染料木素自乳制劑的制備及溶出度研究

夏麗文,李大維,張麗杰

(哈藥集團 制藥六廠,哈爾濱 150056)

自乳化藥物傳遞系統(self-emulsifying drug delivery systems,SEDDS)是由藥物、油、非離子表面活性劑(SA)所組成的均一、澄清、各相同性的溶液,有時也包括助溶劑.此體系在胃腸道內或 37℃環境中,通過胃蠕動或溫和攪拌即可自發形成水包油型乳劑.SEDDS可減少由于藥物與胃腸壁的直接接觸而引起的刺激,提高藥物的生物利用度,同時可避免水不穩定藥物的水解及藥物對胃腸道的刺激[1-3].染料木素(genistein)為異黃酮類化合物,化學名稱為 5,7,4′-三羥基黃酮(C15H10O5),難溶于水,具有明顯防治骨質疏松癥、心血管疾病和抗腫瘤等多種藥理作用[4-5].染料木素的口服生物利用度極低,限制了其臨床應用.本文制備了染料木素自乳化給藥系統,以提高染料木素的體外溶出度和口服生物利用度.并以染料木素普通膠囊為參比制劑考察了自乳化制劑的在不同釋放介質中的體外溶出度.

1 儀器與試藥

1.1 儀器

日本島津 LC—10A高效液相色譜儀 (配SPD—10紫外可見檢測器,CK chrom色譜工作站);;HZQ-C空氣振蕩器(哈爾濱市東聯電子技術開發有限公司);溶出儀(ZRS-智能型溶出儀,天津大學無線電廠);FA2104電子天平(上海精密儀器科學有限公司).

1.2 試藥

染料木素(陜西慧科科技開發有限公司,純度＞98%);染料木素對照品(中國藥品生物制品檢定所);染料木素普通膠囊(自制,染料木素 50mg,微晶纖維素 75 mg,羧甲基淀粉鈉 75 mg);Cremophor EL 35(BASF公司);油酸乙酯(北京長城化學試劑有限公司);Tween 80(北京益利精細化學品有限公司);Transcultol P(法國佳法賽公司);其它試劑均為分析純.

2 實驗方法與結果

2.1 染料木素自乳化軟膠囊的制備

稱取適量的染料木素,加入處方量的油相、乳化劑和助溶劑,油相為油酸乙酯,乳化劑為 T50C50(50%Tween 80-50%Cremophor EL35),助溶劑為Transcultol P,其最佳比例為 45∶45∶10,藥物為輔料總量的 10%.在 40℃,100 r/min空氣振蕩器中振蕩24 h左右使染料木素完全溶解.所得的溶液與明膠在(25±2)℃、相對濕度 40%的條件下,經自動旋轉軋囊機壓制成軟膠囊,每粒含染料木素約 50mg.

2.2 染料木素普通膠囊的制備

稱取適量的染料木素,加入處方量的微晶纖維素和羧甲基淀粉鈉,混合均勻后裝入 2號膠囊中.

2.3 溶出度的測定

2.3.1 色譜條件

色譜柱為 Diamonsil C18柱(200mm×4.6 mm I.D.,5 μm);以甲醇 -0.05%磷酸(60∶40)為流動相;流速為 1.0m L/min;檢測波長為 260 nm,柱溫為 30℃,進樣量為 10μL.

2.3.2 標準曲線

精密稱取染料木素對照品約 20 mg置 100 m L量瓶中用甲醇溶解,流動性定容,得到 200mg/L母液 ;分別從中精密移取 0.1、0.5、1、2、5m L于 10 m L量瓶中,移取 0.1、0.5 mL于 100 mL量瓶中用流動性定容 ,得到 0.2、1、2、10、20、40、100mg/L標準液.分別精密取系列標準溶液 10μL注入液相色譜儀,以峰面積對質量濃度進行線性回歸.標準曲線為 A=20 854C-623.2(r=0.999 8).結果表明染料木素在 0.2～100 mg/L內線性關系良好.

2.3.3 方法精密度和回收率實驗

按“2.3.2”項下的方法配置 1.0、10.0、40.0 mg/L 3種質量濃度的標準溶液,于同日內連續測定 6次,計算其日內測定的 RSD;對上述 3種質量濃度的溶液于 6 d內分別進行測定,計算日間測定的 RSD;同時計算方法回收率.結果見表1.

表1 方法的精密度和回收率,n=6

2.3.4 溶出度的測定

分別取染料木素自乳化軟膠囊和普通膠囊各6粒,照中國藥典(2005版)二部溶出度測定法(附錄Ⅹ C第一法),分別以蒸餾水、0.1 mol/L鹽酸、pH值為 6.8磷酸鹽緩沖液 900mL為溶出介質,溫度為(37±0.5)℃,轉速為 100 r/min,依法操作,分別在 5、10、20、30、45、60min時 ,取溶液 5mL(同時補充同溫同體積的新鮮介質),用 0.45μm微孔濾膜濾過,取續濾液,照高效液相色譜法,在 260 nm的波長處測定峰面積,計算累積溶出量,結果見圖1.自乳化制劑中的染料木素 20min的溶出度即可達 90%以上,而普通膠囊中的染料木素 45 min的溶出度不足 30%,將染料木素制成自乳化膠囊后,溶出度較普通膠囊有明顯提高.

圖1 染料木素自乳化軟膠囊和普通膠囊的溶出曲線

3 討 論

選擇 Transcultol P作為助溶劑,主要作用是溶解藥物,當 Transcultol P的比例過高,不利于軋制軟膠囊.以 T50C50(50%Tween80-50%Cremophor EL35)為混合乳化劑乳化效果要好于 Tween80單獨作為乳化劑.由于 SEDDS處方中使用了大量的表面活性劑,長期服用可能對機體產生毒性,而助溶劑可能與膠囊殼相互作用導致藥物滲出[6],故在表面活性劑量和助溶劑量盡可能小的前提下,同時保證藥物充分溶解和形成的乳劑較好為原則,最終確定了該處方.

由溶出度試驗結果可見,SEDDS中染料木素的溶出度明顯高于普通膠囊,表明 SEDDS可以顯著提高難溶性藥物的體外溶出度,進而有助于提高口服生物利用度.

染料木素自乳化制劑在三種釋放介質(蒸餾水、0.1 mol/L鹽酸、pH 6.8磷酸鹽緩沖液)中的溶出度無顯著性差別,表明釋放介質對染料木素自乳化制劑的溶出度無影響.

[1] POUTON CW.Self-emulsifying drug delivery systems:assessment of theefficiency of emulsification[J].Int JPharm.,1985,27:335-48.

[2] POUTON CW.Formulation of self-emulsifying drug delivery systems.Adv Drug Del Rev.,1997,25(4):47-58.

[3] GURSOY R N,BENITA S.Self-emulsifying drug delivery systems(SEDDS)for improved oral delivery of lipophilic drugs[J].Biomed Pharmacother,2004,58(3):173-82.

[4] 黃 枚,陳利銘.染料木素防治癌癥的研究進展[J].海峽藥學,2000,12(3):9-10.

[5] 王劍波,顧 宜,郭 萍,等.紫外分光光度法測定染料木素膠囊含量和溶出度[J].藥物分析雜志,2004,24(5):473-476.

[6] CHARMAN SA,CHARMANW N,ROGGR M C,et al.Selfemulsifying drug delivery systems:formulation and biopharmaceutic evaluation of an investigational lipophilic compound[J].Pharm Res,1992,9:87-93.