胡蘿卜花粉離體萌發(fā)研究

宋紅霞，劉艷麗，武 喆，張光星

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，山西太谷030801）

胡蘿卜為復(fù)傘形花序，一個(gè)總花序有8～12層，在不整枝的情況下，一般由90～110個(gè)小花序組成，單個(gè)花器官比較小[1]。它主要利用雄性不育進(jìn)行制種，因此育種研究工作中常存在父母本花期一致與否的問題，也常因花期低溫、陰雨等不良?xì)夂驐l件影響正常授粉而降低結(jié)籽率。為了解決這些問題，生產(chǎn)上常采用人工輔助授粉，而在人工授粉之前，通常要對(duì)花粉的生活力進(jìn)行測(cè)定。

本試驗(yàn)在前人研究基礎(chǔ)上，采用離體萌發(fā)法檢測(cè)胡蘿卜的花粉活力，以期篩選并優(yōu)化出最佳的胡蘿卜花粉活力萌發(fā)配方。

1 材料和方法

1.1 材料

供試胡蘿卜品種為山西農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院培育的甜紅1號(hào)的父本。

1.2 方法

分2個(gè)步驟進(jìn)行試驗(yàn)：第一步，培養(yǎng)基篩選，以離子水為對(duì)照，設(shè)置了8個(gè)配方，即A.蔗糖100 g/L+ 硼 酸 300 mg/L；B.BK 100 mg/L；C.BK 100 mg/L+ 蔗糖 100 g/L；D.PEG（分子量為 6 000）200 g/L；E.PEG 200 g/L+ 硼酸 300 mg/L；F.PEG 200 g/L+蔗糖 100 g/L+硼酸 300 mg/L；G.PEG 200 g/L+BK 100 mg/L；H.PEG 200 g/L+ 蔗糖 100 g/L+BK 100 mg/L。其中，BK成分為硼酸 300 mg/L，Ca（NO3）2·4H2O 300 mg/L，MgSO4·7H2O 200 mg/L，KNO3100 mg/L。第二步，在篩選出配方的基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化，對(duì) PEG、硼酸、Ca（NO3）2·4H2O 3 個(gè)因素各設(shè) 6 個(gè)水平，PEG：50，100，150，200，250，300 g/L；硼酸：100，200，300，400，500，600 mg/L；Ca（NO3）2·4H2O：100，200，300，400，500，600 mg/L。

花粉采集：選擇當(dāng)天開花的花盤，將花粉采集在事先鋪好硫酸試紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，蓋好蓋子帶回實(shí)驗(yàn)室室溫保存。

用品消毒：試驗(yàn)所用器具都要在消毒柜中消毒或在100℃條件下消毒20 min，冷卻后取出用酒精棉球擦干放在大培養(yǎng)皿中備用。經(jīng)過消毒過的載玻片在使用時(shí)要盡量減少與手指接觸的面積，以減少污染。

花粉的播種與活力檢測(cè)[2]：均在花粉采集當(dāng)天進(jìn)行。用滴管吸取液體培養(yǎng)基滴2～3滴于凹面載玻片上，用經(jīng)酒精消毒過的頭發(fā)絲蘸取少量花粉，并將其散于培養(yǎng)基表面，注意花粉分布要松散均勻（一般情況下，一個(gè)顯微鏡視野以分布100～200粒花粉粒為宜）。……