ENA檢測對診斷系統性紅斑狼瘡的應用及臨床價值

羅云鵬，譚立明

(1、江西省皮膚病專科醫院真菌科 330001；2、南昌大學第二附屬醫院檢驗科，江西 南昌 330006)

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種以免疫調節異常，表達多種自身抗體、形成多種免疫復合物并導致組織病理損傷為特征的自身免疫性疾病[1]。SLE診斷主要依靠臨床表現，而在疾病早期臨床表現較為明顯，臨床需要能早期診斷的實驗室指標，而LE細胞的檢查恰是在患者早期就診、無藥物影響的情況下進行的檢測，陽性率極高，為達到早期診斷和治療的目的。這對SLE的早期診斷提供了有利的實驗室指標、爭取到治療的有利時間，同時聯合可提取性核抗原(ENA)多種自身抗體的檢測，能夠更好地觀察病情發展，結合臨床表現為指導治療起到有力的輔助作用[2]。隨著免疫學的發展及對SLE研究的進一步深人，陸續發現了SLE患者血清中含有多種標志性抗體[3]。因此早期檢測患者體內的相應抗體，對SLE等自身免疫性疾病的診斷十分重要。本文對90例SLE患者ENA檢測，有助于這些問題的解決，現將結果報告分析如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源 90例SLE患者均來自南昌大學第二附屬醫院住院及門診患者，時間為2008年7月～2010年 2月，男性24例，女性 66例，年齡為7～73歲，平均年齡為42歲；所有患者皆符合風濕病學會制定的SLE診斷標準[4]。對照組為南昌大學第二附屬醫院健康體檢者40例，其中男性10例，女性30例，年齡為17～61歲，平均年齡為37歲。

1.2 標本的收集 所有的被檢患者標本均為靜脈空腹采不抗凝血 2～3ml，以 2500r/min速度離心15min分離血清。不能及時檢測時，-20℃保存備用。

1.3 試劑和方法 ENA試劑采用深圳市伯勞特生物制品有限公司生產的風濕病自身抗體免疫印跡試劑。測定步驟：①操作為在含有印跡膜條的反應槽中加入洗滌應用液1ml和待檢血清10μl，置搖床上37℃搖動30min，棄去反應槽液體，在吸水紙上拍干，加入洗滌應用液1ml，洗滌1min棄去反應槽液體，反復洗滌4次，最后在吸水紙上拍干液體。在反應槽中加入洗滌應用液0.5ml和酶聯試劑10μl。置搖床上37℃搖動30min，棄去反應槽液體，在吸水紙上拍干，加入洗滌應用液1ml，洗滌1min棄去反應槽液體，反復洗滌4次，最后在吸水紙上拍干液體。在反應槽中分別加入顯色劑A、B各0.5ml，在搖床上搖動2～10min，顯色，待質控帶和陽性區帶顯色清晰后加終止液0.5ml，在搖床上搖動2min，用自來水沖去槽中液體，取出印跡膜條，置吸水紙上，待干后與標準帶對照判斷結果。

1.4 結果判斷標準 將印跡膜上起始線與標準帶起始線對齊，觀察陽性顯色區帶與對應的標準帶位置即可判斷顯色帶是何種自身抗體。

1.5 統計分析 應用SPSS 13.0軟件進行統計分析，數據均以均數標準差(x±s)表示，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 90例SLE患者及40例健康對照檢測ENA結果。詳見表1。

2.2 ENA檢測在SLE患者中的各項臨床評價指標。詳見表2。

表1 90例SLE患者及40例健康對照檢測ENA結果

3 討論

表2 ENA檢測在SLE患者各項實驗評價指標結果

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種涉及許多系統和臟器的自身免疫性疾病，由于細胞和體液免疫功能障礙，產生多種自身抗體。可累及皮膚、漿膜、關節、腎及中樞神經系統等，并以自身免疫為特征，患者體內存在多種自身抗體，不僅影響體液免疫，亦影響細胞免疫，補體系統亦有變化。發病機理主要是由于免疫復合物形成，血清中出現多種自身抗體，活動期補體水平下降。因此，血清自身抗體的檢測對臨床診斷有極大幫助。

