鄧懷峰,郭仁貴,何章勇
(湖南省郴州市第一人民醫院,湖南郴州 423000)
微柱凝膠技術在產前檢查中的應用體會
鄧懷峰,郭仁貴,何章勇
(湖南省郴州市第一人民醫院,湖南郴州 423000)
目的:探討微柱凝膠技術在產前檢查中診斷和預防新生兒溶血病臨床應用價值。方法:本院于2008年6月~2009年12月對180例門診和住院O型待產孕婦采取微柱凝膠法檢測血型抗體IgG。并觀察其檢測結果。結果:180例受檢孕婦中,抗A抗體效價正常者59例(32.8%),抗B抗體效價正常者68例(37.8%),兩者合計為127例,占70.6%;抗A抗體效價≥64者32例(17.8%),抗B抗體效價≥64者21例(11.7%),兩者合計為53例,占29.4%。結論:微柱凝膠法檢測靈敏度高,對檢驗孕婦產前IgG抗體效價具有較高的臨床應用價值,值得臨床推廣。
微柱凝膠;產前檢查;新生兒溶血病
本院于2008年6月~2009年12月對180例門診和住院O型待產孕婦采取微柱凝膠法檢測血型抗體IgG。并觀察其檢測結果,報道如下:
2008年6 月~2009年12月在本院門診做產前檢查或住院待產的O型孕婦(丈夫是非O型),共180例。
儀器采用瑞士達亞美微柱凝膠檢測系統(包括定速離心機、判讀儀、恒溫孵育器、Coombs卡等),37℃水浴箱。試劑采用5%標準A、B型紅細胞懸液、0.2 mol/L 2-巰基乙醇(2-Me)(由長春博迅生物技術有限責任公司提供)。
取待檢孕婦血清和同體積的0.2 mol/L 2-巰基乙醇混勻后,置37℃水浴箱孵育30 min,將血清中免疫球蛋白(IgM)破壞。 用卡標記好稀釋的位數,在試管中按 1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512 倍比稀釋經 2-巰基乙醇處理好的孕婦血清,依次將倍比稀釋血清50 μl分別加入標記卡中;在所有孔中加入50 μl 5%A型或B型紅細胞懸液(與丈夫血型相同的紅細胞懸液)。置37℃水浴箱孵育15 min,用離心機離心900 r/min 2 min。
結果判定,以反應程度達到1+的最大稀釋倍數定為某抗體的效價值。抗體效價值≥64者為異常。180例受檢孕婦中,抗A抗體效價正常者59例(32.8%),抗B抗體效價正常者68例(37.8%),兩者合計為127例,占70.6%;抗A抗體效價≥64者32例(17.8%),抗B抗體效價≥64者21例(11.7%),兩者合計為53例,占29.4%。見表1。

表1 180例孕婦血清抗體效價測定結果(n)
新生兒溶血病(HDN)是新生兒期常見疾病之一,嚴重時可導致死胎,新生兒重度貧血、黃疸甚至死亡[1]。ABO系統引起的HDN是由于母親體內存在著與胎兒不相配合的IgG性質血型抗體引起的。其中母親是O型,胎兒為A型或B型是引起HDN的最主要原因。隨著孕婦血清IgG抗A(B)抗體效價的增高,HDN發生率也隨著增加。產前血清學檢查結果以抗體效價64為臨界值,當母親血清中抗體效價≥64時,胎兒及嬰兒有受害的機會;當效價≥128時,新生兒很可能受害,當抗體效價≥512時,幾乎100%受害,必須進行預防性治療[2],可考慮應用血漿置換降低抗體水平[3-4]。
因此,應用科學的方法,準確測定孕婦血清IgG抗A(B)抗體效價,可為產前診斷和預防ABO-HDN提供依據,是預防HDN的重要措施。微柱凝膠技術(microcolumn gel Immunoassay,MGI)是建立在傳統血型血清學基礎上的一項免疫學檢測技術,其設計理論先進,操作簡單迅速,靈敏度高[5-6],結果準確直觀,具有很好的臨床檢測效果,可檢測到微弱的滴度變化,其靈敏度高于試管法,它對臨床某種疾病或臨床異常情況的診斷、病程監測、療效評估、疾病預后判斷的能力較強,能夠更好地提示臨床醫生做好預防工作,對預防新生兒溶血病有很好的指導作用。此外,微柱凝膠實驗的密度梯度液層可洗滌紅細胞,防止雜蛋白混入,易于暴露出靶抗原,微小的玻璃層使凝集的紅細胞更加便于判斷[7-8]。同時,微柱凝膠法與傳統試管法相比,具有操作簡便、敏感、易于標準化、影響因素少、重復性好、結果可保存等優點,適用于大批量標本的檢測。
綜上所述,應用微柱凝膠技術測定孕婦血清IgG,抗體效價,具有靈敏度高、重復性好、實驗結果能長期保持、隨時可復查等優點,能夠使實驗方法簡單化,操作標準化,用于常規性產前檢測,值得推廣應用。
[1]王紅梅.夫婦ABO血型不合的孕婦產前免疫學檢查分析[J].中國輸血雜志,2000,13(1):30-31.
[2]盧發強,劉景漢,歐陽錫,等.孕產婦血型抗體與HDN發生率及溶血程度的臨床研究[J].中國醫師雜志,2004,6(10):1300.
[3]胡志紅.母嬰ABO血型不合與新生兒溶血病的關系[J].山西醫科大學學報,2004,35(6):618.
[4]王梁平,彭道波,趙暉,等.微柱凝膠法與凝聚胺法抗體檢出比較分析[J].臨床檢驗雜志,2001,19(6):355.
[5]李沙,鄭山根,歐陽錫林,等.柱凝集技術不規則抗體的初步觀察[J].中國輸血雜志,1999,12(3):168.
[6]周友泉,王厚照,謝則金,等.微柱凝膠法檢測孕婦IgG抗體效價[J].中國醫藥導報,2005,2(6):92-93.
[7]武建.柱凝集技術的臨床應用及其實驗研究現狀[J].中國輸血雜志,2003,16(2):369.
[8]盧磊,劉燕.微柱凝膠技術在新生兒溶血病檢測中的應用[J].中國現代醫生,2010,48(13):38-39.
R446.11
B
1674-4721(2010)12(a)-083-02
2010-10-11)