，王昊，程濤，陳敬宇，胡玲玲，陳芬芬

（淮南師范學院 生命科學系，安徽 淮南 232001）

單細胞凝膠電泳技術在環境毒理學實驗教學中的應用

汪承潤，王臣，姜傳軍，王昊，程濤，陳敬宇，胡玲玲，陳芬芬

（淮南師范學院 生命科學系，安徽 淮南 232001）

介紹了植物細胞核DNA損傷的單細胞凝膠電泳的檢測方法，依次包括載玻片的預處理和編號、細胞核的分離、包埋、解旋、電泳、中和、脫水、染色、攝像及其結果的軟件分析等過程。并應用該方法檢測了暴露于鎘離子污染后的蠶豆幼苗葉片組織細胞核的DNA損傷程度。結果表明，該方法簡單、易行，適合在環境毒理學的實驗教學和科研中推廣和應用。

單細胞凝膠電泳（SCGE）；環境毒理學；DNA損傷；遺傳毒性；實驗教學

1984年，Ostling等[1]首次提出了單細胞凝膠電泳(single cell gel electrophoresis，SCGE)技術，并利用該技術在中性條件下檢測γ射線引起的DNA雙鏈斷裂。因其細胞拖尾形狀頗似彗星，又稱彗星試驗(Comet Assay)。1988年，Singh等[2]在此基礎上加以改進并建立了堿性單細胞凝膠電泳技術，不僅可以檢測DNA單、雙鏈斷裂，還可用來檢測堿性不穩定位點、DNA交聯和不完全切除修復位點等，因此大大提高了SCGE檢測的敏感性。這是一種測定和研究單個細胞DNA鏈斷裂的新技術，與傳統的DNA損傷檢測方法相比，具有簡便、快速、靈敏、樣品量少、無需放射性標記等優點，已廣泛，應用于人和動物細胞核DNA損傷和修復的研究[3-9]。雖經多次改良，但最常用的還是堿性SCGE方法。近年來，SCGE技術也逐步推廣到真核單細胞微生物和植物細胞核DNA損傷的研究[10-15]。……