抗ENA抗體是診斷SLE的主要實驗室指標[5]，抗Sm抗體是SLE的血清標志性抗體，對早期、不典型的SLE或經過治療緩解后SLE回顧性診斷有很大幫助。抗Sm抗體所作用的靶抗原是U族小分子細胞核糖核蛋白粒子；單獨有此抗體存在者，常有中樞神經受累。本組檢測結果顯示，SLE病人抗Sm抗體陽性率為31.1%，與文獻報道的陽性率相近[6]。抗Sm抗體被認為是SLE的標志性抗體，對SLE的診斷有很高的特異性。抗Sm抗體水平隨SLE疾病的活動性而波動，提示可作為某些患者SLE是否活動的指標。有研究者認為抗Sm抗體單獨出現于SLE常伴隨有神經系統的損害，對早期不典型的SLE或治療后回顧性診斷有極大的幫助[7]。從理論上講，檢測到抗Sm抗體的同時，也應檢測到抗U1RNP抗體。本組抗U1RNP抗體的陽性率為8.89%，較文獻報道的陽性率略低[8]，差異可考慮檢測方法的不同。抗U1RNP抗體常常在SLE活動期中存在，而且不會隨病情的緩解立即消失，可持續1～2年后才轉陰，抗U1RNP抗體陽性的SLE患者，則腎病發生率較低；抗Sm抗體陽性時，則發生狼瘡性腎炎的可能性較大；抗SSA抗體和抗SSB抗體主要與干燥綜合征(SS)有關，在系統性紅斑狼瘡患者中抗SSA和抗SSB抗體陽性率根據檢測方法不同而有差異。據表1顯示，在SLE中抗SSA抗體的陽性率為24.44%，抗SSB抗體的陽性率為6.67%，抗RO-60抗體陽性率為46.67%，陽性率最高，抗RO-60抗體、抗SSA抗體和抗SSB抗體與SLE病情相關，具有抗RO-60抗體、抗SSA和抗SSB抗體的SLE患者出現光過敏、皮損和紫癜者多見。此外，有研究表明，抗SSA和抗SSB抗體陽性可造成新生兒狼瘡及嬰兒心臟傳導阻滯等先天性心臟病[9]。

各種抗體單獨出現除抗Sm抗體和抗Rib抗體較高外其它均較低。從表1看出ENA的檢測特異性很高(正常人均為陰性)，其中每一項目檢測的敏感性較低，ENA中的各項聯合檢測則能提高其敏感性和特異性。系統性紅斑狼瘡臨床表現多樣，變化多端，實驗室檢查尤其是自身抗體的檢測為人們早期正確診斷和治療系統性紅斑狼瘡提供了有利證據。但由于實驗的方法不同、質量控制的差異、檢測的敏感性和特異性的高低，故不能以某一項的檢測結果來診斷疾病，而應根據臨床癥狀和其他檢查綜合判定，這樣才不至于漏診或誤診。應對不同情況進行分析，以提高對系統性紅斑狼瘡的診斷率[10]。

綜上所述，抗ENA多肽抗體譜檢測靈敏度高、結果可靠、方法簡便、易于推廣，對SLE的診斷有重要的臨床價值。

[1]詹克勤,吳杰敏,洪志海.ENA檢測對診斷系統性紅斑狼瘡的應用及臨床價值探討[J].江西醫學檢驗,2007,25(6):581-582.

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[5]劉軍鋒,賈克剛,劉運德.免疫印跡法檢測在自身免疫性疾病ENA多肽抗體譜及臨床意義[J].國際檢驗醫學雜志,2006,(7):669-670.

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