多巴胺D1受體基因多態(tài)性與精神分裂癥相關(guān)性研究

鄧華 陳鈺 崔愛(ài)

多巴胺系統(tǒng)在精神分裂癥的病因，發(fā)病機(jī)制研究中一直受到關(guān)注。研究表明，D1受體mRNA在紋狀體，伏隔核和嗅結(jié)節(jié)分布很豐富，該受體主要位于額葉前皮層，人們發(fā)現(xiàn)它對(duì)精神分裂癥患者出現(xiàn)幻覺(jué)等思維混亂可能有影響。目前人類已成功克隆DRD1基因，DRD1基因定位于5q35.1，全長(zhǎng)約1.7kb，無(wú)內(nèi)含子［1］。我們采用中國(guó)漢族精神分裂癥患者與正常組對(duì)照研究，來(lái)探討DRD1基因多態(tài)性與精神分裂癥的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 ①精神分裂癥組(簡(jiǎn)稱患者組):共75例，均符合中國(guó)精神疾病分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)第4版精神分裂癥的診斷標(biāo)準(zhǔn);排除內(nèi)分泌疾病、酒/藥物濫用或依賴者、嚴(yán)重軀體疾病、近期內(nèi)接受輸血治療者。75例均為漢族，男32例，女43例;年齡15～65歲，平均(20 ±30)歲;病程1.5～10年;②正常對(duì)照組(簡(jiǎn)稱對(duì)照組):共70名，均來(lái)自本醫(yī)院工作人員，本人無(wú)精神疾病、無(wú)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝、其他嚴(yán)重軀體疾病及酒/藥物濫用史。70名均為漢族，男30名，女40名;年齡20～45歲，平均(22 ±15)歲。

1.2 研究方法 ①DNA提取:抽取外周靜脈血5 ml，肝素抗凝，常規(guī)酚-氯仿抽提法提取基因組DNA;②DRD1基因片段擴(kuò)增與多態(tài)性檢測(cè):采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增DRD1基因片段。引物序列參照參考文獻(xiàn)［2］;引物:采用5ˊ-TGA TTG TCA CCT ACA CCA GGA TCT-3ˊ，5ˊ-CTT AAA AGA ACT TTC CGG TTG AGA-3ˊ。PCR反應(yīng)體系:總體積50 μl，內(nèi)含模板 2.0 μl，引物各 1.5 μl，dNTP 5.0 μl，TaqDNA 聚合酶 0.4 μl(10U/μl)，Tris-HCl 緩沖液 10 mmol/L，KCL 50 mmol/L，Mg2+1.0 mmol/L。PCR反應(yīng)條件:95°預(yù)變性5 min后 95°60s，55°80s，72°80s，經(jīng) 30 個(gè)循環(huán)最終 72°，延伸 7 min。取擴(kuò)增產(chǎn)物10 μl，2%瓊脂糖凝膠電泳，經(jīng)BIO-RAD Gel Doc 1000凝膠分析儀檢測(cè)。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用科學(xué)統(tǒng)計(jì)包(SPSS 10.0版本);Hard-Weinberg檢驗(yàn)基因型分布是否平衡［3］;χ2檢驗(yàn)比較患者組與對(duì)照組及對(duì)照組不同性別間的等位基因分布頻數(shù)。P＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者組與對(duì)照組DRD1基因多態(tài)性比較見(jiàn)表1。

表1 患者組與對(duì)照組基因多態(tài)性頻數(shù)分布(例)

2.2 患者組與對(duì)照組不同性別DRD1基因多態(tài)性與精神分裂癥關(guān)聯(lián)分析見(jiàn)表2。男性患者與對(duì)照組間等位基因頻數(shù)分布無(wú)顯著差異，但女性患者與對(duì)照組，男性患者之間的等位基因頻數(shù)分布有顯著差異。

表2 患者組與對(duì)照組不同性別基因多態(tài)性頻數(shù)分布(例)

3 討論

精神分裂癥是公認(rèn)的影響人類健康的多基因復(fù)雜疾病，遺傳因素與常見(jiàn)精神分裂癥關(guān)系密切，但具體病因與發(fā)病機(jī)制至今未明。研究發(fā)現(xiàn)，精神分裂癥患者較正常人多巴胺D1受體少43%，說(shuō)明D1受體減少可能與精神分裂癥形成有關(guān)。其中多巴胺假說(shuō)解釋精神分裂癥發(fā)病機(jī)制是近些年研究的熱點(diǎn)之一，認(rèn)為腦內(nèi)多巴胺量的增加及受體活性的提高是引起精神分裂癥的主要原因。

多巴胺受體位于額葉前皮層，其功能與結(jié)構(gòu)異常可導(dǎo)致多種精神疾病。一般認(rèn)為精神分裂癥陰性癥狀可能與中腦邊緣與皮質(zhì)DA系統(tǒng)中D1受體活動(dòng)過(guò)盛有關(guān)。一些研究發(fā)現(xiàn)陰性癥狀的精神分裂癥額葉局部腦血流rCBF明顯降低，正電子發(fā)射掃描PET發(fā)現(xiàn)糖、氧利用低下，甚至有額葉萎縮［2］。本研究未能出現(xiàn)以上結(jié)果。

本研究顯示，中國(guó)漢族精神分裂癥患者與正常對(duì)照組等位基因頻數(shù)分布無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，未發(fā)現(xiàn)DRD1基因多態(tài)性與精神分裂癥有明顯關(guān)聯(lián)，但性別不同可能影響疾病易感性，女性138bp等位基因頻數(shù)分布相對(duì)男性患者較高。可能種群不同性別不同對(duì)疾病影響不同;疾病的多樣性或樣本量受限都會(huì)影響疾病的表達(dá)與發(fā)生發(fā)展，故還需進(jìn)一步研究探討。

［1］ Sunahara RK，Niznik HB，Weiner DM，et al.Human dopamine D1 receptor encoded by an intronless gene on chromosome 5.Nature，1990，347(6288):80-83.

［2］ Andreasen NC.Brain imaging:Appllcations in psychiatry.Science，1988，239:1381-1388.